淺談面粉中過氧化苯甲酰檢測方法分析

賈晴鶴 張躍

摘要：對面粉中的過氧化苯甲酰進(jìn)行檢測是保證食品安全的關(guān)鍵，本文結(jié)合高效液相色譜法，詳細(xì)分析了該方法在面粉過氧化苯甲酰檢測中的基本技術(shù)路徑，希望能為提高食品質(zhì)量提供幫助。

關(guān)鍵詞：面粉；過氧化苯甲酰；高效液相色譜法

前言：

當(dāng)前，面粉生產(chǎn)企業(yè)為了，提高產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量，通常會在產(chǎn)品的加工過程中添加一定量的過氧化苯甲酰。過氧化苯甲酰有助于延長面粉的保質(zhì)期，避免質(zhì)量問題發(fā)生。但是，不規(guī)范的添加過氧化苯甲酰會對人體造成危害，不符合食品安全管理要求，所以需要尋找一種有效的過氧化苯甲酰檢測方法。

1. 過氧化苯甲酰的高效液相色譜法檢測要求

過氧化苯甲酰（BPO）作為一種白色強(qiáng)氧化劑，在面粉生產(chǎn)期間，該物質(zhì)可以殺菌增白，并提高企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。但是過量使用過氧化苯甲酰會影響面粉中的相關(guān)營養(yǎng)物質(zhì)，如胡蘿卜素、維生素等，最終引發(fā)食品安全問題。我國在《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中，對過氧化苯甲酰的添加量等作出詳細(xì)規(guī)定，要求最大使用量為60mg/kg，并且需要進(jìn)行詳細(xì)檢測。

高效液相色譜法（HPLC）是目前檢測物質(zhì)含量的有效方法，滿足過氧化苯甲酰的檢測要求，該方法的關(guān)鍵是以液體為流動相，通過高壓輸液系統(tǒng)，在對樣品做分離檢測后，能夠在儀器分析的基礎(chǔ)上，快速檢測食品中相關(guān)物質(zhì)的含量。該技術(shù)的基本技術(shù)路徑為：先用甲醇提取過氧化苯甲酰之后，再通過碘化鉀處理氧化苯甲酰，最后用高效液相色譜柱分離測量。

2. 實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行檢測。

2.1 材料與方法

2.1.1 試劑

本次實(shí)驗(yàn)中所使用的試劑包括乙酸銨緩沖溶液0.02mol/L、色譜級甲醇（天津市永大化學(xué)試劑有限公司）、碘化鉀：50%水溶液（西隴化工股份有限公司）、標(biāo)準(zhǔn)的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.1.2 主要設(shè)備與色譜條件

LC-20AT液相色譜儀：具有二極管陣列檢測器，生產(chǎn)單位為日本島津公司；紫外檢測器、旋渦混合器以及C18柱（規(guī)格為250×4.6mm，5μm）；流動相組成包括：甲醇與水（含0.02mol/L乙酸銨）（稱取乙酸銨1.54g用水溶解并稀釋至1L，混勻后用0.45μm的濾膜過濾后使用。天津市申泰化學(xué)試劑有限公司），兩者之間的配比為10：90；流速：1.0mL/min，波長230nm，柱溫：30℃，進(jìn)樣量：10μL。

2.2 樣本處理

選擇本地區(qū)面粉企業(yè)生產(chǎn)的小麥粉，在樣本處理中，稱取5g樣本并置入50mL具塞比色管中，加10.0mL甲醇，在旋渦混合器上混勻1min，靜置5min，加50%碘化鉀水溶液2.0mL，在旋渦混合器上混勻1min，放置10min。加水至50.0mL，混勻，靜置，吸取上層清液通過0.22μm濾膜，濾液置于樣品瓶中備用。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)儲備液制作

取1mL濃度1000μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液定容至100mL，獲得標(biāo)準(zhǔn)儲備液10μg/mL。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)使用液

用甲醇將過氧化苯甲酰儲備液稀釋，分別獲得0、0.25、0.5、1.0、2.5、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液；稱取5g不含苯甲酸與過氧化苯甲酰小面粉6份，分別放置在50mL具塞比色管中，并添加上述標(biāo)準(zhǔn)溶液10mL，使標(biāo)準(zhǔn)液的最終濃度達(dá)到0μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/ mL；依次選取不同濃度的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)液，添加至液相色譜儀中。本次實(shí)驗(yàn)中，以苯甲酸濃度為橫坐標(biāo)、以苯甲酸峰面積為縱坐標(biāo)，形成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5 計算方法

本次實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)公式（1）進(jìn)行數(shù)據(jù)計算，基本內(nèi)容包括：

在公式（1）中，D代表過氧化苯甲酰含量，單位為“g/Kg”；V為試樣提取液的體積，單位為“mL”；c為苯甲酸濃度，單位為“μg/mL”；m為樣本的質(zhì)量，單位為“g”。

3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

3.1 線性試驗(yàn)結(jié)果

在按照上述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析之后，根據(jù)方法儀器條件將樣本注入液相色譜儀，并繪制相應(yīng)的圖像，最終結(jié)果顯示，溶液濃度0.05μg/mL時的峰面積為2536，0.1μg/mL為4224、0.2μg/mL為7095，0.5μg/mL時峰面積為15907，1.0μg/mL時為31664。

3.2 精密度實(shí)驗(yàn)

在精密度實(shí)驗(yàn)中，取0.5μg/mL標(biāo)準(zhǔn)液連續(xù)做6次測量，獲得測量結(jié)果，具體資料如表1所示。

3.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

在穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)期間，分別選擇0.2μg/mL和0.5μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行第一次測量；在間隔24小時后做回測，分別測量兩次峰面積的誤差，作為評價穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的最終數(shù)據(jù)，詳細(xì)內(nèi)容如表2所示。

3.4 檢出限

在檢出限處理中，通過向空白樣本中添加10μg/mL的過氧化苯甲酰標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.25mL，做上機(jī)檢測；檢測結(jié)果顯示，當(dāng)進(jìn)樣量為10μL時，過氧化苯甲酰標(biāo)準(zhǔn)品峰信噪比大于3∶1；同時本次研究液相色譜儀檢測限小于方法檢出限0.5mg/Kg，最終認(rèn)為該方法滿足實(shí)驗(yàn)室檢測要求。

結(jié)束語：

在面粉過氧化苯甲酰檢測中，采用高效液相色譜法具有可行性，本次實(shí)驗(yàn)中的相關(guān)技術(shù)方案滿足實(shí)驗(yàn)室檢測要求，是一種科學(xué)的檢測方法，值得推廣。