液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷中的應(yīng)用價(jià)值

葉蓉

胸腔積液細(xì)胞學(xué)檢查是對(duì)惡性胸腔積液進(jìn)行腫瘤細(xì)胞染色鑒別、流式細(xì)胞DNA分析、染色體檢查的一種檢查方法。診斷鑒別的關(guān)鍵因素主要在于胸腔積液中是否可以檢出脫落的癌細(xì)胞。在實(shí)施常規(guī)制片的細(xì)胞學(xué)檢查過程中由于血液和黏液等干擾因素的影響，在非反應(yīng)性間皮細(xì)胞和腺癌細(xì)胞的診斷和鑒別過程中存在著一定的難度。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展和進(jìn)步，液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)在臨床中的應(yīng)用越來越廣泛，逐漸成為細(xì)胞學(xué)診斷應(yīng)用過程中主要的輔助手段[1]。本文研究實(shí)驗(yàn)以68例患者的胸腔積液樣本進(jìn)行研究，分析評(píng)價(jià)在其診斷鑒別過程中應(yīng)用液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)的臨床診斷價(jià)值，和常規(guī)診斷方式進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2019年1月在本院呼吸科門診以及住院患者送檢的68例胸腔積液樣本，對(duì)患者進(jìn)行支氣管鏡活檢以及肺穿刺活檢技術(shù)的診斷，結(jié)合患者病史、影像學(xué)檢查結(jié)果以及臨床資料得出最佳診斷結(jié)果，其中惡性積液即肺腺癌轉(zhuǎn)移患者有49例，男29例，女20例，平均年齡(53.50±3.47)歲；良性積液患者有19例，其中男11例，女8例，平均年齡(60.5±1.17)歲。

1.2 方法

1.2.1 常規(guī)制片方法 將胸腔積液樣本放置50 mL的離心管內(nèi)，離心：10 min，轉(zhuǎn)速：600 r/min，去除上清液，直接進(jìn)行涂片以及推片操作。

1.2.2 液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)制片方法 將胸腔標(biāo)準(zhǔn)樣本放置50 mL的離心管中，將轉(zhuǎn)速同樣設(shè)置為600 r/min，實(shí)施離心操作10 min，去除上清液，加入TM固定液30 mL，充分震蕩以后加入10 mL緩沖液，震蕩后將樣本全部轉(zhuǎn)移至12 mL的離心管內(nèi)，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)置為600 r/min，離心時(shí)間為10 min，將上清液去掉后進(jìn)行充分震蕩，震蕩時(shí)間為10～20 s，制備液基涂片，進(jìn)行巴氏染色以后，以備液基細(xì)胞學(xué)診斷使用[2]。

1.3 觀察指標(biāo) 評(píng)價(jià)細(xì)胞學(xué)診斷結(jié)果：同一醫(yī)生進(jìn)行兩種不同方法制備涂片的診斷，診斷結(jié)果為可疑細(xì)胞、見癌細(xì)胞以及未查見惡性腫瘤細(xì)胞。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，本次研究中，計(jì)量資料用(±s)表示，t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用率表示，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 鏡檢結(jié)果 常規(guī)涂片：細(xì)胞分布于整個(gè)鏡片的2/3，鏡下細(xì)胞診斷結(jié)果顯示分布不均勻，存在明顯堆積現(xiàn)象，而且存在較多的血液和黏液，背景存在模糊不清的現(xiàn)象，細(xì)胞在檢查結(jié)果中出現(xiàn)退變現(xiàn)象，細(xì)胞結(jié)構(gòu)表現(xiàn)不清晰。

液基細(xì)胞學(xué)制片：細(xì)胞均集中在直徑為15 mm的涂膜面積范圍中，能夠及時(shí)固定細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)保護(hù)完整、數(shù)量適中，呈均勻分布，背景清晰展現(xiàn)，紅細(xì)胞大多破壞消失，細(xì)胞結(jié)構(gòu)能夠清晰鑒別，能夠明顯診斷出異常細(xì)胞。轉(zhuǎn)移性腺癌細(xì)胞在鏡檢下呈現(xiàn)為乳頭狀，腺腔以及團(tuán)狀，具有較強(qiáng)的細(xì)胞團(tuán)立體感，癌細(xì)胞核呈現(xiàn)為增大現(xiàn)象，增加核漿比例，染色質(zhì)較粗，部分核膜呈現(xiàn)為不規(guī)則現(xiàn)象，核仁表現(xiàn)明顯，在細(xì)胞質(zhì)中可以明顯觀察出黏液樣空泡。反應(yīng)性間皮細(xì)胞表現(xiàn)為輪廓完整，分布區(qū)形式為單個(gè)分散[3]。

2.2 兩種診斷方法檢出率比較 液基細(xì)胞學(xué)診斷檢出率86.76%，常規(guī)制片技術(shù)診斷檢出率63.24%，液基細(xì)胞學(xué)檢出率明顯較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表1)。

表1 兩種診斷方法檢出率比較(n)

3 討論

胸腔積液是肺部多種疾病的常見并發(fā)癥，大部分肺癌患者會(huì)首先出現(xiàn)胸腔積液癥狀，因此胸腔積液的診斷在臨床上具有較高的應(yīng)用價(jià)值。在臨床應(yīng)用過程中尚未出現(xiàn)腫瘤原發(fā)病灶以及沒有活檢條件時(shí)，患者采取下一步診斷治療的方式為細(xì)胞學(xué)檢查，因此細(xì)胞學(xué)檢查方式是進(jìn)行患者診斷治療的重要依據(jù)之一，但是在胸腔積液的診斷鑒別過程中應(yīng)用傳統(tǒng)涂片方式由于細(xì)胞黏液以及血液過多的影響，會(huì)出現(xiàn)固定不及時(shí)以及細(xì)胞退化現(xiàn)象，對(duì)制片質(zhì)量具有嚴(yán)重影響[4]。

本文研究數(shù)據(jù)表示，液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)對(duì)胸腔積液的陽性檢出率明顯高于常規(guī)制片技術(shù)，數(shù)據(jù)對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，分析原因如下。①病理學(xué)主要由三部分組成，其中包括：細(xì)胞病理學(xué)、尸檢病理學(xué)以及組織病理學(xué)。細(xì)胞病理學(xué)作為一種臨床診斷的常用方法，是臨床診斷病理學(xué)中的重要組成部分，對(duì)醫(yī)療發(fā)展有積極影響。近年來隨著診斷方式的不斷進(jìn)步和發(fā)展，細(xì)胞病理學(xué)已經(jīng)逐漸發(fā)展到分子生物學(xué)水平，其中臨床應(yīng)用比較廣泛的檢測(cè)方式為液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)，其優(yōu)點(diǎn)在于能夠通過處理系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)本采集和處理方法的改變，對(duì)消除標(biāo)本采集過程中存在的紅細(xì)胞和黏液具有顯著效果，促使標(biāo)本在檢驗(yàn)過程中背景更加清晰無污染，在最大限度內(nèi)進(jìn)行完整無損的細(xì)胞保存，能夠在檢驗(yàn)過程中獲得清楚的細(xì)胞核核質(zhì)以及核仁，清晰展示其三維立體結(jié)構(gòu)。②其次，由于液基細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)所需要的標(biāo)本取樣量比較大，在本次研究數(shù)據(jù)中涉及的標(biāo)本，進(jìn)一步提高了檢驗(yàn)過程中的陽性檢出率，有利于降低漏診、誤診概率。③采取常規(guī)涂片檢驗(yàn)方法，造成陽性符合率以及出現(xiàn)假陰性的原因在于涂片過程中存在的肌腱炎細(xì)胞無診斷意義，或者涂片厚薄不均勻、質(zhì)量較差等，而且常規(guī)涂片檢驗(yàn)過程中會(huì)存在黏液以及血液過多的現(xiàn)象，導(dǎo)致檢驗(yàn)過程中背景雜亂，對(duì)診斷結(jié)果存在一定的干擾作用。此外常規(guī)涂片方式中可能會(huì)存在炎癥細(xì)胞以及上皮細(xì)胞過度重疊的現(xiàn)象，遮蓋了存在診斷意義的細(xì)胞，無法觀察細(xì)胞具體情況，影響到診斷結(jié)果[7]。④液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)是一種新型的細(xì)胞學(xué)檢查方式，其中離心沉降技術(shù)和新柏氏膜式技術(shù)具有一定的代表性，在宮頸細(xì)胞檢查以及TBS診斷過程中被廣泛應(yīng)用，和傳統(tǒng)涂片方式相比較，在宮頸癌以及癌前病變技術(shù)中提高了陽性檢出率，和傳統(tǒng)涂片技術(shù)相比較具有無法比擬的標(biāo)本采集質(zhì)量以及制片質(zhì)量，能夠有效去除分診斷性雜質(zhì)，凸顯全自動(dòng)制片的染色和診斷質(zhì)量[5]。⑤臨床液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)存在多種優(yōu)勢(shì)，首先，在檢驗(yàn)過程中可以有效去除影響閱片的細(xì)胞，保證在診斷參考過程中細(xì)胞數(shù)量足夠，而且在檢驗(yàn)過程中可以有效避免直接涂片過程中可能出現(xiàn)的細(xì)胞過度干燥所引起的假象。其次，采用自動(dòng)化程序所制作的涂片具有分布均勻的優(yōu)勢(shì)，對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行濕潤(rùn)固定，因此在檢驗(yàn)過程中細(xì)胞核結(jié)構(gòu)能夠清晰觀察[8]。此外，切片細(xì)胞可以在固定區(qū)域中集中排列，便于檢驗(yàn)觀察，有效減少由工作人員因疲勞造成的漏診現(xiàn)象。程序化制片方式在臨床診斷過程中具有穩(wěn)定性高、效率高以及規(guī)范化高的特點(diǎn)，能夠進(jìn)一步保證制片細(xì)胞在診斷過程中的效果，有效彌補(bǔ)了由人工涂片在診斷過程中造成人為細(xì)胞擠壓出現(xiàn)腫瘤假象的情況。而且其制片質(zhì)量高，提高了細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性與可靠性。⑥超柏氏液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)是液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)中檢出率較高的檢驗(yàn)技術(shù)，而且液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)在臨床應(yīng)用過程中具有能夠及時(shí)固定細(xì)胞，保護(hù)細(xì)胞形態(tài)完整、細(xì)胞數(shù)量適中，呈均勻分布，背景清晰展現(xiàn)，紅細(xì)胞大多破壞消失，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，能夠明顯診斷出異常細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)，進(jìn)一步提高了診斷工作效率，明顯突出了檢驗(yàn)方式的三維立體感，減少了診斷過程中的可疑例數(shù)，進(jìn)一步明確了診斷結(jié)果[9-10]。

綜上所述，在胸腔積液細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)過程中應(yīng)用液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)具有顯著的臨床診斷價(jià)值，進(jìn)一步提高了診斷工作效率，值得推廣應(yīng)用。