劉 波,朱怡平，周雪影,李 靖

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193；2.堪薩斯州立大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，美國(guó) 堪薩斯 66506)

北京時(shí)間2020年3月27日，泰國(guó)農(nóng)業(yè)與合作部向世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(World Organization for Animal Health，OIE)通報(bào)了該國(guó)發(fā)生的非洲馬瘟(African horse sickness，AHS)疫情。根據(jù)OIE網(wǎng)站信息，該起非洲馬瘟暴發(fā)于泰國(guó)東北部的呵叻省，以巴沖區(qū)域?yàn)橐咔橹行摹Ｒ咔闀r(shí)間起始于2020年2月24日，通報(bào)時(shí)已經(jīng)至少影響到341匹易感馬匹，其中62匹發(fā)病，42匹死亡。OIE當(dāng)即取消了泰國(guó)非洲馬瘟的無疫區(qū)狀態(tài)[1]。據(jù)泰國(guó)馬術(shù)聯(lián)合會(huì)消息，本次疫情發(fā)生于泰國(guó)最近發(fā)生的夏季暴雨之后。暴雨過后昆蟲群體數(shù)量大幅增長(zhǎng)。剛開始在疫情發(fā)生附近的賽馬場(chǎng)出現(xiàn)了以高熱、黏膜發(fā)白、流涎、厭食和呼吸急促為表現(xiàn)的未知疾病，導(dǎo)致了30例馬匹死亡。繼而該未知疾病擴(kuò)散至周邊11個(gè)馬場(chǎng)，導(dǎo)致了約12%的暴露馬匹死亡。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室確診為非洲馬瘟病毒(African horse sickness virus，AHSV)陽性之后，泰國(guó)農(nóng)業(yè)與合作部和泰國(guó)馬術(shù)聯(lián)合會(huì)立即采取了隔離檢疫措施，在交通要道設(shè)點(diǎn)控制馬屬動(dòng)物的移動(dòng)，并立即向馬從業(yè)人員進(jìn)行網(wǎng)上疫情通報(bào)[2]。截止2020年4月3日，據(jù)泰國(guó)農(nóng)業(yè)和合作部消息，此次AHS疫情已經(jīng)造成泰國(guó)4個(gè)省至少131例馬的死亡[3]。

AHS在包括中國(guó)在內(nèi)的東亞和東南亞國(guó)家從未發(fā)生過，我國(guó)為OIE認(rèn)定的AHS無疫區(qū)[4]。據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織數(shù)據(jù)，泰國(guó)農(nóng)業(yè)和合作部和國(guó)家動(dòng)物衛(wèi)生研究所曾經(jīng)在20世紀(jì)90年代對(duì)該國(guó)10種馬屬動(dòng)物傳染病進(jìn)行過較為廣泛的血清學(xué)調(diào)查，當(dāng)時(shí)并未發(fā)現(xiàn)到有AHSV血清陽性的動(dòng)物[5]。由于非洲是AHS的傳統(tǒng)流行區(qū)域，世界衛(wèi)生組織對(duì)本次跨印度洋的遠(yuǎn)距離傳播比較擔(dān)憂。本次疫情的來源尚不清楚，但據(jù)馬來西亞馬協(xié)官方臉書消息，該源頭可能為從非洲進(jìn)口的一批斑馬。馬來西亞是泰國(guó)的陸上鄰國(guó)，馬來西亞馬協(xié)在3月30日向該國(guó)馬主進(jìn)行了緊急通報(bào)。嚴(yán)禁由泰國(guó)向馬來西亞的馬屬動(dòng)物流動(dòng)。馬來西亞與泰國(guó)接壤的“北部帶”區(qū)域的馬場(chǎng)需要保留近30 d內(nèi)與泰國(guó)來往的馬匹記錄。有癥狀馬匹要求上報(bào)，且不能離開其馬場(chǎng)[6]。

我國(guó)屬于AHSV的無疫區(qū)。泰國(guó)雖與我國(guó)不直接接壤，但兩國(guó)相鄰的緬甸和老撾等國(guó)家氣候濕熱，庫蠓滋生，因此我國(guó)西南部存在非洲馬瘟傳入的風(fēng)險(xiǎn)。3月28日，我國(guó)海關(guān)總署發(fā)布《關(guān)于防止泰國(guó)非洲馬瘟傳入的警示通報(bào)》；4月1日，海關(guān)總署聯(lián)合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部再次發(fā)布聯(lián)合公告，采取了禁止直接或間接從泰國(guó)輸入馬屬動(dòng)物及相關(guān)產(chǎn)品等措施，嚴(yán)防疫情傳入，保障我國(guó)的馬業(yè)安全[7]。

1 非洲馬瘟的歷史

疑似AHS的病例最早記錄于14世紀(jì)的阿拉伯文獻(xiàn)中，疑似疫情發(fā)生于1327年也門境內(nèi)。AHS病例的病理表現(xiàn)最早開始記錄于歐洲殖民地非洲中部和南部時(shí)期，該疾病首次被確認(rèn)是在1719年的南非開普敦大流行，當(dāng)時(shí)導(dǎo)致超過1 700例馬屬動(dòng)物死亡。AHS在撒哈拉以南的非洲熱帶和亞熱帶大多數(shù)地區(qū)呈地方流行的狀態(tài)，自1719年之后該地區(qū)又發(fā)生了超過10次的疫情暴發(fā)，規(guī)模最大的一次發(fā)生于19世紀(jì)50年代，導(dǎo)致了超過70 000例馬屬動(dòng)物死亡[8]。20世紀(jì)AHS多次從此流行區(qū)域向外擴(kuò)散，導(dǎo)致多起疫情。20世紀(jì)40年代疫情暴發(fā)于埃及、敘利亞、約旦、黎巴嫩和巴勒斯坦；20世紀(jì)50年代末再次發(fā)生于中東地區(qū)，并波及到包括我國(guó)陸上鄰國(guó)巴基斯坦和印度在內(nèi)的10個(gè)亞洲國(guó)家，這次疫情是目前影響最大的一次，導(dǎo)致了超過30萬例馬屬動(dòng)物死亡；20世紀(jì)60年代疫情又暴發(fā)于摩洛哥，并最終擴(kuò)散至阿爾及利亞、突尼斯并通過直布羅陀海峽進(jìn)入歐洲的西班牙[9]。

目前，AHS在南非每年夏季都會(huì)發(fā)生。南非在好望角附近區(qū)域設(shè)置了歐盟認(rèn)可的AHS無疫區(qū)，以此作為向歐洲出口馬匹的窗口。但是無疫區(qū)附近的監(jiān)控區(qū)域在1999年、2004年、2011年、2013年、2014年頻繁發(fā)生疫情，對(duì)該國(guó)的馬屬動(dòng)物對(duì)外貿(mào)易造成了極大的負(fù)面影響[10-11]。

最近一次在非洲之外AHS的暴發(fā)發(fā)生于20世紀(jì)80年代晚期的西班牙，當(dāng)時(shí)該疫情暴發(fā)的源頭是馬德里省動(dòng)物園進(jìn)口的一批斑馬，當(dāng)時(shí)西班牙對(duì)超過38 000匹馬屬動(dòng)物進(jìn)行了緊急免疫，但病毒依然散播到了西班牙南部、葡萄牙和摩洛哥，共導(dǎo)致了3 000多例馬屬動(dòng)物死亡?？刂普麄€(gè)疫情的花費(fèi)超過3 000萬美元。最終在1991年西班牙和葡萄牙再次宣布境內(nèi)完全消滅AHS[12]。

2 非洲馬瘟的病原和傳播

AHSV屬于呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬，共有9個(gè)血清型，歷史上很多疫情都由血清型9導(dǎo)致。AHS是由AHSV感染所導(dǎo)致的，由蟲媒傳播的高度傳染性、高致死率的馬屬動(dòng)物傳染病。傳播媒介主要為庫蠓(Culicoidesspp.)。除庫蠓之外也有一些其他昆蟲被認(rèn)為有可能存在傳播病毒的能力，在某些蜱類中也可分離到病原，但絕大多數(shù)傳播還是以庫蠓為主。目前在天然狀況下傳播AHSV的庫蠓主要包括2種，即C.imicola和C.bolitinos，其中C.imicola被認(rèn)為是主要媒介，另外也有其他種類的庫蠓在實(shí)驗(yàn)室中被驗(yàn)證可以傳播疾病。濕熱環(huán)境有助于蟲媒滋生，使疾病更易傳播。另外，在流行地區(qū)，風(fēng)也有可能將感染的庫蠓散播到其他地域。目前認(rèn)為，風(fēng)有可能將感染AHSV的庫蠓在水面上攜帶700 km遠(yuǎn)，在陸地上攜帶150 km遠(yuǎn)的距離。該病毒僅在非洲大陸地方流行，但是作為傳播媒介的庫蠓有很多種都在世界其他地域廣泛存在，非洲的昆蟲或者易感動(dòng)物也有可能將AHSV帶到其他無疫區(qū)。AHSV可感染所有的馬屬動(dòng)物，包括家馬、騾、驢、斑馬等。在非洲地區(qū)，斑馬是AHSV的天然儲(chǔ)存宿主，感染之后不表現(xiàn)癥狀。其他馬屬動(dòng)物被認(rèn)為是AHSV的偶然宿主，其中家馬對(duì)AHSV最為易感，其最高致死率可達(dá)95%。騾感染AHSV的致死率約為50%，驢約為10%[13]。

非洲馬瘟雖然為高度傳染性疾病，但并非接觸性傳染病。該病毒并不能在馬匹中直接傳播，必需經(jīng)過中間媒介，即庫蠓叮咬進(jìn)行傳播。斑馬、家馬、騾、驢在感染之后都可以形成足夠的病毒血癥水平，使庫蠓感染。目前病毒血癥在馬屬動(dòng)物體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間尚未明確，一般認(rèn)為可持續(xù)4～8 d。但是經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，在感染斑馬后最長(zhǎng)40 d、感染家馬后最長(zhǎng)21 d、驢感染后28 d依然可以從血液中分離到病毒。在動(dòng)物病毒血癥時(shí)期，病毒可存在于動(dòng)物的精液、尿液等多種體液，但并無研究證明經(jīng)此可以傳播疾病。感染后痊愈的馬屬動(dòng)物會(huì)對(duì)相應(yīng)的血清型產(chǎn)生很好的免疫力，對(duì)其他血清型也可產(chǎn)生部分免疫力。有關(guān)研究證明，AHSV在冷凍馬肉中也可存活一定時(shí)間，在含有血清的培養(yǎng)基中可以存活最長(zhǎng)6個(gè)月，在腐敗血液中可以存活超過2年[13]。

犬可以通過進(jìn)食馬肉感染病毒，且可以表現(xiàn)出超急性的致死性感染。某些研究證明，可以通過蜱等昆蟲將AHSV傳播到其他犬或家馬，但是AHSV在犬體內(nèi)產(chǎn)生的病毒血癥往往水平較低，且持續(xù)時(shí)間短暫。而且，犬一般也并非庫蠓侵襲的對(duì)象。因此，目前并不認(rèn)為犬在AHSV的傳播中起到重要作用。除犬之外，一些野生食肉動(dòng)物，如鬣狗、豺狗、非洲野狗、獵豹、獅、等都可能因進(jìn)食帶毒的斑馬肉感染病毒。血清陽性的草食動(dòng)物據(jù)報(bào)道包括單峰駝、綿羊、山羊、非洲象、黑犀牛、白犀牛等。目前這些動(dòng)物在AHSV傳播中的意義尚未明確，但普遍認(rèn)為病毒不太可能在其體內(nèi)擴(kuò)增繁殖[13]。

該疫病的發(fā)生具有季節(jié)性，大多數(shù)發(fā)生于濕熱多雨的季節(jié)，在此情況下蚊蟲往往群體數(shù)量較大。霜凍之后蚊蟲死亡，疫情則往往結(jié)束。但是在氣候溫和的條件下，庫蠓的成蟲有可能在冬季存活，因此AHSV也有可能過冬，所以第2年可能再次發(fā)生感染。易感動(dòng)物感染該病毒往往也具有時(shí)間性，在清晨和黃昏時(shí)段，蚊蟲活動(dòng)較多，因此動(dòng)物往往在此時(shí)感染[13]。

AHS不屬于人獸共患疾病，但是一種疫苗毒株可以導(dǎo)致人的腦炎和視網(wǎng)膜炎[13]。

3 臨床表現(xiàn)

AHS的臨床癥狀表現(xiàn)為4種方式，主要為肺型(超急性型)、心臟型(亞急性型)、混合型(急性型)和發(fā)熱型(亞臨床型)。肺型又稱“小頭癥(Dunkop)”，其主要表現(xiàn)可能包括嚴(yán)重高熱(可高達(dá)41 ℃)、呼吸困難(可表現(xiàn)為開口呼吸、低頭呼吸等)、口鼻眼黏膜充血、胸膜下水腫、胸腔積液等，某些動(dòng)物可見泡沫狀帶血絲的鼻分泌物，表現(xiàn)為肺型的動(dòng)物可發(fā)生猝死，致死率可達(dá)90%或以上。心臟型又稱“大頭癥(Dikkop)”，其可能發(fā)生的表現(xiàn)為發(fā)熱、頭頸部水腫、眼瞼和眶上窩水腫、吞咽困難等，某些動(dòng)物可能出現(xiàn)腹痛癥狀，最終可能表現(xiàn)為口腔和眼部黏膜點(diǎn)狀出血；心臟型動(dòng)物死亡較為緩慢，一般在發(fā)熱癥狀出現(xiàn)后4～8 d后死亡，其死亡率通常在50%以上?；旌闲涂杀憩F(xiàn)肺型和心臟型2種癥狀，死亡率通常在70%～80%或更高。發(fā)熱型多發(fā)生于抵抗力較強(qiáng)的動(dòng)物如斑馬和驢，以及免疫過的家馬，很少導(dǎo)致馬屬動(dòng)物的死亡，其癥狀包括低熱、輕度精神沉郁、結(jié)膜充血等。非洲馬瘟在馬屬動(dòng)物的潛伏期大約為3～14 d(通常小于9 d)，也有研究證明其潛伏期最長(zhǎng)可達(dá)21 d[14]。

AHS的鑒別診斷包括炭疽、馬傳染性貧血、馬病毒性動(dòng)脈炎、錐蟲病、馬腦部疾病、梨形蟲病、出血性紫癜和亨德拉病毒[15]。

4 診斷和通報(bào)

AHS可根據(jù)其臨床癥狀進(jìn)行診斷，確診需要通過實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒的鑒別。因此，必需在動(dòng)物發(fā)熱期間采集抗凝血液樣品并冷藏送往實(shí)驗(yàn)室；脾臟樣品在動(dòng)物剛死亡之后采集，應(yīng)置于冰盒中遞送。目前實(shí)驗(yàn)室確診最佳方法為逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)系反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)病毒。間接夾心ELISA方法也可快速檢測(cè)AHSV的抗原，但應(yīng)用并不廣泛。病毒血清型的確定需要進(jìn)行病毒中和試驗(yàn)，一般需要超過5 d的時(shí)間。目前也有新的RT-PCR方法可以在24 h內(nèi)進(jìn)行血清型的鑒定[15]。

在我國(guó)，非洲馬瘟為法定一類動(dòng)物傳染病，同時(shí)為OIE規(guī)定的A類傳染病，法律規(guī)定疑似病例發(fā)生之后須立即向當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)通報(bào)，動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)應(yīng)按照國(guó)家有關(guān)規(guī)定及時(shí)上報(bào)。任何單位和個(gè)人均不得瞞報(bào)、阻礙他人報(bào)告動(dòng)物疫情。報(bào)告主體包括動(dòng)物飼養(yǎng)者、動(dòng)物檢疫員、獸醫(yī)、防疫員、疫情測(cè)報(bào)點(diǎn)工作人員以及其他公民。在動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)接到報(bào)告之后，會(huì)即刻派遣執(zhí)法人員和診斷專家，通過法律文書的方式將馬場(chǎng)正式強(qiáng)制隔離。然后根據(jù)臨床癥狀對(duì)疫病進(jìn)行初步確定，再據(jù)此和流行病學(xué)調(diào)查的結(jié)果針對(duì)性地采樣送檢。執(zhí)法人員還將對(duì)疫情的發(fā)病時(shí)間、地點(diǎn)、蔓延和空間分布，以及流行區(qū)域內(nèi)易感動(dòng)物的種類、數(shù)量、性別、年齡、感染率、發(fā)病率、死亡率等數(shù)據(jù)進(jìn)行調(diào)查。另外，還需調(diào)查疫病的可能來源、傳播途徑等信息。當(dāng)確診為非洲馬瘟之后，畜牧部門應(yīng)立即向當(dāng)?shù)卣暾?qǐng)封鎖[16]。

5 非洲馬瘟的防控和生物安全措施

目前除支持治療之外，對(duì)于AHS并無任何針對(duì)性治療手段，在其恢復(fù)階段應(yīng)對(duì)繼發(fā)感染進(jìn)行治療。非洲馬瘟疫情期間可以采取的主要防控措施概括來說包括清除疾病、隔離檢疫、控制蟲媒、消滅感染動(dòng)物等。具體來說，可以考慮：(1)保持良好的馬匹旅行記錄。有任何表現(xiàn)高熱、鼻分泌物、厭食、呼吸困難或猝死癥狀的馬都應(yīng)該立刻進(jìn)行獸醫(yī)咨詢和處理；(2)發(fā)現(xiàn)疑似病例的獸醫(yī)必須向當(dāng)?shù)毓芾肀O(jiān)督部門報(bào)告；(3)疑似癥狀的馬匹應(yīng)該與健康馬匹進(jìn)行隔離；(4)疑似癥狀的馬匹應(yīng)該隔離于其馬場(chǎng)，嚴(yán)格限制移動(dòng)；(5)每日2次監(jiān)測(cè)動(dòng)物體溫，發(fā)熱動(dòng)物置于無昆蟲的環(huán)境中隔離或直接安樂死；(6)考慮對(duì)已經(jīng)感染甚至暴露于病毒風(fēng)險(xiǎn)的馬屬動(dòng)物進(jìn)行安樂死；(7)由于該疫病由蟲媒傳播，因此馬場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生方面也應(yīng)采取措施，但在大多數(shù)情況下，完全消滅庫蠓是不現(xiàn)實(shí)的。馬場(chǎng)中的死水易導(dǎo)致蟲媒滋生，因此可以考慮將馬場(chǎng)中的死水經(jīng)常清潔，經(jīng)常添加殺幼蟲藥物。也可考慮使用使水常流的機(jī)器和加氧器；蚊蟲的活動(dòng)在清晨和黃昏較多，因此可以考慮對(duì)馬廄每日進(jìn)行熏蒸消毒2次；高危馬場(chǎng)強(qiáng)烈建議對(duì)馬廄加裝防蟲措施，并對(duì)馬匹每天進(jìn)行2～3次的防蟲噴霧處理；高危馬場(chǎng)強(qiáng)烈建議在清晨和黃昏盡量避免使馬匹外出；如果馬匹外出盡量進(jìn)行防蟲噴霧處理；(8)考慮使用疫苗預(yù)防[13]。

在pH值小于6或超過12的環(huán)境下AHSV可被殺滅，因此常用2%乙酸或檸檬酸對(duì)其進(jìn)行消毒。AHSV對(duì)如乙醚之類的脂類溶劑抵抗性較強(qiáng)，但經(jīng)試驗(yàn)證明可以被福爾馬林、β-丙內(nèi)酯、乙酰氮丙啶衍生物以及放射線等滅活。AHSV相對(duì)較為耐熱，在55～75 ℃的條件下，AHSV在枸櫞酸鈉血漿中可以存活10 min[13]。

目前在流行區(qū)域一般每年使用弱毒苗對(duì)AHS進(jìn)行預(yù)防，目前唯一存在的商業(yè)化產(chǎn)品也只有弱毒苗。多價(jià)弱毒苗在過去60多年的應(yīng)用使AHS的暴發(fā)頻率和程度大大降低，但是在南非每年仍然有很多馬匹由于AHS而死亡。取決于當(dāng)?shù)亓餍械牟《狙逍停呙缈赡転閱蝺r(jià)苗或多價(jià)苗。目前應(yīng)用較為廣泛的AHS的弱毒苗主要為2種多價(jià)苗，一種為含有血清型1/3/4，另一種含有血清型2/6/7/8。已有研究證明，血清型1和2、3和7、5和8、6和9之間存在交叉保護(hù)。但是2006年南非暴發(fā)以AHSV血清型5和9為主的疫情，使得人們對(duì)目前應(yīng)用的疫苗對(duì)這2種血清型的保護(hù)效果產(chǎn)生質(zhì)疑。另外，弱毒苗在不同馬屬動(dòng)物群體中以及不同血清型之間產(chǎn)生的免疫血清保護(hù)是不穩(wěn)定的，有研究證明可能需要在6年內(nèi)進(jìn)行最多8次免疫才能使動(dòng)物得到完全保護(hù)。弱毒苗和天然病毒之間可以發(fā)生基因重排也已被研究確定，這使得人們需要在使用弱毒苗時(shí)應(yīng)更加謹(jǐn)慎。弱毒苗還有一個(gè)明顯缺點(diǎn)就是無法從血清學(xué)角度區(qū)分免疫動(dòng)物和天然感染動(dòng)物，而這對(duì)于疫情的早期血清學(xué)監(jiān)測(cè)非常重要。然而，盡管弱毒苗存在各種各樣的問題，目前普遍認(rèn)為弱毒苗依然是預(yù)防AHS的最佳手段[14]。

其他疫苗類型也曾被用于防控AHS。如20世紀(jì)80年代末西班牙、葡萄牙和摩洛哥曾經(jīng)使用滅活苗防控AHS疫情，但現(xiàn)在該疫苗已經(jīng)停產(chǎn)?，F(xiàn)在AHS的疫苗研發(fā)著重于重組苗，包括DNA疫苗、亞單位苗、痘病毒載體苗、反向基因疫苗、病毒樣顆粒疫苗等。當(dāng)前，對(duì)于具備免疫和天然感染區(qū)分能力(DIVA)的、安全高效的、成本較低的新型疫苗需求非常迫切[14]。

6 非洲馬瘟疫情的國(guó)際影響

AHS是世界范圍內(nèi)對(duì)經(jīng)濟(jì)影響最嚴(yán)重的馬屬動(dòng)物疾病。幾個(gè)世紀(jì)以來，由于其極高的致死率，AHS對(duì)撒哈拉以南非洲的馬業(yè)造成十分沉重的打擊。由于AHS的嚴(yán)重性以及其具備在全球快速擴(kuò)散的可能性，OIE將其列為A類疾病。即使在疫苗存在的情況下，新的AHSV血清型引入也有可以造成疫情暴發(fā)。隨著全球變暖和氣候變化，可以傳播AHSV的庫蠓的活動(dòng)范圍也在逐漸北移。因此，很多本來作為AHS無疫區(qū)的溫帶國(guó)家可能暴發(fā)疫情的風(fēng)險(xiǎn)越來越高。從國(guó)際層面來看，作為無AHS國(guó)家或地區(qū)，我國(guó)應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)于AHS流行區(qū)域來源馬匹的嚴(yán)格檢疫和隔離措施。