粗須白甲魚(yú)人工繁殖試驗(yàn)

陳飛雄， 張顯波*， 周其椿， 趙 飛， 樊均德，廖澤龍，賀兵，李正友，袁再孝，李建光

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 水產(chǎn)研究所， 貴州 貴陽(yáng) 550025； 2.銅仁學(xué)院 生物與農(nóng)林工程學(xué)院， 貴州 銅仁 554300； 3.江口縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局， 貴州 江口 554300； 4.銅仁市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局， 貴州 銅仁 554300； 5.貴州東億農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司， 貴州 江口 554300)

粗須白甲魚(yú)(Onychostomabarbata)是貴州省梵凈山周邊山溪河流重要的野生小型淡水名貴經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，又名麻魚(yú)、赤尾魚(yú)、標(biāo)桿魚(yú)、石魚(yú)、土狗魚(yú)、叉包等，屬鯉形目鯉科鲃亞科白甲魚(yú)屬，主要分布于烏江、清水江、都柳江、錦江等水系，主要棲息于湍急、底質(zhì)多礫石的江段。粗須白甲魚(yú)肉因質(zhì)細(xì)嫩、味美不腥、營(yíng)養(yǎng)豐富而聞名。梵凈山地處貴州省東北部江口、印江和松桃三縣交界地帶，是武陵山脈的主峰，同時(shí)也是烏江水系和沅江水系的分水嶺，雨量充沛，地下水資源豐富，河流落差較大，上游水流湍急，水面狹窄，多險(xiǎn)灘瀑布，水溫較低；下游水流相對(duì)較為平緩，水面寬闊，水溫較高，水域生境較為復(fù)雜，為粗須白甲魚(yú)提供了良好的生活場(chǎng)所。但近年來(lái)，由于過(guò)度捕撈和人為干預(yù)導(dǎo)致環(huán)境改變，使粗須白甲魚(yú)資源受到嚴(yán)重影響，分布范圍逐年縮小，其種群數(shù)量日趨減少，在主要分布區(qū)水域難覓蹤跡。因此，開(kāi)展粗須白甲魚(yú)人工繁殖試驗(yàn)，研究其規(guī)模化人工繁殖技術(shù)，為保護(hù)好這一野生資源及其產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 親魚(yú)來(lái)源與暫養(yǎng)

粗須白甲魚(yú)親魚(yú)2～3冬齡、體重120 g左右，于2019年從梵凈山周邊山溪中獲得，在貴州東億農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司流水養(yǎng)殖池暫養(yǎng)1冬齡，暫養(yǎng)池水流3 m3/h。4月中旬進(jìn)入繁殖準(zhǔn)備期。飼喂人工配合飼料，每天早中晚各1次，每天飼喂量占魚(yú)體重的3%。5月初水溫穩(wěn)定在18℃左右，挑選親魚(yú)暫養(yǎng)在不同池中，暫養(yǎng)2 d左右進(jìn)行催產(chǎn)。

1.2 親魚(yú)催產(chǎn)

把親魚(yú)分為3組進(jìn)行催產(chǎn)，每組雌魚(yú)30尾、雄魚(yú)20尾，雌魚(yú)每尾催產(chǎn)程序及激素劑量見(jiàn)表1。胸鰭基部注射，劑量為每100 g體重每次0.2 mL，第1次注射后12 h注射第2針。雄魚(yú)只注射第2針，劑量為雌魚(yú)第2針的一半。

表1 粗須白甲魚(yú)雌魚(yú)催產(chǎn)程序及激素劑量

1.3 人工授精

1.3.1 精卵獲取 親魚(yú)注射第2針后24～72 h，每12 h檢查1次，及時(shí)把有發(fā)情現(xiàn)象的親魚(yú)撈出，放入裝有曝氣水的暫養(yǎng)盆中，用濕潤(rùn)毛巾包住頭部和背面，裸出后腹部和泄殖孔，擦干泄殖孔周?chē)屯析挼乃?，由前向后輕輕擠壓腹部獲得精卵。

1.3.2 授精 采用干法授精，即將雄魚(yú)精液直接擠入盛有魚(yú)卵的盆中，用羽毛輕輕攪動(dòng)混勻，再迅速加入水，每2 000枚卵加水2～3 mL，并不斷搖動(dòng)盆，然后在室溫下靜置至少1 min。最后將受精卵倒入孵化網(wǎng)箱或塑料盆中。

1.4 受精卵孵化

采用桶式孵化法，孵化36 h左右正常受精卵發(fā)育至原腸胚期，及時(shí)檢出未受精卵或死胚(呈現(xiàn)不同透明的乳白色)，計(jì)算受精率。水溫18℃下孵化96 h左右，胚胎破膜產(chǎn)出，計(jì)算孵化率。孵化36 h、48 h、72 h、84 h和96 h隨機(jī)取胚胎至少300枚進(jìn)行觀(guān)察，計(jì)算孵化率。

受精率=[(總卵數(shù)-白卵數(shù))/總卵數(shù)]×100%

總孵化率=[正常出膜仔魚(yú)數(shù)/(出膜卵數(shù)+總白卵數(shù))]×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 催產(chǎn)效果

2.1.1 雌魚(yú) 從表2看出，3組雌魚(yú)的催產(chǎn)率差異較大，以第1組即二次同時(shí)注射絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素釋放激素A2(LHRH-A2)和地歐酮(DOM)的催產(chǎn)效果較好，總催產(chǎn)率達(dá)60.0%；以第2組即二次同時(shí)注射HCG和LHRH-A2的催產(chǎn)效果次之，為43.3%；第3組即單獨(dú)注射LHRH-A2的催產(chǎn)效果最差，為36.7%。3組中的最佳效應(yīng)時(shí)間皆為48 h，催產(chǎn)率分別達(dá)42.3%、25.0%和21.5%。

表2 不同組粗須白甲魚(yú)不同催產(chǎn)時(shí)間雌魚(yú)的催產(chǎn)效果

2.1.2 雄魚(yú) 3組催產(chǎn)雄魚(yú)均能獲得較好的精液。未催產(chǎn)的雄魚(yú)也能獲得大量精液，但未催產(chǎn)處理的雄魚(yú)精液粘滯性高，部分個(gè)體的精液不易液化。

2.2 授精與孵化效果

經(jīng)統(tǒng)計(jì)，粗須白甲魚(yú)人工授精的平均受精率為62.7%。發(fā)育至原腸胚的受精卵在孵化桶中的孵化率較高，36～48 h的受精卵孵化率為93.0%，48～72 h為94.3%，72～84 h達(dá)95.8%，96 h的總孵化率為84.0%。

3 結(jié)論與討論

研究結(jié)果表明，粗須白甲魚(yú)可進(jìn)行全人工繁殖，經(jīng)人工催產(chǎn)、干法授精、孵化等，其催產(chǎn)率達(dá)60.0%，受精率達(dá)62.7%，孵化率達(dá)84.0%。

野生粗須白甲魚(yú)未達(dá)到性成熟的雌雄魚(yú)較難區(qū)分，經(jīng)1個(gè)冬季人工馴養(yǎng)，進(jìn)入繁殖前期(一般4月初)雄魚(yú)表現(xiàn)出典型的第二性征，上下頜吻端各有一橫列齒狀追星；繁殖季節(jié)輕輕擠壓腹部，泄殖孔會(huì)有乳白色精液流出。性腺發(fā)育良好的雌魚(yú)腹部明顯突出于體側(cè)，表明可用于人工繁殖。但是棲息地差異或不同年齡個(gè)體的性腺發(fā)育程度可能有差別。本研究粗須白甲魚(yú)的催產(chǎn)率僅42.3%，相對(duì)較低。因此，人工繁殖前有必要強(qiáng)化培育親魚(yú)，促使其性腺發(fā)育。粗須白甲魚(yú)卵受精率平均為62.7%，相對(duì)較低。原因可能是粗須白甲魚(yú)卵發(fā)育具有不同步性，催產(chǎn)后排出的卵成熟度不一致，部分卵不具備受精能力；親魚(yú)繁殖前雌雄混合培育模式影響卵巢的發(fā)育差異；也有可能是精液質(zhì)量的問(wèn)題，今后有待深入研究。