羅萬蓉

慢性乙型肝炎(CHB)為我國常見感染性肝病，乙肝病毒e抗原(HBeAg)陽性CHB患者具有病程短、病毒復制活躍等特點，使其治療較為困難[1]。聚乙二醇干擾素(PEG-IFN)是一種強效抗病毒藥物，能抑制病毒復制，具有較高的HBeAg血清轉(zhuǎn)換率，對控制復發(fā)有積極意義[2]。然而，經(jīng)PEG-IFN治療后，仍有部分患者應答不佳，未能獲得良好療效[3]，故及時評估患者病情發(fā)展及療效非常重要。但CHB患者治療周期較長，且HBeAg血清轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)化情況在治療短期難以觀察，因此，探尋一種及時的療效評估指標很有必要。唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素7(Siglec-7)是一種主要表達于自然殺傷細胞(NK細胞)表面的跨膜蛋白，能調(diào)節(jié)NK細胞的細胞毒性，與NK細胞功能密切相關(guān)。而NK細胞作為免疫系統(tǒng)重要組成部分，在抗病毒感染中發(fā)揮重要作用[4]?；诖?，本研究分析了Siglec-7評估PEG-IFN治療CHB的效果，探討其作為預測或評價PEG-IFN治療CHB效果指標的可行性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 回顧性分析2016年3月～2018年3月在醫(yī)院行PEG-IFN治療的68例CHB患者（CHB組）臨床資料，納入標準：符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)》[5]的 CHB 診斷標準；HBeAg陽性；年齡18～65歲。排除標準：合并丙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒等其他病毒感染；合并惡性腫瘤；伴自身免疫性肝炎、肝硬化等其他肝?。晃?、酗酒、癲癇史；精神疾病史者。另將醫(yī)院同期62例體檢健康者作為對照組。CHB組女性23例，男性45例；年齡 28～54（41.54±8.21）歲。 對照組女性 25 例，男性37 例；年齡 27～54（40.29±8.14）歲。 兩組年齡、性別比較無顯著差異（P＞0.05）。

1.2 治療方法及療效評價標準 CHB組均給予Peg-IFNα-2a 皮下注射，180 μg/次，1 次/w，連續(xù)治療48 w后，評價臨床療效。顯效：HBeAg陰轉(zhuǎn)伴血清轉(zhuǎn)換，且HBV DNA陰轉(zhuǎn)；有效：HBeAg陰轉(zhuǎn)，而血清未轉(zhuǎn)換，HBV DNA陰轉(zhuǎn)；無效：未達到上述標準或病情加重。根據(jù)臨床療效評價結(jié)果[6]，將顯效與有效者納入有效組，無效者納入無效組。

1.3 檢測指標 （1）HBeAg陰轉(zhuǎn)率和血清轉(zhuǎn)換率、HBV DNA陰轉(zhuǎn)率：治療48 w后，使用化學發(fā)光法測量患者空腹血清HBeAg、e抗體(抗-HBe)水平，以 HBeAg 0～1 lgs/拷貝為陰性， 抗 -HBe＞1 lgs/拷貝為陽性，以HBeAg陰性伴抗-HBe陽性為血清學轉(zhuǎn)換；利用聚合酶鏈式反應(PCR)測量HBV DNA水平，以 HBV DNA＜500拷貝/ml為陰性。（2）NK 細胞計數(shù)：通過聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心法（試劑購自美國Hyclone公司）獲得患者外周血單個核細胞，采用FACSCantoⅡ流式細胞儀（美國BD公司）檢查NK細胞計數(shù)。（3）Siglec-7在NK細胞表面表達情況：將聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心法獲得的單個核細胞，加入抗-Siglec-7抗體 （購自美國eBioscience公司），檢測Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB組治療效果 CHB組治療后，HBeAg陰轉(zhuǎn) 28例（41.18%），HBeAg血清轉(zhuǎn)換 22例（32.35%），HBV DNA陰轉(zhuǎn)40例（58.82%）；治療效果，顯效21例（30.88%），有效 7例（10.30%），共 28例（41.18%）納入有效組；無效40例（58.82%），納入無效組。

2.2 兩組NK細胞計數(shù)和Siglec-7表達情況比較治療48 w后，CHB組NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均較治療前升高（P＜0.05），但均低于對照組（P＜ 0.05，表 1）。

表1 兩組NK細胞計數(shù)和Siglec-7表達情況比較（%）

2.3 有效組與無效組NK細胞計數(shù)和Siglec-7表達情況比較 治療前，有效組NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均高于無效組（P＜0.05）；治療48 w后，兩組NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均較治療前升高（P＜0.05），且有效組均高于無效組（P＜ 0.05，表 2）。

表2 有效組與無效組NK細胞計數(shù)和SigIec-7表達情況比較（%）

3 討論

PEG-IFN為目前治療CHB的常用抗病毒藥物，可與受乙型肝炎病毒(HBV)感染的肝細胞結(jié)合，激活肝細胞內(nèi)抗病毒蛋白及其激酶合成，分解病毒mRNA，發(fā)揮抑制病毒復制作用[7]。但治療無效者并不少見，因此，尋找及時評估CHB治療效果指標是研究熱點。NK細胞是機體免疫系統(tǒng)重要組成部位，可識別并殺傷病毒感染細胞及腫瘤細胞，也能參與CHB患者免疫功能，且隨CHB患者免疫功能的抑制而降低[8]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，Siglec-7作為NK細胞表面抑制性分子，在NK細胞活化、功能較強的亞群中可高表達，與NK細胞功能呈顯著相關(guān)性[9]。對此，本研究就Siglec-7在NK細胞表面表達情況評估PEG-IFN治療CHB效果的可行性展開分析，以探尋預測CHB治療效果的新型指標，為臨床制定及調(diào)整CHB治療方案提供新思路。

本研究結(jié)果顯示，CHB組治療后，HBeAg陰轉(zhuǎn)率 41.18%，HBeAg血清轉(zhuǎn)換率 32.35%，HBV DNA陰轉(zhuǎn)率58.82%，但治療無效達58.82%。提示PEGIFN治療效果仍需加強監(jiān)測，及時發(fā)現(xiàn)治療無效者。另外，CHB組治療前后NK細胞計數(shù)和Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均低于對照組，分析其原因可能與CHB患者受HBV感染，免疫系統(tǒng)嚴重受損，NK細胞數(shù)量顯著下降，且細胞活性也受到抑制，使NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率降低。而治療48 w后，CHB組NK細胞計數(shù)和Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均較治療前升高，表明PEG-IFN可在一定程度上控制或緩解病毒感染對免疫功能的抑制作用，改善機體免疫功能，使NK細胞活性增強、數(shù)量增加。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，有效組治療后NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率均高于無效組，證實Siglec-7表達情況與PEG-IFN治療CHB效果有關(guān)。治療有效者免疫功能改善效果好，機體NK細胞得以顯著上調(diào)，細胞功能也增強，使NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率處于較高水平。不僅如此，有效組治療前NK細胞計數(shù)、Siglec-7在NK細胞表面陽性表達率也高于無效組，說明治療前免疫系統(tǒng)抑制較少者PEG-IFN治療效果好。提示NK細胞計數(shù)及Siglec-7表達情況可作為PEGIFN治療效果的預測指標，利于臨床盡早選擇合適治療方案。

總之，CHB患者NK細胞計數(shù)及Siglec-7陽性表達率均低于健康人群，治療有效者在治療前后均具有較高的NK細胞計數(shù)及Siglec-7陽性表達率，臨床可根據(jù)CHB患者NK細胞計數(shù)和Siglec-7表達水平預測CHB療效。