皮損組織Cx26 蛋白及信使RNA 表達(dá)與PV 患者PASI 評(píng)分的關(guān)聯(lián)性

張雪嬌 高丁 石衛(wèi)華

尋常型銀屑?。╬soriasis vulgaris ，PV）為臨床常見慢性炎癥性皮膚病，臨床表現(xiàn)為紅色丘疹、銀白色鱗屑，具有病程長(zhǎng)，易復(fù)發(fā)等特點(diǎn)，約30%銀屑病患者發(fā)病機(jī)制與遺傳、免疫、感染及環(huán)境等因素相關(guān)[1-3]。目前，部分學(xué)者認(rèn)為PV 發(fā)生、發(fā)展同細(xì)胞間信息傳遞異常有關(guān)。相關(guān)研究指出，Cx26蛋白為縫隙連接功能單位，主要作用于細(xì)胞間信息傳遞，Cx26 蛋白高表達(dá)可能與PV 發(fā)病相關(guān)，但PV 患者Cx26 蛋白水平是否與健康人群有別，臨床研究較少[4-6]?；诖?，本研究選取我院PV 患者60 例，旨在探究皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)與其皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（psoriasis area and severity index ，PASI）評(píng)分的關(guān)聯(lián)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批通過，2018 年7 月—2019 年7 月選取本院PV 患者60 例作為研究組，其中女24 例，男36 例；年齡24 ～65 歲，平均（44.12±8.12）歲；另選同期健康體檢者32例作為對(duì)照組，其中女14 例，男18 例；年齡25 ～67 歲，平均（43.78±7.89）歲。兩組基線資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。

1.2 選例標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）研究組患者均符合PV 相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；（2）對(duì)照組均為體檢健康者；（3）所有研究對(duì)象均知曉本研究，已簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）膿皰型銀屑病；（2）有精神疾病史者；（3）關(guān)節(jié)病型銀屑??；（4）血液系統(tǒng)疾病患者；（5）合并其他腎臟疾病者；（6）免疫功能缺陷者。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 采用環(huán)鉆孔器獲取研究組皮損處組織及對(duì)照組正常皮膚組織，進(jìn)行液氮速凍保存。

1.3.2 檢測(cè)方法 采用免疫熒光染色法和B203LED 型光學(xué)顯微鏡（重慶奧特光學(xué)儀器有限公司）檢測(cè)皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平，所用免疫組化試劑盒、DAB 顯色試劑盒、基因組擴(kuò)增試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司，由相同檢驗(yàn)科高年資醫(yī)師嚴(yán)格依照儀器、試劑盒說明書完成操作規(guī)程。

1.4 觀察指標(biāo)

（1）比較兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平。（2）比較研究組不同病情程度之間（輕度、中度、重度）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平。病情程度根據(jù)PASI 評(píng)分分級(jí)，重度≥30 分、中度15 ～29 分、輕度＜15 分[8]。PASI 評(píng)分=皮損面積×[0.1×（Dh+Ih+Eh）+0.2×（Du+Iu+Eu）+0.3×（Dl+Il+El）+0.4×（Dt+It+Et）]，E：紅斑，I：浸潤(rùn)，D：鱗屑，h：頭（包括頸），u：上肢，t：下肢，l：軀干。皮疹部位均為5 個(gè)等級(jí)：0 ～4分。皮損面積為0 ～6 分，總分0 ～72 分，得分越高，皮損越嚴(yán)重。（3）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平與PASI 評(píng)分的關(guān)聯(lián)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較

研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平均高于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

2.2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較

研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平低于重度（P＜0.05），見表2。

2.3 Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平與PASI 評(píng)分的關(guān)聯(lián)性分析

經(jīng)Pearson 分析可知，PASI 評(píng)分與Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平存在明顯正相關(guān)關(guān)系（r1=0.625，P1=0.004；r2=0.541，P2=0.012）。

3 討論

Cx 蛋白為細(xì)胞縫隙連接基本功能單位，細(xì)胞之間通過縫隙連接進(jìn)行物質(zhì)、信息及能量傳遞交換，Cx 蛋白水平可直接影響細(xì)胞增殖、分化、新陳代謝[9-10]。相關(guān)研究指出，Cx26 可調(diào)節(jié)細(xì)胞間信息傳遞及分化，于機(jī)體毛囊外毛根鞘及內(nèi)耳呈現(xiàn)高表達(dá)，Cx26異常突變與皮膚損傷、耳聾密切相關(guān)[11-12]。本研究結(jié)果顯示，研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平均高于對(duì)照組，提示PV患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平呈異常高表達(dá)狀態(tài)。相關(guān)研究指出，PASI 評(píng)分系統(tǒng)對(duì)評(píng)估銀屑病患者病情嚴(yán)重程度及預(yù)后具有重要臨床意義，評(píng)分越高皮損越嚴(yán)重[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平低于重度，可見，隨著銀屑病患者PASI 評(píng)分升高，Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平逐漸升高；進(jìn)一步經(jīng)Spearman 分析可知，PASI 評(píng)分與Cx26蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平存在明顯正相關(guān)關(guān)系。可見，Cx26蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平與PASI 評(píng)分關(guān)系密切，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平有助于判斷銀屑病患者病情進(jìn)展及嚴(yán)重程度。

表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較（）

表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較（）

組別 例數(shù) Cx26 蛋白含量 Cx26 信使RNA研究組 60 0.60±0.04 1.76±0.09對(duì)照組 32 0.38±0.03 1.48±0.06 t 值 - 29.752 17.824 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較（）

表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平比較（）

注：a 表示與中度比較，P ＜0.05；b 表示與重度比較，P ＜0.05

病情程度 例數(shù) Cx26 蛋白含量（bp） Cx26 信使RNA（ng/mL）輕度 20 0.48±0.02a 1.56±0.08a中度 26 0.59±0.04b 1.78±0.09b重度 14 0.72±0.05 1.94±0.11 F 值 - 169.432 73.922 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

綜上所述，PV 患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達(dá)水平與PASI 評(píng)分密切相關(guān)，可作為評(píng)判疾病進(jìn)展、預(yù)后的指標(biāo)，為臨床治療提供指導(dǎo)依據(jù)。