王月英

（烏海市檢驗(yàn)檢測(cè)中心，內(nèi)蒙古 烏海 016000）

1 儀器與試藥

1.1 儀器

AL204電子天平、101-1AS型干燥箱、BF5182C-1型進(jìn)口馬弗爐、DM3000顯微鏡（萊卡）。

1.2 試藥

8批藥材樣品由課題組分別于2018年3月6日安徽省亳州（1號(hào)樣品）和3月13日貴州省荷花池（2號(hào)樣品）、5月28日陜西藥材公司（3.4.5號(hào)樣品）、12月15日廣西玉林（6、7號(hào)樣）/12月18日廣州清平等地市場(chǎng)調(diào)研時(shí)收集。廣天仙子對(duì)照藥材購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121478-200401。磷酸二氫鈉、羧甲基纖維素鈉、香草醛、正己烷、乙酸乙酯、冰醋酸、甲酸、石油醚（60～90℃）、硅膠G均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 雜質(zhì)、水分、總灰分、石油醚浸出物測(cè)定

2.1.1 雜質(zhì)

按照本品項(xiàng)下規(guī)定的方法，取樣品50 g，過(guò)藥典3號(hào)篩，篩下物為碎末，篩上物再檢出雜質(zhì)，二者合并計(jì)為雜質(zhì)。

2.1.2 水分按照中國(guó)藥典2015版四部

0823第二法測(cè)定、總灰分按照中國(guó)藥典2015版四部2302測(cè)定。

2.1.3 浸出物

由于該品種的有效成分尚不明確，無(wú)法進(jìn)行其活性成分研究，為了進(jìn)一步控制其內(nèi)在質(zhì)量，對(duì)該品種進(jìn)行了浸出物總量的探索。參照進(jìn)口藥材暫行標(biāo)準(zhǔn)中南天仙子項(xiàng)下的方法，用石油醚（60～90℃）在80℃和85℃水浴上加熱回流提取2 h、4 h、8 h（提取液無(wú)色），提取液揮干石油醚，在60℃烘0.5 h和1 h和105℃烘0.5小時(shí)進(jìn)行考察，結(jié)果，在不同溫度和不同烘干時(shí)間烘干對(duì)浸出物影響不大，而不同提起時(shí)間和回流溫度對(duì)浸出物有一定的影響，故建立該品種的浸出物測(cè)定方法。取本品粉6 g（過(guò)四號(hào)篩），精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）適量，精密量取，回流提取至石油醚無(wú)色，將石油醚提取液轉(zhuǎn)移至已恒重的蒸發(fā)皿中，揮盡石油醚，于60℃烘30分鐘，放冷后稱重，計(jì)算石油醚浸出物量，以上雜質(zhì)、水分、總灰分、浸出物測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 經(jīng)驗(yàn)鑒別

該種子表面具眾多粘液化表皮毛，含粘液質(zhì)，粘液質(zhì)遇水釋放粘液，故建立水試鑒別。用水濕潤(rùn)后，即粘成一片，用手揉捏則越來(lái)越粘，扯之有白色膠絲出現(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖1。

表1 雜質(zhì)、水分、總灰分、浸出物測(cè)定結(jié)果

圖1 南天仙子經(jīng)驗(yàn)鑒別圖

2.3 顯微鑒別

本品為種子類藥材，種皮表皮細(xì)胞、下表皮細(xì)胞、油滴、子葉薄壁細(xì)胞、簇晶、淀粉粒等為主要特征，故建立粉末組織特征鑒別。結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 南天仙子顯微鑒別圖

2.4 TLC鑒別

2.4.1 薄層色譜條件

采0.1 mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的用硅膠G薄層板，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開(kāi)劑，以香草醛硫酸試液顯色觀察斑點(diǎn)。

2.4.2 供試品溶液制備

精密稱取本品粉末1 g，加石油醚（60～90℃）20 ml，浸泡3 h，濾過(guò)，揮去石油醚，提取物用乙酸乙酯2 ml溶解，作為供試品溶液。

2.4.3 對(duì)照藥材溶液制備

精密廣天仙子對(duì)照藥材1 g,同供試品制備方法制備對(duì)照藥材溶液。

2.4.4 試驗(yàn)方法與結(jié)果

吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各2～5 μl,分別點(diǎn)于0.1mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的用硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開(kāi)劑展開(kāi)8 cm以上，取出，晾干，噴以香草醛硫酸試液顯色，加熱至斑點(diǎn)清晰，結(jié)果樣品色譜中，在于廣天仙子（南天仙子）對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)（主斑點(diǎn)Rf值0.63，圖3）。

圖3 南天仙子薄層色譜圖

圖3中4為對(duì)照藥材,1.2.3.5.6.7.8.9為樣品。

2.4.5 薄層鑒別結(jié)果

該品種活性成分尚不明確，因此對(duì)照藥材對(duì)照鑒別為唯一選擇，參照進(jìn)口藥材暫行標(biāo)準(zhǔn)中南天仙子的薄層條件，通過(guò)不同提取方法（超聲和浸泡）、不同提取時(shí)間（浸泡3小時(shí)和超聲0.5小時(shí)）、不同薄層板（預(yù)制硅膠G和自制0.1 mol/L磷酸二氫鈉的硅膠G）、不同展開(kāi)劑和比例（正己烷：乙酸乙酯：冰醋酸與正己烷：乙酸乙酯：甲酸）、不同點(diǎn)樣量（2～10 μl）、不同展距（8～16 cm）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)考察。結(jié)果，加石油醚（60～90℃）浸泡3小時(shí)，以0.1 mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的硅膠G薄層板為載體，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)的斑點(diǎn)清晰，分離度較好。

3 討 論

（1）關(guān)于南天仙子鑒別情況看，收集的8批樣品沒(méi)有顯著區(qū)別，種子形狀，大小，顏色、味道及拉絲程度基本一致。不同地區(qū)的南天仙子薄層鑒別斑點(diǎn)在同一條件下斑點(diǎn)的顏色稍有些差異，但數(shù)量一致，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，在規(guī)定范圍內(nèi)調(diào)整其點(diǎn)樣量就能得到理想的色譜圖。

（2）實(shí)驗(yàn)中對(duì)南天仙子樣品進(jìn)行甲苯法和烘干法進(jìn)行考察水分含量，結(jié)果兩種方法測(cè)得的水分值較接近，說(shuō)明該品種基本不含揮發(fā)性成分，再考慮甲苯的毒性，本文選擇了烘干法測(cè)定水分含量。

（3）南天仙子藥材具有遇水釋放粘液質(zhì)特性，因此浸出物浸出溶劑的選擇上未考慮水和醇，而選擇石油醚作為提取溶劑進(jìn)行考察，并建立本文中的浸出物測(cè)定方法。

（4）小結(jié)：本文對(duì)八批南天仙子藥材樣品進(jìn)行了水分、雜質(zhì)、總灰分、石油醚浸出物等考察，并對(duì)其進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)鑒別和顯微鑒別，還以廣天仙子（南天仙子）作為對(duì)照藥材進(jìn)行了TLC鑒別，建議南天仙子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確定為：雜質(zhì)不得過(guò)1%，水分不得過(guò)9.0%，總灰分不得過(guò)10.0%，石油醚浸出物不得少于18.0%。該實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便、快捷、可靠，能有效鑒別和評(píng)價(jià)南天仙子質(zhì)量。