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      非洲豬瘟的研究進展

      2019-12-14 08:44:17劉杉杉孫偉楊慧
      中國動物保健 2019年12期
      關鍵詞:屏障豬瘟豬場

      劉杉杉,孫偉,楊慧

      (1.銅仁職業(yè)技術學院農學院貴州銅仁 554300;2.民族中獸藥分離純化技術國家地方聯(lián)合工程研究中心貴州銅仁 554300)

      非洲豬瘟(African swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起豬的一種急性、高度致死性的傳染病[1,2]。ASF 最早于1921年發(fā)現(xiàn)于非洲地區(qū)的肯尼亞,之后在歐洲、拉美和亞洲等60 個國家均有發(fā)現(xiàn)[3],給世界經濟造成了嚴重的損失。該病于2018年8 月在我國遼寧沈陽報道了第一例之后,在其他多個省份陸續(xù)也有報道,嚴重危害我國的養(yǎng)豬業(yè)[4]。目前,尚未有防控ASF的有效疫苗,這對ASF 的防控提出了更加嚴峻的要求。本文將從ASF 病原學、流行病學、診斷與具體的防控措施等方面進行綜述。

      1 病原學

      ASFV 是一種呈二十面體對稱的囊膜病毒,其病毒粒子直徑約為200nm,屬于非洲豬瘟病毒科,非洲豬瘟病毒屬[5]。ASFV基因組長度約為170~190kbp,雙股線狀DNA,共編碼150~200 種蛋白質。ASFV主要在感染豬體內免疫細胞(單核細胞、巨噬細胞及網(wǎng)狀內皮細胞)的細胞質中增殖,但細胞核也是病毒DNA 早期合成的位點之一[6,7]。ASFV 還可在某些軟蜱體內復制。目前,ASFV 已適應在多種傳代細胞系中生長增殖,包括PK15、Vero、BHK21等。

      ASFV 結構復雜,其中抗原變異主要發(fā)生在結構蛋白P150、P14、P12 等;P72為主要衣殼蛋白,具有高度保守性,常將此蛋白作為血清學檢測的抗原,另根據(jù)P72編碼基因具有較高的同源性的特點,將ASFV 分為24 個與地域相關的基因型[8,9];P54 主要作用于病毒的吸附、入侵、內化等,在病毒感染過程中發(fā)揮重要作用,可作為血清學抗體檢測抗原。

      ASFV 對pH 變化和干燥的抵抗力強,普通消毒藥物對其無效,但可被乙醚、氯仿等脂溶劑以及次氯酸鹽有效殺滅。在60℃經10min 或55℃經30min 的條件下,均可使病毒滅活。ASFV 對外界環(huán)境抵抗力強,室溫條件下感染豬的排泄物、血清或血液中病毒可存活一年以上。冷凍保存的感染豬肉及其制品中,病毒可存活數(shù)月,在土壤中可存活3 個月。由于該病毒在豬體內、豬肉及其制品和環(huán)境中存在時間均較長,因此易于擴散傳播,尤其是污染的圈舍、未熟的豬肉、腌肉、運輸生豬的裝備和車輛、生豬屠宰場、泔水等都可傳染。

      2 流行病學

      ASF 不傳染人,感染豬后病死率可達100%。ASFV 感染豬后,其臨床癥狀和病理變化與經典豬瘟非常相似,極易將兩種病混淆。主要表現(xiàn)為高熱(豬體溫一般高達40.5~42℃),皮膚發(fā)紺有出血點,甚至出現(xiàn)大量無癥狀死亡的豬只,其中脾臟異常腫大為其典型癥狀。豬是ASFV 自然感染的唯一家畜,野豬也易感,野豬感染后的臨床癥狀和病理變化與家豬類似。鈍緣蜱是ASFV 的自然宿主。被ASFV 污染的豬肉制品(如火腿、腌肉、風干肉等)、飼料、水源、運輸車、餐食剩余垃圾等制成的泔水,發(fā)病豬,帶毒豬等都是ASFV 的傳染源。ASFV 可通過消化道和呼吸道進行傳播。健康家豬通過與感染ASFV 的病豬或感染ASFV 的野豬直接接觸,食用被ASFV 污染的食物,接觸被ASFV 污染的空氣等,均可被感染。

      1921 年非洲地區(qū)東部的肯尼亞發(fā)現(xiàn)了第一例ASF 以來,ASF一直在撒哈拉以南的非洲中、南部國家流行,隨后本病開始于1957 年傳入葡萄牙等歐洲地區(qū)國家,20 世紀70 年代開始傳入古巴、西班牙、意大利、馬耳他島、巴西和多美尼亞共和國等國家,給世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了毀滅性的打擊。其中塞內加爾、喀麥隆、安哥拉、剛果等非洲國家和西班牙、法國、荷蘭、意大利等歐洲國家以及巴西、古巴、海地等拉美國家是該疫病的常發(fā)國家。本世紀初,ASF 再次開始在世界上多個國家,例如德國、捷克、贊比亞、美國、俄羅斯聯(lián)邦、烏干達等國家密集出現(xiàn),使得ASF 的防控顯得尤其嚴峻。2017 年傳播至俄羅斯遠東地區(qū)伊爾庫茨克[10]。2018 年,全球ASF疫情明顯重于往年,新增疫情國家數(shù)同比上升30%,疫情數(shù)同比增加10.7%,部分國家甚至呈現(xiàn)大暴發(fā)、大流行態(tài)勢。2018 年8 月ASF 傳入我國,首先于遼寧沈陽暴發(fā),基因型測定結果為基因II型,與2017 年傳入俄羅斯遠東地區(qū)的基因型一致[11]。之后的幾個月,席卷了大半個中國。截至2019 年7 月3 日,我國共發(fā)生ASF疫情143 起,116 萬余頭生豬被撲殺,其中25 個省(區(qū)、市)的疫區(qū)已經全部解除封鎖。目前,世界上僅有13 個國家實現(xiàn)了ASF 的根除。對于我國而言,ASF 疫情雖然給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了沉重打擊,但是目前已經明顯可控,養(yǎng)豬業(yè)的復養(yǎng)也在慢慢恢復。

      3 診斷

      ASF 的臨床癥狀和病理變化與豬的許多其他出血性疾病,尤其是豬瘟病毒很難區(qū)分,死亡率一般為100%,且沒有有效的疫苗對其進行防控,因此需要快速準確的檢測方法對ASF 進行檢測。ASF 病原學檢測方法主要包括聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)、實時熒光定量PCR(real-time PCR)、紅細胞吸附試驗(hemadsorption,HAD)、熒光抗體試驗(flurescent treponemal antibody absorption,F(xiàn)TA)、環(huán)介導等溫擴增技術(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)等[12,13]。ASFV 的P72 基因比較保守,因此針對P72 基因建立了多種抗原檢測方法,其中以普通PCR 和real-time PCR 方法居多,這也是臨床上檢測ASF 病原最常用的兩種快速檢測方法[14-16]。HAD 試驗原理是感染ASFV 的巨噬細胞或單核細胞能夠被豬的紅細胞吸附,形成玫瑰花環(huán)樣或桑葚狀形態(tài),這種方法比較耗時,且現(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)部分毒株感染的巨噬細胞并不能被紅細胞吸附。因此該方法也逐漸被淘汰,或者更多時候是作為檢測ASF 的補充方法[17]。FTA 可以用于檢測ASFV 可疑豬組織,或者HAD 陰性的巨噬細胞或單核細胞,敏感性和準確性均較高,對急性期感染的ASF 具有較好的檢測效果,但需要專業(yè)的技術人員,對試驗設備也有較高的要求,因此也只是作為ASF 檢測的輔助手段之一。

      血清學檢測方法主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和間接免疫熒光試驗(indirect fluorescent antibody assay,IFA)等[12]。ELISA 方法最為常用,作為包被抗原的既有基于全病毒的包被物,也有基于P72 蛋白、P54蛋白等作為抗原包被物的阻斷ELISA,目前也已經有很多商品化的試劑盒。通過檢測感染豬體內的ASF 抗體水平,可以了解其感染情況,但如果是亞急性或慢性感染的豬體內ASF 抗體不易檢出[18]。同樣,雖然IFA 具有更高的準確性和敏感性,但涉及到專業(yè)的技術人員和較高的設備要求,往往僅限于實驗室使用。

      4 防控

      目前,全世界尚未有有效的藥物和疫苗可以防控ASF 的感染[19]。對于尚無該疫情的地區(qū),要加強防控,建立ASF 監(jiān)測體系,完善ASF 凈化措施,將ASF 疫情隔離在外。一旦發(fā)現(xiàn)ASF 疫情,要盡快隔離病豬,撲殺患病豬群,銷毀死亡豬只,對運輸豬只的來往車輛、接觸病豬的相關人員以及圈舍都要進行嚴格的消毒處理,對廢棄物及時采取無害化處理措施;同時,對患病區(qū)周圍的豬群盡快采用血清學等方法進行疫情監(jiān)測。

      對于規(guī)?;i場,要建立三道屏障[20]。第一道屏障為物理性屏障,即建立圍擋。在豬場周圍架設鐵網(wǎng)和籬笆等,將豬舍與外界進行隔離。圍擋高度要大于1.5m,無常開式出入門,能夠有效阻擋嚙齒類動物進入,并嚴禁一切豬源產品和豬肉制品的進入。同時應當保證有專人巡察圍擋的有效性,做到至少一周一次。第二道屏障為生物安全屏障。對于養(yǎng)豬場的負責人,要主動認識到建立生物安全隔離區(qū)的重要性,能夠保證區(qū)域屏障的形成。禁止一切外源豬、豬源制品、泔水、豬肉產品等進入養(yǎng)殖場;對引進仔豬和授精精液進行檢測,確保無ASFV 攜帶;對豬場周圍的隔離帶可采取噴灑消毒液、燒荒等措施;豬場實行嚴格的消毒制度,不僅要對豬場內所有可能被污染的區(qū)域,而且要尤其注意進入豬場的車輛、人員要嚴格消毒,人員要嚴格執(zhí)行隔離期制度,在隔離期內禁止與生豬產品接觸;豬場內禁養(yǎng)一切寵物,包括犬、貓、鳥等,保證衛(wèi)生,做好滅鼠殺蟲等工作;對豬場內的病死豬、糞便等及時銷毀焚燒,做好無害化處理;豬場負責人要以身作則,帶頭執(zhí)行,嚴格執(zhí)行生物安全措施。第三道屏障為意識屏障。養(yǎng)殖場要緊繃生物安全神經,尤其是對出入的人員、車輛和進出的食品等做好消毒工作,建立嚴格的管理制度,流動車輛要注意做到先清洗后消毒,不能單純只進行消毒而忽略清洗;車輛駕駛人員、流動人員進入場區(qū)要執(zhí)行嚴格的消毒制度;消毒液的配置、使用和管理等以及消毒的環(huán)節(jié)均要設置專人負責,尤其確保消毒液配置的準確性,并做到消毒無遺漏。

      對于養(yǎng)殖戶,要執(zhí)行嚴格的飼養(yǎng)管理制度和生物安全措施。在調運生豬及其產品前要向有關檢疫部門申報、備案,嚴禁從發(fā)生疫情的省份地區(qū)調運生豬、仔豬和引種等;新引進豬要保證全進全出,隔離飼養(yǎng),避免接觸野豬;嚴禁飼喂豬源飼料制品和泔水等;對豬場進出的人員和車輛實行嚴格的消毒制度,豬場無關人員和無關車輛嚴禁進入;一旦發(fā)現(xiàn)ASF 可疑病例,立即隔離可疑豬群,限制可疑豬群的移動,并及時通知上報獸醫(yī)相關部門,對豬場各個環(huán)節(jié)進行消毒,積極配合做好豬群的移動監(jiān)管等工作。

      5 小結

      ASF 一直是我國重點防范的外來疫病,其病原結構和流行病學復雜,目前尚無有效的疫苗和治療方法,因此對該病的防控就顯得尤為重要。ASF 已經傳入我國,且目前正在流行,要求不僅要對已經發(fā)生的疫情進行控制,而且需要加強宣傳,提高民眾的防控意識,各級部門、養(yǎng)殖人員和普通民眾等各司其職,制定和嚴格執(zhí)行ASF 的綜合防控策略。

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