何 玲,吳紅衛(wèi),譚大為

(1.成都醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院血液科，四川成都 610503;2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院血液科，貴州貴陽(yáng) 550004)

急性白血病(AL)是一種常見(jiàn)的造血系統(tǒng)惡性腫瘤，其特點(diǎn)是骨髓中造血干細(xì)胞惡變，形成原始細(xì)胞及幼稚細(xì)胞克隆并抑制正常造血，臨床上表現(xiàn)為貧血、出血和發(fā)熱等，可侵襲肝、脾、淋巴結(jié)等多組織和器官，影響患者的生活質(zhì)量和生命健康[1-2]。AL按細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)(MICM)診斷分類(lèi)通?？梢苑譃榧毙粤馨图?xì)胞白血病(ALL)和急性髓細(xì)胞白血病(AML)兩大類(lèi)[3-4]。目前，美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)將AL的主要治療方案設(shè)定為聯(lián)合化療，調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫系統(tǒng)，使患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，使患者生存期延長(zhǎng)[5-7]。本研究通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)AL患者血清單粒細(xì)胞趨勢(shì)化蛋白-1(MCP-1)、CC類(lèi)趨化因子受體2(CCR-2)及凝血功能指標(biāo)的變化，以探討其在AL患者中判斷病情、監(jiān)測(cè)治療的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2017年12月成都醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的AL患者100例和同期體檢健康者50例。AL患者的診斷和分型均符合2018《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)第四版》，根據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫表型、細(xì)胞遺傳學(xué)及進(jìn)行MICM分型[8]。AL患者分為ALL組64例和AML組36例。ALL組患者中男36例，女28例；平均發(fā)病年齡(40.36±10.39)歲；病程(1.65±0.84)年。AML患者男20例，女16例；平均(41.46±11.62)歲；平均病程(1.73±0.94)年。同時(shí)選取本院50例體檢健康者為對(duì)照組，男26例，女24例；平均(40.19±10.83)歲。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者經(jīng)家屬同意自愿簽署知情同意書(shū)。

1.2方法 治療標(biāo)準(zhǔn)：按照2017年版《中國(guó)成人急性髓系白血病(非急性早幼粒細(xì)胞白血病)診療指南》、2012年版《中國(guó)成人急性淋巴細(xì)胞白血病診斷與治療專(zhuān)家共識(shí)》標(biāo)準(zhǔn)、2014年版《中國(guó)急性早幼粒細(xì)胞白血病診療指南》[9-11]進(jìn)行化療。

所有研究對(duì)象分別于入院當(dāng)天及化療2個(gè)周期后，于清晨空腹采集6 mL靜脈血，常規(guī)分離血清、血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法測(cè)定研究對(duì)象血清內(nèi)MCP-1、CCR-2含量，試劑盒購(gòu)于上?；鄯f生物科技有限公司；采用貝克曼庫(kù)爾特公司生產(chǎn)的ACL-TOP血凝儀檢測(cè)血漿纖維蛋白原(FIB)、血漿D-二聚體(D-D)、抗凝血酶(ATⅢ)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶原時(shí)間國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(PT-INR)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)表達(dá)，試劑盒購(gòu)自上海晶抗生物工程有限公司。

2 結(jié) 果

2.1各組血液MCP-1、CCR-2含量表達(dá) 與對(duì)照組相比，ALL組和AML組MCP-1、CCR-2水平顯著升高，ALL組MCP-1、CCR-2水平升高更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與治療前相比，ALL組和AML組患者治療后體內(nèi)MCP-1、CCR-2水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組血液細(xì)胞因子含量表達(dá)

注：與對(duì)照組相比,*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

2.2各組凝血功能指標(biāo)檢測(cè) 與對(duì)照組相比，ALL組和AML組FIB、D-D、PT、APTT、TT顯著上升，ATⅢ顯著下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與治療前相比，ALL組和AML組患者化療后血漿FIB、D-D、PT、APTT、TT時(shí)間顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，ATⅢ顯著延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PT-INR沒(méi)有顯著改變，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2～3。

2.3患者M(jìn)CP-1、CCR-2和凝血功能與患者治療前后的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示白血病患者M(jìn)CP-1、CCR-2、FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT水平與白血病治療前后的相關(guān)系數(shù)分別為0.48、0.39、0.44、0.39、0.61、0.41、0.47、0.35，均呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，在治療后白血病患者M(jìn)CP-1、CCR-2和凝血功能指標(biāo)均得到了顯著的改善；PT-INR白血病治療前后的相關(guān)系數(shù)為-0.19，無(wú)顯著的相關(guān)性(P>0.05)。

表2 各組凝血功能指標(biāo)水平表達(dá)

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

表3 各組凝血功能指標(biāo)水平表達(dá)

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

3 討 論

AL是造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，發(fā)病時(shí)白血病細(xì)胞出現(xiàn)增殖、分化及凋亡異常，并在骨髓中蓄積，對(duì)正常造血產(chǎn)生抑制作用，其病因目前尚未完全清楚，常伴有凝血功能的異常，包括血管內(nèi)皮損傷，血小板功能異常、凝血、抗凝及纖溶激活而形成高凝或出血，是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。MCP-1和CCR-2是MCP-1的特異度受體，可以不同程度地趨化單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞，在機(jī)體防御、慢性炎癥及抗腫瘤等方面有重要作用[12-13]。

本研究結(jié)果表明，ALL組和AML組患者體內(nèi)MCP-1、CCR-2水平顯著升高，ALL組MCP-1、CCR-2水平升高更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ALL組和AML組患者治療后體內(nèi)MCP-1、CCR-2水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MCP-1與CCR2受體結(jié)合后，引起細(xì)胞內(nèi)PTX敏感的Ca2+內(nèi)流增加、磷脂酶C及PI3K的激活；MCP-1還可以調(diào)控JNK1、p38及ERK活性,進(jìn)而激活MAPK通路，趨化內(nèi)皮定向細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，誘導(dǎo)血管形成。MCP-1還能趨化TGF-β促進(jìn)血管生成，即MCP-1有促腫瘤作用[13-14]。本研究中AL患者血清MCP-1水平異?？赡芘c機(jī)體炎性反應(yīng)及免疫功能改變有關(guān)。AL患者體內(nèi)出現(xiàn)血小板生成減少或功能異常，同時(shí)白血病細(xì)胞釋放促凝物質(zhì)，均可加速血液凝固性形成高凝狀態(tài)或凝血功能異常。FIB是血漿中水平最高的凝血因子，其通過(guò)血小板聚集來(lái)加速血液凝固，增加促凝物質(zhì)和減少抗凝物質(zhì)，可參與調(diào)節(jié)體內(nèi)的免疫活性和炎性反應(yīng)，以及增加炎性介質(zhì)的合成和分泌，F(xiàn)IG在體內(nèi)成倍地升高，與血栓前狀態(tài)形成密切相關(guān)，決定血液是否凝固[15-16]，該指標(biāo)水平的異常可能與腫瘤細(xì)胞在細(xì)胞因子的作用下發(fā)生髓外浸潤(rùn)有關(guān)。D-D是交聯(lián)纖維蛋白特異度的降解產(chǎn)物，主要可以體現(xiàn)血液高凝狀態(tài)及繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。外源性、內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的主要生物學(xué)指標(biāo)ATⅢ、PT、APTT、TT水平異常多見(jiàn)于內(nèi)源性和外源性促凝物質(zhì)活性減弱[17-18]。

本研究發(fā)現(xiàn)，AL患者體內(nèi)FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT顯著上升，說(shuō)明AL患者體內(nèi)存在出血、凝血異常，正常骨髓造血受到抑制，血小板不能有效發(fā)揮止血功能，凝血時(shí)間延長(zhǎng)。與治療前相比，ALL組和AML組患者化療后血漿FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT顯著延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PT-INR水平?jīng)]有顯著改變，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說(shuō)明化療后隨著白血病細(xì)胞被殺滅，患者的腫瘤負(fù)荷減輕，故非感染患者的凝血功能逐漸恢復(fù)，減少炎癥介質(zhì)合成和凝血因子的激活，體內(nèi)凝血異常得到控制。

4 結(jié) 論

動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)MCP-1、CCR-2及凝血功能指標(biāo)變化有助于臨床預(yù)測(cè)、判斷AL患者的病情變化及評(píng)估治療效果，可作為病情的判斷及治療的參考指標(biāo)。