王 芳
(丹東市中心血站檢驗(yàn)科,遼寧 丹東 118002)
隨著醫(yī)療水平和醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展,全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)被越來越多的應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中,全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)又稱為全自動(dòng)酶免分析儀和全自動(dòng)酶免工作站[1]。我站在使用全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)HBsAg、抗HCV等進(jìn)行檢測(cè)時(shí),常由于各類因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成一定的影響,使得檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)不同程度的花板現(xiàn)象,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性,降低了全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)的精確性[2]。本文為了探究含氯消毒液對(duì)全自動(dòng)酶免檢測(cè)結(jié)果的影響,選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻(xiàn)血樣本進(jìn)行了研究,主要研究?jī)?nèi)容報(bào)道如下。
1.1 一般資料:選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻(xiàn)血樣本作為本次的研究對(duì)象,對(duì)其采用夾心ELISA方法進(jìn)行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)以及丙型肝炎抗體(抗HCV)的檢測(cè)。儀器選用瑞士哈美頓公司生產(chǎn)的FAME24/20型號(hào)的全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng),整機(jī)包含分配、洗板、酶標(biāo)判讀等所有過程。消毒液使用的為萬金消毒片,產(chǎn)自北京萬金兆元消毒技術(shù)有限公司,執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為XNH 011 2017。本次研究所使用的HBsAg、抗HCV試劑均選用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格,并確保各類試劑在正常使用日期內(nèi)且保存良好[3]。
1.2 方法
1.2.1 實(shí)驗(yàn)環(huán)境的控制:實(shí)驗(yàn)室溫度和濕度均采用空調(diào)和加濕器進(jìn)行控制,實(shí)驗(yàn)室每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后均需嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室消毒標(biāo)準(zhǔn)對(duì)本次實(shí)驗(yàn)中用到的器材、器皿、操作臺(tái)以及地面進(jìn)行消毒和清潔處理,先試用消毒液對(duì)實(shí)驗(yàn)器具等進(jìn)行消毒,對(duì)板架等使用消毒液進(jìn)行浸泡處理,處理后先用流水進(jìn)行多次沖洗,之后用蒸餾水進(jìn)行沖洗,沖洗后進(jìn)行烘干或者晾干,確保下次實(shí)驗(yàn)正常使用[4]。
1.2.2 ELISA實(shí)驗(yàn)經(jīng)過:對(duì)照組采用未經(jīng)過含氯消毒液進(jìn)行消毒的板架進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn),觀察組采用經(jīng)過含氯消毒液(使用600 mg/L含氯消毒液進(jìn)行充分的浸泡)進(jìn)行消毒的板架進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)。將觀察組經(jīng)消毒液處理過的板架采用HBsAg試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn),操作過程嚴(yán)格按照全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)以及手工法對(duì)本次研究的200例血清樣本進(jìn)行檢測(cè),經(jīng)過全自動(dòng)酶免分析儀全過程檢測(cè)、判讀結(jié)果后,觀察出現(xiàn)花板的情況,將花板例數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)算花板率。
1.2.3 消除其他干擾,控制實(shí)驗(yàn)變量:在使用對(duì)照組實(shí)驗(yàn)時(shí),不更換實(shí)驗(yàn)的實(shí)際和洗液,觀察檢測(cè)結(jié)果未出現(xiàn)花板的情況,使用手工法進(jìn)行檢測(cè)時(shí),使用膠紙進(jìn)行封板,觀察檢測(cè)結(jié)果仍然未出現(xiàn)花板的情況。在使用全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)進(jìn)行常規(guī)實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)確保儀器處于正常使用狀態(tài),確保不出現(xiàn)其他交叉污染。
1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo):對(duì)本次入選的200例無償獻(xiàn)血者的血漿標(biāo)本分別采用對(duì)其采用未經(jīng)過含氯消毒液進(jìn)行消毒的板架以及經(jīng)過含氯消毒液進(jìn)行消毒的板架進(jìn)行夾心ELISA實(shí)驗(yàn),對(duì)血清標(biāo)本的HBsAg以及抗HCV采用自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè),分析檢測(cè)結(jié)果,將兩組的HBsAg檢測(cè)的OD值、S/CO值以及抗HCV檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)的花板情況進(jìn)行比較,探究含氯消毒液對(duì)全自動(dòng)酶免檢測(cè)結(jié)果的影響。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次研究100例無償獻(xiàn)血者的血清標(biāo)本研究結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析,運(yùn)用t檢驗(yàn)方法,并采用χ2進(jìn)行檢驗(yàn),用(%)表示組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的花板出現(xiàn)例。當(dāng)P<0.05時(shí),表示兩組數(shù)據(jù)之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 兩組全自動(dòng)酶免檢測(cè)結(jié)果花板出現(xiàn)率對(duì)比分析:由表1可知,使用含氯消毒液進(jìn)行消毒處理過的板架進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)后的觀察組血清樣本中抗HCV花板率為26.00%(26/100),而使用未經(jīng)氯消毒液進(jìn)行消毒處理過的板架進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)后的對(duì)照組血清樣本中抗HCV花板率為0.00%(0/100),觀察組明顯高于對(duì)照組,其中χ2=14.236,P<0.05,差異性顯著。
表1 兩組全自動(dòng)酶免檢測(cè)結(jié)果花板出現(xiàn)率對(duì)比分析
2.2 兩組全自動(dòng)酶免檢測(cè)結(jié)果中HBsAg陽性對(duì)照以及陰性對(duì)照檢測(cè)值中的OD值、S/CO值對(duì)比分析:將對(duì)照組和觀察組使用不同板架采用全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析后,得出:將HBsAg進(jìn)行陽性以及陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)后,觀察組血清樣本中對(duì)于HBsAg陽性對(duì)照以及陰性對(duì)照檢測(cè)值中的OD值、S/CO值明顯低于對(duì)照組,其中陽性對(duì)照,t=3.58,P<0.05,陰性對(duì)照,t=6.29,P<0.05,差異性顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)是指將已知的抗原或者抗體吸附于固相載體的表面,使得被酶標(biāo)記后的抗原抗體余固相表面進(jìn)行反應(yīng)的過程,利用該技術(shù)可以對(duì)一部分常見的分子量比較大的抗原和抗體進(jìn)行檢測(cè)和篩查,該技術(shù)主要的檢測(cè)原理即利用酶和特定的底物發(fā)生反應(yīng),會(huì)顯現(xiàn)出不同的顏色來進(jìn)行判定[5]。本文選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻(xiàn)血樣本作為本次的研究對(duì)象,使用全自動(dòng)酶免檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)時(shí),將未經(jīng)過含氯消毒液進(jìn)行消毒的實(shí)驗(yàn)器材的顯色結(jié)果作為本次研究的對(duì)照組,將經(jīng)過含氯消毒液進(jìn)行消毒的實(shí)驗(yàn)器材的顯色結(jié)果作為觀察組。結(jié)果表明:觀察組血清樣本中抗HCV花板率為26.00%,明顯高于對(duì)照組的0.00%,P<0.05;觀察組對(duì)于HBsAg陽性對(duì)照以及陰性對(duì)照檢測(cè)值中的OD值、S/CO值明顯低于對(duì)照組,統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示P<0.05,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
綜上所述,在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)將使用含氯消毒液處理過的板架等器材使用蒸餾水進(jìn)行多次沖洗并晾干后,再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),能夠有效避免含氯消毒液對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的誤差。