（寧夏大學(xué)，銀川 750021）

奶牛圍產(chǎn)期是指產(chǎn)前3周至產(chǎn)后3周，其中前三周為圍產(chǎn)初期，后三周為圍產(chǎn)后期。圍產(chǎn)期是奶牛泌乳周期中十分重要的時期，該時期由于奶牛干物質(zhì)采食量急劇下降、胎兒營養(yǎng)需求大、泌乳啟動及采食量上升速度低于泌乳量的上升速度，造成能量供應(yīng)不能滿足能量的輸出，導(dǎo)致奶牛處于能量負(fù)平衡狀態(tài)（negative energy balance,NEB）。圍產(chǎn)期奶牛通過體脂動員緩解能量負(fù)平衡，脂肪組織分解生成大量游離脂肪酸(nonesterified fatty acids,NEFA)，游離脂肪酸進(jìn)入肝臟進(jìn)行代謝，但圍產(chǎn)期奶牛對游離脂肪酸的代謝能力有限，使得大量游離脂肪酸在肝臟因不完全氧化而形成酮體，或酯化形成甘油三酯( triglyceride,TG)在肝臟積累，易導(dǎo)致酮病或脂肪肝的發(fā)生[1]。

大量的研究表明，在飼料中添加中草藥能夠明顯提高奶牛的采食量、免疫力和生產(chǎn)效能。山楂是薔薇科植物山里紅的成熟干燥果實，味酸、甘，微溫，歸脾、胃、肝經(jīng)。它是人類常用的健胃消食藥，是中草藥中可以藥食兩用的一種，價格便宜，易于獲得。在飼料中適量地添加山楂可以提高奶牛產(chǎn)奶量，改善奶牛消化疾病和采食量低的情況[2]。山楂中含有大量的枸櫞酸、酒石酸、蘋果酸等有機(jī)酸和較多的維生素、微量元素、糖，由于營養(yǎng)豐富可以增強(qiáng)飼料的適口性[3]。同時，山楂中還含有具有降血壓、調(diào)血脂、改善心肌供血供氧、增加冠脈流量等功能的黃酮類化合物以及對疲勞和腫瘤有一定抵抗力的活性多糖、甾體類化合物[4～6]。總體來說山楂是一種很有開發(fā)價值的中草藥飼料添加劑，應(yīng)用前景非常廣闊。本研究將山楂粉末作為圍產(chǎn)期奶牛飼料添加劑，通過測定奶牛血漿中各生化指標(biāo)，以此來研究山楂對圍產(chǎn)期奶牛肝功能和血脂的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗儀器

全自動生化分析儀（BS-180，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；離心機(jī)(TGL-16，江蘇中大儀器科技有限公司）。

1.2 試驗試劑

獸用生化試劑包括堿性磷酸酶（ALP）試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）試劑盒、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）試劑盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）試劑盒、甘油三酯（TG）試劑盒、總膽固醇（TC）試劑盒，均購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。

1.3 試驗分組與給藥

選取寧夏某奶牛場胎次、泌乳量和體格相近的20頭圍產(chǎn)期荷斯坦牛，隨機(jī)分為對照組和試驗組，每組10頭。對照組飼喂圍產(chǎn)期TMR，試驗組在圍產(chǎn)期TMR的基礎(chǔ)上添加100g/d山楂粉末。預(yù)飼期為1周，正常飼喂時間為42d（即產(chǎn)前21d至產(chǎn)后21d），每個處理組飼養(yǎng)條件一致，在每天早晨8:00TMR車添加完料后，迅速向日糧中加入山楂粉末，混合均勻。奶牛自由采食，自由飲水。

1.4 樣品采集

各組奶牛分別在分娩前21d、分娩當(dāng)天、分娩后21d尾根靜脈采集靜脈血10mL，肝素鈉抗凝，以3 000r/min離心10min，檢測血漿中ALT、AST、ALP、GGT、TC和TG的含量。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理，試驗結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)分布檢驗后，進(jìn)行單因素方差分析，并用Duncan法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

由表1和圖1可知，試驗組AST、ALP、GGT、ALT、TC、TG的活性在產(chǎn)后21d均低于產(chǎn)前21d和分娩當(dāng)天（P＜0.05），且分娩當(dāng)天均低于產(chǎn)前21d（P＜0.05）。對照組這些指標(biāo)的活性在產(chǎn)后21d均高于產(chǎn)前21d和分娩當(dāng)天（P＞0.05）。在試驗期，試驗組這些指標(biāo)的活性均呈持續(xù)下降趨勢，對照組均呈持續(xù)上升趨勢。試驗組血漿中這些指標(biāo)的活性在分娩當(dāng)天時均低于對照組相應(yīng)指標(biāo)（P＜0.05），在產(chǎn)后21d時也低于對照組（P＜0.05）。

表1 山楂對奶牛血漿中ALP、AST、GGT、ALT、TC、TG活性的影響

圖1 山楂對圍產(chǎn)期奶牛肝功能和血脂相關(guān)指標(biāo)的影響(a: AST, b:ALP, c: GGT, d: ALT, e: TC, f:TG)

3 討論

3.1 山楂對奶牛肝功能的影響

近年，血液中谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶（ALP）等的水平已被臨床作為評估肝功能損傷程度的指標(biāo)應(yīng)用[7]。GGT在肝細(xì)胞線粒體中分泌，健康動物血液中表達(dá)水平較低，但是在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)肝臟組織細(xì)胞出現(xiàn)異常時會導(dǎo)致這些組織細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，從而使得血液中GGT的表達(dá)升高[8]。ALT只存在于肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，具有較高的特異性，如果肝細(xì)胞出現(xiàn)1%的損傷，那么血液中ALT水平就會升高1倍，因此，ALT被認(rèn)為是檢測肝功能損害的最敏感指標(biāo)。肝臟中存在大量的AST、ALP，當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷，AST、ALP的水平通常是升高的[9]。本試驗發(fā)現(xiàn)，在分娩前后21d內(nèi)，AST、ALP、GGT、ALT這些肝功能損傷指標(biāo)的檢測結(jié)果均表明試驗組優(yōu)于對照組，且隨分娩的時間的延長，試驗組指標(biāo)越來越好。這說明在日糧中添加山楂具有減少奶牛肝臟內(nèi)脂質(zhì)沉積的作用，能很好地保護(hù)肝臟組織的生理功能。這與葉希韻等的研究結(jié)果一致[10]。

3.2 山楂對奶牛血脂的影響

血液中膽固醇和甘油三酯水平檢測對奶牛產(chǎn)后健康的診斷和監(jiān)控有著重要意義。血脂的主要成分是膽固醇和甘油三酯，隨著血液中膽固醇和甘油三酯含量過高奶牛的健康將會受到損傷。通過對血漿進(jìn)行生化分析可以膽固醇和甘油三酯的指標(biāo)變化來判斷山楂對血脂的影響。7α-羥化酶（cholesterol 7α-hydroxylase，CYP7A1）是肝臟合成并促使膽固醇轉(zhuǎn)化成膽汁酸的限速酶，在維持體內(nèi)膽固醇代謝平衡上起關(guān)鍵作用。Kwok等研究發(fā)現(xiàn)，山楂主要作用機(jī)制是通過提高肝臟7α-羥化酶表達(dá)促使膽汁酸大量排出，抑制膽固醇的生物合成[11]。本試驗結(jié)果顯示，在分娩前后21d內(nèi)，試驗組的TG、TC水平優(yōu)于對照組，且隨分娩后時間的延長，試驗組指標(biāo)越來越好。這說明山楂作為日糧添加劑具有降低圍產(chǎn)期奶牛血脂的作用。這一結(jié)果與胡慧明等的研究結(jié)果相符合[12]。

4 結(jié)論

通過對圍產(chǎn)期奶牛血漿進(jìn)行生化分析檢測，結(jié)果顯示試驗組ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在分娩當(dāng)天和產(chǎn)后21d時逐漸下降，且與對照組差異顯著（P＜0.05）。且試驗組血漿中ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在產(chǎn)后21d時均顯著低于其余兩個階段（P＜0.05）。綜上所述山楂能顯著降低奶牛血脂和減輕肝損傷。