祝麗麗,叢碩,趙魯強(qiáng),黃吉娥,牟秋菊,張容,曾小菁**
(1.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬白云醫(yī)院 輸血科, 貴州 貴陽 550000;2.貴州醫(yī)科大學(xué)附院 輸血科,貴州 貴陽 550004)
隨著二孩政策的開放,我國每年大約增加幾十萬新生兒,以此推算,未來每年將新增兒童規(guī)模預(yù)計(jì)250萬左右[1]。新生兒溶血病(hemolytic disease of newborn,HDN)是由母嬰血型不合而引起的免疫性溶血疾病,母體內(nèi)產(chǎn)生與胎兒血型抗原不相容的IgG抗體,該抗體可順利通過胎盤屏障進(jìn)到胎兒體內(nèi),引起胎兒紅細(xì)胞破壞[2]。在人類血型系統(tǒng)中,引起HDN的血型主要為ABO血型,其次為Rh血型,但Rh血型引起的HDN病情較ABO血型抗體更嚴(yán)重[3-4]。Rh血型系統(tǒng)引起的HDN在妊娠期第1胎幾乎不發(fā)病,致病往往在第2胎,經(jīng)過首次分娩刺激后,HDN發(fā)病不再局限于Rh血型系統(tǒng)D抗原,Rh系統(tǒng)所有抗原(E、e、C及c)均可引發(fā)二孩HDN[5-7]。目前,臨床上僅對常規(guī)的D抗原進(jìn)行檢測,而E、e、C及c抗原的檢測多未開展,有報(bào)道顯示52.12%的E抗原陰性患者在妊娠或輸血等過程中可能會(huì)產(chǎn)生抗E抗體[8]。貴州D抗原陰性的人群僅占0.63%,未被臨床常規(guī)檢測的E、e、C及c抗原陰性人群則分別占49%、51%、3.7%及94.3%,所占比例遠(yuǎn)高于D抗原陰性人群,C、c、E及e抗原陰性人群發(fā)生HDN的概率也較高[9-10]。隨著二孩家庭的增多,由E、e、C及c抗原引起的HDN可能更多見。HDN發(fā)病早,預(yù)后較差,常導(dǎo)致流產(chǎn)、胎兒或新生兒肝脾腫大、核黃疸、腦癱等并發(fā)癥[10-12]。為進(jìn)一步研究Rh血型抗體與HDN的發(fā)病關(guān)系,本研究以首次妊娠的180例孕婦作對照,對180例二孩孕婦的Rh血型抗體及分娩胎兒Rh抗原血型(D、d、E、e、C及c抗原)及HDN進(jìn)行檢測,探討二孩孕婦Rh血型抗體與HDN的關(guān)系,報(bào)道如下。
1.1.1研究對象 選取2017年8月-2018年8月產(chǎn)科門診進(jìn)行產(chǎn)檢的180例無輸血史且在本院順利分娩的二孩孕婦 (孕次≥2,產(chǎn)次>2)作為研究組,孕婦年齡22~44歲、平均(31.9±1.5)歲,孕周34~41周、平均(37.7±2.1)周,其中RhD抗原陰性孕婦20例。并隨機(jī)選取180例同期檢查的首次妊娠且無輸血史的孕婦作為對照組,孕婦年齡20~39歲、平均(29.6±1.5)歲,孕周35~42周、平均(37.3±1.9)周,其中RhD抗原陰性孕婦16例。
1.1.2主要試劑與儀器 BASO離心機(jī),37 ℃溫育器(戴安娜公司),不規(guī)則抗體篩查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號細(xì)胞(上海市血液生物公司),抗體鑒定細(xì)胞(上海市血液生物公司);微柱凝膠卡(戴安娜公司)。
于分娩前鑒定2組孕婦的Rh血型、不規(guī)則抗體及其特異性,收集2組孕婦分娩的新生兒血液檢測Rh抗原血型(D、d、E、e、C及c抗原),記錄HDN發(fā)生情況,比較2組孕婦不規(guī)則抗體篩查陽性率、2組孕婦中RhD抗原陰性孕婦的不規(guī)則抗體陽性率、2組孕婦分娩的新生兒Rh-HDN的發(fā)生率,分析二孩孕婦Rh血型抗體與 HDN的關(guān)系,記錄5例發(fā)生Rh-HDN新生兒病情及治療情況。Rh抗原血型鑒定采用試管法,不規(guī)則抗體篩查、抗體特異性鑒定采用微柱凝膠法[13];參考文獻(xiàn)[3]對分娩新生兒的血液標(biāo)本進(jìn)行HDN試驗(yàn)。
研究組孕婦中不規(guī)則抗體篩查陽性例數(shù)為6例,陽性率為3.3%;對照組孕婦中未檢出不規(guī)則抗體,2組不規(guī)則抗體篩查陽性率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
研究組孕婦中檢出RhD陰性20例,不規(guī)則抗體陽性1例,陽性率為5%;對照組孕婦中檢出RhD陰性16例,未檢出不規(guī)則抗體,2組孕婦RhD抗原陰性孕婦的不規(guī)則抗體陽性率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
表1 孕婦不規(guī)則抗體篩查陽性率比較Tab.1 Comparison of positive rate of irregular antibody screening in pregnant women
注:(1)與對照組比較,P<0.05。
表2 RhD抗原陰性孕婦的不規(guī)則抗體陽性率比較Tab.2 Comparison of irregular antibody positive rate in RhD negative pregnant women
注:(1)與對照組比較,P<0.05。
跟蹤2組孕婦分娩后新生兒溶血情況,研究組孕婦分娩新生兒中有5例發(fā)生Rh-HDN,發(fā)生率為2.8%;對照組均未發(fā)生Rh-HDN,2組孕婦分娩新生兒Rh-HDN發(fā)病率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
6例不規(guī)則抗體篩查陽性的二孩孕婦抗體為:抗D抗體1例(16.7%)、抗E抗體4例(66.6%)及抗C抗體1例(16.7%),分娩后5例新生兒發(fā)生Rh-HDN,直接抗人球蛋白試驗(yàn)2+以上。見表3。
跟蹤結(jié)果顯示,5例發(fā)生Rh-HDN新生兒早產(chǎn)兒4例、足月兒1例,3名患兒接受治療、預(yù)后較好,另外2名患兒家屬拒絕治療、堅(jiān)持出院,導(dǎo)致患兒流失。5例患兒血紅蛋白濃度(Hb)、黃疸指標(biāo)及治療見表4。
表3 6例不規(guī)則抗體陽性二孩孕婦及新生兒Rh血型、孕產(chǎn)史、抗體效價(jià)及直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果Tab.3 Results of Rh blood group, pregnancy history, antibody titer and direct antiglobulin test in 6 irregular antibody positive pregnant women and newborns
表4 5例發(fā)生Rh-HDN新生兒Hb、黃疸指數(shù)及治療Tab.4 Hb, jaundice index and treatment in 5 neonates with Rh-HDN
本研究Rh抗體結(jié)果顯示,研究組孕婦不規(guī)則抗體陽性率為3.3%(6/180),而對照組中均為陰性,2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明妊娠是不規(guī)則抗體產(chǎn)生的重要原因之一。研究組孕婦分娩新生兒Rh-HDN發(fā)病率為2.8%(5/180),而對照組孕婦分娩新生兒發(fā)生Rh-HDN,2組發(fā)病率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示臨床上應(yīng)對既往有分娩史的孕婦檢測Rh血型抗體。這是因?yàn)楫?dāng)再次妊娠時(shí),胎兒紅細(xì)胞抗原再次刺激母體,產(chǎn)生高效價(jià)的IgG抗體穿過胎盤引起Rh-HDN。本研究跟蹤娩出嬰兒發(fā)現(xiàn),孕前抗體效價(jià)在1 ∶32以上,產(chǎn)后胎兒的直抗實(shí)驗(yàn)大于2+,均發(fā)生Rh-HDN,提示二孩孕婦Rh抗體效價(jià)對HDN有重要意義。
據(jù)報(bào)道,貴州省各族人群中RhD陰性的比率均低于0.63%,再加之獨(dú)生子女政策下,RhD血型不合導(dǎo)致的HDN發(fā)生率低[14]。本研究結(jié)果顯示,除了D抗原外,Rh其他血型抗原(E、e、C及c)也可導(dǎo)致HDN發(fā)生。本研究追蹤的6例不規(guī)則抗體陽性的孕婦,檢測其抗體均為Rh血型抗體,包含抗D抗體1例(16.7%)、抗E抗體4例(66.6%)及抗C抗體1例(16.7%),并且分娩后新生兒5例發(fā)生了HDN,溶血情況較重,直接抗人球蛋白試驗(yàn)為2+以上,臨床建議轉(zhuǎn)入新生兒科治療,其中3名患兒接受治療,預(yù)后較好;另外2名患兒家屬簽字拒絕治療,堅(jiān)持出院,導(dǎo)致患兒流失,無法跟蹤其預(yù)后。本研究證實(shí),抗E引發(fā)的HDN多于抗D,與唐雯等[15]報(bào)道一致。因此,孕育二孩時(shí),更應(yīng)注重由非抗D引起的HDN。這是因?yàn)榕R床常規(guī)重視RhD抗原的檢測,但并未關(guān)注Rh血型其他抗原(E、e、C及c)的檢測,這些未檢抗原也會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體引發(fā)HDN,提示應(yīng)對二孩孕婦產(chǎn)檢時(shí)應(yīng)進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測,及時(shí)排除包含抗D外的其他血型抗體的致病性,并將其列為預(yù)測Rh-HDN有效根據(jù),對于臨床作出早期產(chǎn)前治療與宮內(nèi)輸血具有重要作用。
綜上所述,在二孩妊娠組中孕婦不規(guī)則抗體篩查陽性率與胎兒Rh-HDN發(fā)病率具有緊密聯(lián)系,其主要原因是頭胎免疫產(chǎn)生的Rh血型抗體所致。故對于產(chǎn)前檢查的孕婦,尤其是二孩孕婦更應(yīng)加以臨床重視,檢測Rh5種抗原、不規(guī)則抗體篩查及鑒定抗體特異性,對早期預(yù)測和預(yù)防HDN、臨床的產(chǎn)前治療及宮內(nèi)輸血提供有效依據(jù),并且對于優(yōu)生優(yōu)育和提高人口素質(zhì)有著重要的意義。