鄺永輝 王志劍 歐丹萍 李雪華

【摘要】 目的 分析不同程度乙型病毒性肝炎（乙肝）患者透明質(zhì)酸（HA）、血清Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、Ⅳ型膠原（CⅣ）、層粘連蛋白（LN）和乙肝病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）水平檢測(cè)差異， 探討其相關(guān)性。方法 99例乙肝患者， 根據(jù)疾病診斷及病情程度不同將所有患者分為輕度組、中度組、重度組， 每組33例。檢測(cè)并比較三組患者乙肝血清標(biāo)志物情況以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性。結(jié)果 輕度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為乙肝表面抗原（HBsAg）（+）、乙肝表面抗體（HBsAb）（-）、乙肝e抗原（HBeAg）（+）、乙肝e抗體（HBeAb）（+）、乙肝核心抗體（HBcAb）（+）， HBV-DNA水平為（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度組患者HBV-DNA水平高于中度組及輕度組， 且中度組患者HBV-DNA水平高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。重度組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平分別為（413.26±48.88）ng/ml、（198.17±16.18）μg/L、（189.15±20.67）μg/L、（225.04±23.79）μg/L，?均高于中度組的（318.93±60.05）ng/ml、（159.24±15.87）μg/L、（135.60±13.72）μg/L、（200.11±20.85）μg/L，?及輕度組的（205.16±56.92）ng/ml、（123.98±16.14）μg/L、（80.04±20.76）μg/L、（150.98±35.03）μg/L， 且中度組均高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)性分析顯示， 乙肝患者HBV-DNA表達(dá)與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明顯正相關(guān)性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。結(jié)論 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性， 其對(duì)于臨床評(píng)估乙肝纖維化進(jìn)展情況具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 乙型病毒性肝炎;乙肝病毒-脫氧核糖核酸;透明質(zhì)酸;血清Ⅲ型前膠原;Ⅳ型膠原;層粘連蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.016

乙肝在我國(guó)屬于最為常見的慢性傳染性疾病之一， 患者因各種原因而導(dǎo)致肝臟被乙型肝炎病毒感染而引起急性或慢性炎癥;但由于早期缺乏特異性表現(xiàn)， 或癥狀被其他疾病所遮掩， 造成部分乙肝患者治療延誤并引起嚴(yán)重的肝臟損傷， 甚至出現(xiàn)肝硬化和肝癌， 威脅患者的生命安全[1， 2]。目前臨床對(duì)于乙肝患者的確診以及病情嚴(yán)重程度分級(jí)多是以組織病理活檢作為金標(biāo)準(zhǔn)， 但該檢查由于創(chuàng)傷較大， 導(dǎo)致患者排斥性較高， 因此實(shí)際應(yīng)用效果并不理想[3]。隨著醫(yī)療檢測(cè)設(shè)備和技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展， 肝臟疾病的血清學(xué)指標(biāo)不斷被發(fā)現(xiàn)并獲得廣泛的驗(yàn)證， 其中標(biāo)志肝纖維化的血清學(xué)指標(biāo)如HA、PCⅢ、CⅣ和LN最為常用[4]。本院為進(jìn)一步了解肝纖維化指標(biāo)和HBV-DNA水平在不同程度乙肝患者中的表達(dá)以及相關(guān)性， 特開展了此項(xiàng)專題研究， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2018年2月～2019年2月收治的99例乙肝患者作為研究對(duì)象， 納入標(biāo)準(zhǔn)：①入組患者均經(jīng)皮肝組織活檢組織病理學(xué)診斷明確;②年齡>25歲， 病程>6個(gè)月， 患者均知情本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重器質(zhì)性或系統(tǒng)性疾病、惡性腫瘤、合并其他肝臟或可能影響本研究結(jié)果疾病者。根據(jù)疾病診斷及病情程度不同將所有患者分為輕度組、中度組、重度組， 每組33例。其中輕度組男20例、女13例， 平均年齡（36.12±3.65）歲;中度組男23例、女10例， 平均年齡（36.32±3.73）歲;重度組男19例、女14例， 平均年齡（35.89±3.87）歲。三組一般資料比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 分別于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集所有患者靜脈血3～4 ml， 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)法檢測(cè)所有患者的乙肝血清標(biāo)志物及HBV-DNA水平。其中熒光定量PCR檢測(cè)設(shè)備為上海宏石醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的SLAN全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)， 試劑盒由上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供， 其定量測(cè)定范圍為103～107 copies/ml;ELISA法試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供， 分別檢測(cè)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb， 其結(jié)果按照Thermo Multiskan MK3酶標(biāo)儀比色進(jìn)行判斷。其中HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果正常下限參考值為5.0×102 copies/ml。另采用放射免疫法對(duì)患者的HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平進(jìn)行檢測(cè)。本研究所有檢測(cè)均由2名臨床工作具有5年以上經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)生進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果判讀。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較三組患者乙肝血清標(biāo)志物情況以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組患者乙肝血清標(biāo)志物及HBV-DNA水平比較 輕度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度組檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度組患者HBV-DNA水平高于中度組及輕度組， 且中度組患者HBV-DNA水平高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 三組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平比較 重度組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均高于中度組及輕度組， 且中度組患者的水平均高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2. 3 乙肝患者HBV-DNA表達(dá)與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示， 乙肝患者HBV-DNA表達(dá)與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明顯正相關(guān)性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。

3 討論

乙肝在臨床上由于其病情較為穩(wěn)定且病情較為漫長(zhǎng)， 因此極易造成患者對(duì)疾病的忽視， 從而導(dǎo)致未接受相應(yīng)的對(duì)癥治療， 導(dǎo)致慢性乙肝患者的病情出現(xiàn)持續(xù)發(fā)展;若乙肝病毒長(zhǎng)期處于復(fù)制活躍階段， 則會(huì)導(dǎo)致肝臟纖維化程度不斷加重[5]。國(guó)外學(xué)者Gordon等[6]在研究中指出乙肝患者最為突出的病理特點(diǎn)便在于肝臟內(nèi)的肝細(xì)胞因大量的以膠原蛋白為主的細(xì)胞外基質(zhì)沉積而引起纖維組織增生;有相關(guān)研究[7]提出針對(duì)乙肝患者應(yīng)當(dāng)進(jìn)行早期診斷， 并根據(jù)病情的嚴(yán)重程度不同制定相應(yīng)的干預(yù)和治療方案， 從而有效的對(duì)肝纖維化進(jìn)行阻斷， 提高患者的治療效果和預(yù)后恢復(fù)。因此， 如何選擇更加安全有效的非創(chuàng)傷性的檢查項(xiàng)目成為乙肝患者關(guān)注的重點(diǎn)。

本研究中選擇了對(duì)輕、中、重三種不同程度的乙肝患者進(jìn)行分組并檢測(cè)了各組的HBV-DNA表達(dá)和HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 結(jié)果顯示隨著乙肝病情嚴(yán)重程度的不斷增加， 其HBV-DNA水平也同過往研究結(jié)果相一致， 呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)， 說明隨著乙肝病毒活躍程度的增加， 對(duì)患者肝臟的損傷程度也會(huì)愈發(fā)嚴(yán)重。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)， 除了HBV-DNA水平外， 輕、中、重三種不同程度的乙肝患者， 其HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平也隨著病情的嚴(yán)重程度而出現(xiàn)不同程度的增加趨勢(shì);這在周萍等[8]的研究中也獲得了進(jìn)一步的證實(shí)。而本研究最終結(jié)果也顯示， 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性（P<0.05）， 其r值分別為0.517、0.433、0.451、0.478。其中， HA水平在正常人體中含量極低， 這是因?yàn)檎Ｈ梭w中存在HA清除劑的緣故;但一旦肝臟被乙肝病毒侵襲后， 導(dǎo)致HA的清除率下降而引起指標(biāo)的升高， Hsu等[9]在研究中提出HA水平越高則意味著患者的肝炎程度越重。PCⅢ水平的升高在臨床上往往標(biāo)志著肝臟合成Ⅲ型肽原的活躍程度提高， 而后者水平的升高則說明肝臟發(fā)生炎癥、壞死以及肝纖維化的風(fēng)險(xiǎn)更高[10]。CⅣ是構(gòu)成基底膜的重要成分， 因此當(dāng)肝臟出現(xiàn)纖維化后， 其基底膜的膠原會(huì)因此出現(xiàn)變化， 并導(dǎo)致其血清學(xué)指標(biāo)呈現(xiàn)上升趨勢(shì)[11]。Heidrich等[12]在研究中指出LN也是基底膜的重要組成成分之一， 并將其視為臨床標(biāo)志肝纖維化的重要血清學(xué)指標(biāo)， 其水平的升高與CⅣ保持相同的趨勢(shì)。因此， 上述血清學(xué)指標(biāo)和HBV-DNA水平的測(cè)定不僅有助于乙肝患者病情程度的判斷， 而且也對(duì)患者纖維化水平的變化趨勢(shì)提供重要的參考依據(jù)。

綜上所述， 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性， 其對(duì)于臨床評(píng)估乙肝纖維化進(jìn)展情況具有重要意義。

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[收稿日期：2020-03-30]