張贊偉 胡小菁 魏文揚(yáng)

【摘要】 目的 探討血清microRNA-208a與急性心肌梗死患者預(yù)后的相關(guān)性。 方法 選取2017年10月至2018年10月在西安市第九醫(yī)院心內(nèi)科就診均行經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)（PCI）的急性心肌梗死（AMI）患者217名。根據(jù)有無發(fā)生主要心血管不良事件（MACEs）分為MACEs組64例與無MACEs組153例。采用RT-PCR測量血清microRNA-208a的表達(dá)。采用COX回歸模型分析microRNA-208a對AMI患者預(yù)后的影響。 結(jié)果 MACEs、年齡、高敏肌鈣蛋白I（cTnI）、N末端腦鈉肽原（NT-proBNP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a均高于未發(fā)生MACEs患者，左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）低于未發(fā)生MACEs患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）;兩組患者性別、高血壓和糖尿病患病率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。受試者工作特征曲線（ROC）顯示，microRNA-208a預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的最佳臨界點(diǎn)為1.4。當(dāng)microRNA-208a為1.4時，microRNA-208a 預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的靈敏度為67.2%，特異度為90.8%;AUC曲線下面積為0.80。多因素COX回歸分析發(fā)現(xiàn)，年齡[HR：1.03;95%CI：1.01-7.37]、cTnI [HR：1.17;95%CI：1.08-71.96]、NT-proBNP [HR：1.23;95%CI：1.14-2.73]、CK-MB [HR：1.38;95%CI：1.17-2.14]、心肌缺血再灌注時間[HR：1.43;95%CI：1.21-1.93]、microRNA-208a [HR：2.98;95%CI：1.81-3.73]是AMI患者發(fā)生MACEs的危險因素，LVEF [HR：0.93;95%CI：0.89-0.96]是AMI患者發(fā)生MACEs的保護(hù)因素。 結(jié)論 年齡、cTnI 、NT-proBNP、CK-MB 、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a是AMI患者預(yù)后的危險因素，microRNA-208a表達(dá)水平高者預(yù)后差。

【關(guān)鍵詞】 microRNA-208a;急性心肌梗死;經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù);預(yù)后

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）與預(yù)后不良密切相關(guān)[1]。盡管AMI的治療已經(jīng)得到改善，死亡率也有所降低，但幸存者仍有較高的并發(fā)癥發(fā)生風(fēng)險，如AMI后心力衰竭（heart failure， HF）和心源性死亡等心血管并發(fā)癥仍然難以預(yù)測[2-3]。微小RNA（Micro RNAs，miRs）是一種內(nèi)源性的小非編碼RNA分子，通過促進(jìn)信使RNA降解或抑制翻譯來控制基因表達(dá)[4-5]。目前，人類已鑒定出1000多個miRs，其中許多以組織特異性的方式表達(dá)[6]。近年來已經(jīng)在人類血清和血漿中檢測到miRs，為miRs作為心血管疾病等多種疾病的診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物提供了可能[7-8]。先前的研究報道了miRs在AMI中的診斷價值[9]。由于miRs在AMI的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，調(diào)控其表達(dá)和活性成為限制其發(fā)展的潛在工具。然而，miRs對AMI預(yù)后價值的研究卻十分有限。有研究顯示，microRNA-208a可增加AMI患者心肌內(nèi)皮素的表達(dá)和心肌纖維化[10]。本研究探討microRNA-208a對AMI患者預(yù)后的預(yù)測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年10月至2018年10月在西安市第九醫(yī)院心內(nèi)科就診均行經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)（PCI）的AMI患者217例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）缺血性癥狀;（2）心肌壞死標(biāo)志物肌鈣蛋白（cTn）和肌酸激酶（CK）水平升高到正常范圍上限的兩倍以上;（3）病理性Q波;（4）ST段抬高或壓低[11]。排除既往心肌梗死或PCI、血液系統(tǒng)疾病、急性或慢性感染、嚴(yán)重腎或肝功能不全以及已知或治療的惡性腫瘤的患者。

1.2 方法 使用mirVana PARIS試劑盒從血清樣品中提取總RNA，進(jìn)行miRNA的逆轉(zhuǎn)錄，使用Taq-Man miRNA RT-PCR測定法測量microRNA-208a，并使用snRNA U6作為內(nèi)部對照。PCR方案如下：50℃持續(xù)2 min，95℃持續(xù)10 min，隨后進(jìn)行如下40個循環(huán)：95℃持續(xù)15 s，60℃持續(xù)1 min。使用相對標(biāo)準(zhǔn)曲線方法或比較閾值循環(huán)法分析基因表達(dá)數(shù)據(jù)。然后，自動設(shè)置分析數(shù)據(jù)以分配基線值。每位患者測量2次microRNA-208a的表達(dá)水平，并取平均值。

1.3 觀察指標(biāo) 采用臨床病例和問卷調(diào)查相結(jié)合的方法收集一般資料，包括性別、年齡、高血壓、糖尿病、梗死部位、肌鈣蛋白I（cTnI）、N末端腦鈉肽原（NT-proBNP）、左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、CK-MB隨訪6個月，記錄患者預(yù)后情況，主要心血管不良事件（MACEs）包括再次心力衰竭入院治療、再次心肌梗死、再發(fā)心絞痛、靶血管再次血運(yùn)重建、死亡。按照有無MACEs分為MACEs組64例與無MACEs組153例。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS22.0版進(jìn)行統(tǒng)計分析，連續(xù)變量用（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。分類資料用例（%）表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。采用受試者工作特征曲線尋找microRNA-208a 預(yù)測MACEs的最佳臨界值并計算曲線下面積。用COX回歸模型分析MACEs的危險因素，P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 MACEs組患者年齡、cTnI、NT-proBNP、CK-MB、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a均高于無MACEs組，LVEF低于無MACEs組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），見表1。

2.2 microRNA-208a對AMI預(yù)后的預(yù)測價值 microRNA-208a預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的最佳臨界點(diǎn)為1.4。當(dāng)microRNA-208a為1.4時，microRNA-208a預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的敏感度為67.2%，特異度為90.8%;AUC曲線下面積為0.80，見圖1。

2.3 COX回歸分析 以MACEs為因變量，年齡、cTnI、NT-proBNP、CK-MB、心肌缺血再灌注時間、LVEF、microRNA-208a為自變量納入多因素COX回歸模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，年齡、cTnI、NT-proBNP、CK-MB、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a 是AMI患者發(fā)生MACEs的危險因素，LVEF是AMI患者發(fā)生MACEs的保護(hù)因素，見表2。

3 討論

AMI仍然是世界上最常見和最嚴(yán)重的心血管疾病。AMI患者死亡和并發(fā)癥的風(fēng)險均增加，其原因包括慢性心力衰竭、心律失常、猝死和復(fù)發(fā)性心肌梗死。雖然AMI的死亡率一直在下降，但冠狀動脈疾病和相關(guān)并發(fā)癥的患病率仍在增加。預(yù)測AMI的預(yù)后對于制定干預(yù)措施（包括行為改變、藥物治療和血運(yùn)重建）非常重要。AMI預(yù)后的預(yù)測可依據(jù)心肌梗死溶栓治療臨床試驗(yàn)（TIMI）風(fēng)險評分、全球急性冠狀動脈事件注冊（GRACE）評分、CHADS2評分等臨床基準(zhǔn)參數(shù)進(jìn)行[12]。生物標(biāo)志物可以為AMI預(yù)后預(yù)測提供大量補(bǔ)充信息。先前的研究顯示， microRNA-208a水平與冠心病患者疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[13]。然而，microRNA-208a的表達(dá)與AMI患者預(yù)后的研究卻十分有限。

本研究發(fā)現(xiàn)，microRNA-208a預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的最佳臨界點(diǎn)為1.4。當(dāng)microRNA-208a為1.4時， microRNA-208a 預(yù)測AMI發(fā)生MACEs的靈敏度為67.2%，特異度為90.8%;AUC曲線下面積為0.80。提示microRNA-208a在預(yù)測AMI預(yù)后上有一定價值。COX回歸發(fā)現(xiàn)，年齡、cTnI、NT-proBNP、CK-MB、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a是AMI患者發(fā)生MACEs的獨(dú)立危險因素。這與既往的研究一致：Shyu等[10]進(jìn)行的動物實(shí)驗(yàn)表明，microRNA-208a可增加AMI患者心肌內(nèi)皮素的表達(dá)和心肌纖維化。Xiao等[14]的研究表明，血清microRNA-208a在AMI后4 h和24 h分別升高了36倍和51倍。Cui等[15]的研究發(fā)現(xiàn)，mir-208a通過靶向SFRP1和負(fù)性調(diào)節(jié)MEG3促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖和侵襲。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，年齡、cTnI 、NT-proBNP、CK-MB、心肌缺血再灌注時間、microRNA-208a是AMI患者預(yù)后的危險因素，microRNA-208a表達(dá)水平高者預(yù)后差。

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（收稿日期：2019-05-14）

（本文編輯：蔣愛敏）