常麗梅，朱明，張輝，陳瀛

(1.海南省藥品審核認證管理中心，海南 ?？?570216； 2.先聲藥業(yè)(海南)有限公司，海南 海口 570216)

苯磺酸氨氯地平是臨床常用的二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，有左旋和右旋2種對映異構(gòu)體。苯磺酸左氨氯地平是經(jīng)拆分得到的新一代鈣通道阻滯藥，臨床上廣泛用于高血壓、心絞痛的治療，由于去除了苯磺酸氨氯地平的右旋體，從而大大降低了不良反應，并因作用穩(wěn)定、持久，已廣泛應用于臨床，成為最常用的降壓藥物之一[1-2]。苯磺酸左氨氯地平為苯磺酸氨氯地平的左旋異構(gòu)體，除比旋度不同之外，其他理化性質(zhì)和制劑相關(guān)特性與苯磺酸氨氯地平基本保持一致。右旋氨氯地平在臨床使用中基本無療效，因此，等量的左旋氨氯地平的療效是氨氯地平本身的2倍[3]。

苯磺酸氨氯地平片原研廠家為美國輝瑞制藥公司，商品名為Norvasc，中文名為絡活喜，而左旋氨氯地平制劑目前在國外尚無批準上市信息。苯磺酸左氨氯地平是國內(nèi)首例通過手性拆分的光學純藥物，經(jīng)查詢國家藥品監(jiān)督管理局數(shù)據(jù)，苯磺酸左氨氯地平片國內(nèi)獲批15個文號，施慧達藥業(yè)集團(吉林)有限公司研制的苯磺酸左氨氯地平片(2.5 mg)于1999年首家上市。目前國內(nèi)外藥典均未收錄該品種的質(zhì)量標準，其消旋體苯磺酸氨氯地平及制劑則已收載于2015年版《中國藥典》。

由于藥物的溶出對吸收有重要影響，因此藥物體外溶出度試驗可能會與體內(nèi)行為具有一定關(guān)聯(lián)性。在多種pH溶出介質(zhì)中溶出曲線的測定是現(xiàn)行國家藥物審評機構(gòu)評價口服固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種重要手段。本文選擇已上市2個廠家的苯磺酸左氨氯地平片(規(guī)格：2.5 mg)，參考苯磺酸左氨氯地平國家藥品標準新藥轉(zhuǎn)正標準[4]，采用2015年版《中國藥典》四部通則0931第二法進行溶出度測定，同時參照該方法進行溶出曲線考察，并與原研藥品(絡活喜，規(guī)格：5 mg)的溶出曲線比較，進行體外溶出度研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260 高效液相色譜儀(美國 Agilent公司)；BS2010S型電子天平(賽多利斯)；BT25S型電子天平(賽多利斯)；ZRS-12G型智能溶出度儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2 試劑與試藥

Na2HPO4、KH2PO4、HCl、NaOH、醋酸鈉、冰醋酸(分析純)、純化水(自制)；苯磺酸左氨氯地平對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100546-201504；質(zhì)量分數(shù)：93.4%)；苯磺酸左氨氯地平片樣品信息見表1。

表1 苯磺酸左氨氯地平片樣品信息Table 1 The information of Levamlodipine besylate tablets

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出介質(zhì)

參照《普通口服固體制劑溶出度試驗技術(shù)指導原則》[5]對溶出介質(zhì)的要求，選擇pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水為溶出介質(zhì)，考察不同廠家藥品的溶出曲線。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取苯磺酸左氨氯地平對照品適量，加甲醇適量使溶解后，用溶出介質(zhì)稀釋制成每1 mL中約含苯磺酸左氨氯地平5 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取上述試驗用樣品，每批樣品12片，加入溶出介質(zhì)進行試驗，分別在10、15、30、45、60、90、120、180 min取溶出液，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液檢測。

2.4 色譜條件

色譜柱：Waters Novapak C18柱(3.9 mm×4.9 mm)；流動相：甲醇-乙腈-0.7%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0，體積比35∶15∶50)；檢測波長：237 nm；流速：1.0 mL/min。

2.5 溶出度測定

取樣品，照2015年版《中國藥典》四部通則0931第二法的溶出度與釋放度測定法，采用槳法，分別以4種溶劑(pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水)500 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r/min，在(37±0.5)℃下，分別于10、15、30、45、60、90、120、180 min取溶出液適量，取續(xù)濾液，照2015年版《中國藥典》四部通則0512“高效液相色譜法”測定含量，計算每片的溶出量，樣品在4種溶出介質(zhì)中的體外溶出度測定結(jié)果見圖1。

1201008060402002040600溶出度/%1201008060402002040600溶出度/%100806040200溶出度/%100806040200溶出度/%501001502000501001502000t/minCBA1A2A3pH6.8磷酸鹽緩沖液pH1.2鹽酸溶液pH4.5醋酸鹽緩沖液水

圖1不同廠家苯磺酸左氨氯地平在4種溶出介質(zhì)的溶出曲線

Figure1The dissolution curves of Levamlodipine besylate tablets in four different dissolution media

依據(jù)《國家藥品標準新藥轉(zhuǎn)正標準》，苯磺酸左氨氯地平片的溶出度限度(Q)為80%，參考《普通口服固體制劑溶出度試驗技術(shù)指導原則》：相似因子 f2值高于50，可認為2條曲線具有相似性，即溶出行為一致。本文采用f2評價國內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片與原研藥品絡活喜在pH6.8磷酸鹽緩沖液和水中體外溶出的一致性，結(jié)果見表2。

以上結(jié)果可見，國內(nèi)上市品與原研藥品在pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液中，15 min的溶出量均達到85%以上，表明國內(nèi)2家企業(yè)藥品在以上2種溶出介質(zhì)中的溶出行為與原研藥品絡活喜相似；而在pH6.8磷酸鹽緩沖液和水2種溶出介質(zhì)中的溶出行為卻與原研藥品絡活喜不一致。

表2 不同廠家苯磺酸左氨氯地平在pH 6.8磷酸鹽緩沖液及水中的f2值

Table2The f2similarity factor of Levamlodipine besylate tablets in pH 6.8 phosphate buffer solution and water

樣品編號pH 6.8磷酸鹽緩沖液水C和A132.433.6C和A232.333.5C和A332.533.6C 和B31.734.5B和A185.986.6B和A285.086.7B和A384.086.3

2.6 飽和溶解度的測定

從表3苯磺酸氨氯地平與苯磺酸左氨氯地平在不同溶出介質(zhì)(37 ℃)中的飽和溶解度對比結(jié)果可知，苯磺酸左氨氯地平在各介質(zhì)中溶解度較苯磺酸氨氯地平高，且兩者在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的溶解度較pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和水中偏低。

表3 苯磺酸氨氯地平與苯磺酸左氨氯地平在不同溶出介質(zhì)中的飽和溶解度

Table3Saturated solubility of amlodipine besylate and L-amlodipine besylate in different dissolution mediaρ/(mg·mL-1)

溶出介質(zhì)苯磺酸氨氯地平苯磺酸左氨氯地平pH 1.2鹽酸溶液3.34.4pH 4.5醋酸鹽緩沖液3.39.7pH 6.8磷酸鹽緩沖液1.02.1水3.53.9

3 討論

溶出曲線可以直觀反映藥物的體外釋放速度和程度，體外溶出度對比研究有利于指導仿制藥一致性評價過程中建立更科學的溶出試驗條件，對藥品生產(chǎn)處方工藝的差異及內(nèi)在質(zhì)量評價研究具有一定的參考意義。

國內(nèi)上市的苯磺酸左氨氯地平片和原研藥品絡活喜在處方輔料組成及制備工藝上都有所區(qū)別，原研藥品絡活喜輔料為微晶纖維素、無水磷酸氫鈣、羥甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂，采用粉末直接壓片制得[6]；而國內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片的輔料組成主要為微晶纖維素、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂等，其工藝為將稀釋劑和崩解劑加入黏合劑后，采用濕法混合制粒、干燥、整粒、外加輔料、混合、壓片。

本文選擇采用pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水作為溶出介質(zhì)，對國內(nèi)不同廠家苯磺酸左氨氯地平片與原研藥品溶出度進行對比研究，結(jié)果顯示：苯磺酸左氨氯地平片在pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液中的溶出速度高于在水和pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出速度，這與苯磺酸左氨氯地平在4種溶出介質(zhì)中的飽和溶解度有一定相關(guān)性，如表3所示，苯磺酸左氨氯地平在以上介質(zhì)中的溶解度大小為pH 4.5醋酸鹽溶液>pH 1.2鹽酸溶液>水>pH 6.8磷酸鹽緩沖液，原因是苯磺酸左氨氯地平的pKa為8.85，相對偏堿性，其在偏酸性溶液中溶解度較大，溶出速率較快。

藥物的溶出速率可以用Noyes-Whitney方程解釋，藥物的溶出面積、溶解速度常數(shù)以及藥物本身的溶解度都對溶出度有影響，這些因素跟原料藥的晶形、顆粒大小等都相關(guān)。溶解度在一定程度上可以反映溶出度的情況，但對于溶解度都較大的溶出介質(zhì)，藥物制劑的溶出速率都較快，這些介質(zhì)并不能區(qū)分出藥物因制劑的輔料或處方工藝的不同所帶來的差異。如苯磺酸氨氯地平和苯磺酸左氨氯地平在酸性介質(zhì)中溶解度較大，溶出速率較快，所以國內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片在2種酸性介質(zhì)中顯示與原研藥品絡活喜體外溶出行為一致，而pH 6.8磷酸鹽緩沖液這種溶出速率較慢的介質(zhì)則可以很好的區(qū)分2種制劑處方工藝的差異。

苯磺酸左氨氯地平片由于不同企業(yè)處方工藝不同，其產(chǎn)品的溶出行為會有一定差距。采用多條溶出曲線來指導制劑處方工藝開發(fā)是很有必要的，特別是選擇具有區(qū)分性的溶出介質(zhì)，乃至區(qū)分性的溶出條件，只有在區(qū)分性介質(zhì)中的溶出曲線相似，才能說明體外溶出的一致性。在實際處方開發(fā)中，要結(jié)合原料藥及制劑的具體情況，采用適宜的溶出方法評價，掌握適度評價原則，才能有效發(fā)揮體外溶出評價在藥物生物等效性試驗中的指導作用。