周 鋒，郁建江，薛春陽

（江陰市人民醫(yī)院，江蘇江陰 214400）

0 引言

惡性腫瘤（包括白血病）是危害人類健康且占據(jù)高病死率的病種之一［1］。血小板在腫瘤中的作用，特別是在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用，很久以前就被提出［2］。本研究對患者發(fā)生血液系統(tǒng)惡性腫瘤時(shí)的血小板、D-二聚體和纖維蛋白原（Fbg）作初步調(diào)查，為進(jìn)一步深入研究血小板、D-二聚體和Fbg在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中的具體作用奠定基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取江陰市人民醫(yī)院2018年2月至2020年7月收治的初發(fā)血液惡性腫瘤患者100例，其中：急性白血病（AL）63例，慢性粒細(xì)胞白血病（CML）2例，骨髓增生異常綜合征（MDS）3例，多發(fā)性骨髓瘤（MM）26例，淋巴瘤6例。男性患者58例，女性患者42例，年齡15～85歲。另選取江陰市人民醫(yī)院2019年12月至2020年7月期間收治的非血液惡性腫瘤患者60例作為非腫瘤疾病組，年齡16～64歲；正常健康體檢者60例，年齡22～74歲。

1.2 方法

（1）標(biāo)本采集。所有入組研究對象均于入院后空腹采集靜脈血2 mL，放置于含EDTA-K2抗凝的真空采血管中，另采集2.7 mL靜脈血放置于129 mmoL/L的枸櫞酸鈉1∶9抗凝的真空采血管中，3 000 r/min離心10 min，待測。

（2）標(biāo)本檢測。血常規(guī)測定：2 h內(nèi)采用日本Sysmex-XN 1000全自動(dòng)血液分析儀及相關(guān)配套試劑，用電阻抗法和光學(xué)方法測定各組血小板參數(shù)，包括血小板計(jì)數(shù)（PLT）、血小板容積（PCT）、血小板體積分布寬度（PDW）、平均血小板體積（MPV）、大血小板比率（P-LCR）。凝血測定：應(yīng)用日本Sysmex CA-5100全自動(dòng)血凝儀，采用Siemens公司提供的纖維蛋白原測定試劑盒、INNOVANCE D-Dimer試劑盒，分別用凝固法和免疫散射比濁法測定血漿中Fbg及D-二聚體含量。

（3）采集血液惡性腫瘤患者的骨髓，制1.5 cm×3 cm的骨髓涂片，計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)胞數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用GraphPad Prism 6.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，二組間比較采用不配對t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)用中位數(shù)M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann?Whitney U檢驗(yàn)；多組之間的兩兩比較采用單因素方差分析；采用Spearman法進(jìn)行相關(guān)性分析。所有統(tǒng)計(jì)資料均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

正常對照組、非腫瘤疾病組、血液惡性腫瘤組的血小板相關(guān)檢測指標(biāo)如表1所示。非腫瘤疾病組與正常對照組相比，各指標(biāo)均無差異；與正常對照組相比，U血液惡性腫瘤組PLT=773，U血液惡性腫瘤組PCT=776；與非腫瘤疾病組相比，U血液惡性腫瘤組PLT=756.5，U血液惡性腫瘤組PCT=753，t血液惡性腫瘤組MPV=2.714，t血液惡性腫瘤組P-LCR=2.339。

非腫瘤疾病組、血液惡性腫瘤組的D-二聚體和Fbg結(jié)果如表2所示。UD-二聚體=319.5，tFbg=5.801，血液惡性腫瘤組的D-二聚體和Fbg均明顯高于非腫瘤疾病組。在血液惡性腫瘤組，D-二聚體和Fbg的Spearman r=-0.295 4，P=0.002 8，二者之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系；在非腫瘤疾病組，D-二聚體和Fbg的相關(guān)性分析r=0.243 1，P=0.061 3，二者之間無相關(guān)性。同樣，在血液惡性腫瘤組，血小板和D-二聚體的Spearman r=-0.236 7，P=0.017 7，二者之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，而在非腫瘤疾病組，血小板和D-二聚體也無相關(guān)性顯示。

由于血液惡性腫瘤組的PLT明顯低于正常對照組和非腫瘤疾病組，筆者又進(jìn)一步按照PLT將其分為血小板降低組和血小板正常組兩組，并對其骨髓中的巨核細(xì)胞進(jìn)行分析，結(jié)果如表3所示。

3 討論

除了在出血止血中的作用，近年來血小板在實(shí)體瘤轉(zhuǎn)移中的作用已被廣泛研究，提出的機(jī)制包括血小板-癌癥聚集（PCA）［3］和可溶因子/微泡/外泌體的產(chǎn)生，這些可溶因子/微泡/外泌體靶向于腫瘤細(xì)胞或其微環(huán)境。已有的研究表明，血小板也可能在白血病的發(fā)病機(jī)制和預(yù)后中發(fā)揮作用［4-6］。最近的研究顯示血小板表面GPII與ectoATP5b相互作用是血小板-白血病聚集（PLA）的一個(gè)機(jī)制［7］。這些研究提示血小板在血液惡性腫瘤中的作用不容忽視。

結(jié)果表明，PLT和PCT在血液惡性腫瘤組與對照組相比明顯降低，這可能由以下幾個(gè)原因引起：（1）血液惡性腫瘤改變了造血微環(huán)境，導(dǎo)致造血干細(xì)胞向巨核細(xì)胞分化發(fā)生障礙，或者巨核細(xì)胞分化成熟產(chǎn)生血小板的過程發(fā)生障礙。（2）腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的某些成份造成血小板破壞過多。（3）血小板與血液腫瘤細(xì)胞發(fā)生聚集，使血液中的游離血小板減少，血細(xì)胞分析儀檢測不到。從巨核細(xì)胞數(shù)據(jù)來看，即使在血液惡性腫瘤組的血小板降低患者中，巨核細(xì)胞數(shù)目正常的也占了多數(shù)，且并無明顯的成熟障礙，說明發(fā)生血液惡性腫瘤時(shí)血小板的減少可能主要由后兩種原因所致。而MPV、P-LCR在血液惡性腫瘤組的升高可能由于血液腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的可溶因子引起了血小板的活化，活化的血小板可能更容易黏附到腫瘤細(xì)胞上，但這個(gè)觀點(diǎn)還需要血小板的活化指標(biāo)和血小板功能試驗(yàn)加以證實(shí)。

表1 各組血小板相關(guān)檢測指標(biāo)

表2 非腫瘤疾病組和血液惡性腫瘤組患者的D-二聚體和Fbg結(jié)果

表3 血液惡性腫瘤患者PLT降低組和PLT正常組骨髓片中巨核細(xì)胞情況

實(shí)驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)：在血液惡性腫瘤組，D-二聚體和Fbg呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，血小板和D-二聚體也呈負(fù)相關(guān)關(guān)系；而在非腫瘤疾病組，這幾者之間均無相關(guān)性顯示。從血小板和D-二聚體為出發(fā)點(diǎn)，說明出凝血、纖溶和血液惡性腫瘤之間存在必然的聯(lián)系，血小板可能是血液惡性腫瘤發(fā)生和治療中的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，但其詳細(xì)的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步闡明。