中藥材鑒定新技術(shù)新方法研究

宗延波

【摘要】 中藥材鑒定技術(shù)正朝著系統(tǒng)化、通用化、標(biāo)準(zhǔn)化、信息化、精細(xì)化的方向不斷發(fā)展，各種鑒定技術(shù)也獲得廣泛應(yīng)用，本文詳細(xì)介紹了光譜法、分子生物技術(shù)、色譜法等前沿科學(xué)技術(shù)方法在中藥材鑒定領(lǐng)域的技術(shù)應(yīng)用，希望能夠促進(jìn)中藥現(xiàn)代化事業(yè)蓬勃發(fā)展，滿足中藥研究領(lǐng)域的現(xiàn)代化需求。

【關(guān)鍵詞】 中藥材鑒定;新技術(shù);新方法

【中圖分類號(hào)】 R969.4?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1005-0019（2020）12-112-01

前言

中藥材原材料大部分來(lái)自于自然界的動(dòng)植物，原材料成分品種復(fù)雜，藥效差異極大，因此對(duì)中藥材的鑒定工作十分重要，是保障中藥治療效果的前提條件，通常情況對(duì)中藥材的鑒定常用來(lái)源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理論鑒定等方法進(jìn)行，而隨著不同領(lǐng)域之間的交叉影響，計(jì)算機(jī)技術(shù)、生物新技術(shù)對(duì)中藥材鑒定領(lǐng)域的影響的不斷加深，生成發(fā)展了很多的新技術(shù)，推進(jìn)了中藥材鑒定技術(shù)的不斷發(fā)展。本文對(duì)近些年來(lái)新出現(xiàn)的中藥材鑒定技術(shù)方法此做了詳細(xì)介紹和分析。

1 光譜法

如今的對(duì)光譜法應(yīng)用極為普遍，而光譜法又可以細(xì)分為：紫外分光光譜法、可見(jiàn)分光光度法、原子吸收分光光度法、紅外分光光度法等。而最近幾年，經(jīng)常應(yīng)用的光譜法則有：中紅外光譜法（MIR）、質(zhì)譜法（MS）、近紅外光譜法（NIR）和X射線衍射法（XRD）等。

NIR的光譜譜區(qū)范圍在780nm-2526nm之間，NIR法對(duì)檢測(cè)物測(cè)定迅速且無(wú)損傷，通常對(duì)藥材的原料藥和固體樣本進(jìn)行檢測(cè)分析，其方法優(yōu)點(diǎn)有：鑒別速度快、鑒別效率高、鑒別無(wú)損傷、重現(xiàn)性好等。所以自上世紀(jì)70年代開(kāi)始，NTR法在中藥材檢測(cè)鑒定領(lǐng)域逐漸被廣泛使用。但NTR法的應(yīng)用對(duì)樣品也有一定要求，要建立穩(wěn)健良好的近紅外模型要求必須有數(shù)量足夠多且代表性強(qiáng)分布均勻的樣本作為參考，這是基本前提[1]。

MIR在中藥材鑒定方面由于其指紋區(qū)強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)的得到極大的應(yīng)用。其優(yōu)勢(shì)在于：1.可以整體反應(yīng)受檢測(cè)中藥材樣品的化學(xué)信息[2];2.和其他附件技術(shù)整合使用，能夠快速對(duì)樣品進(jìn)行鑒別，且不需要經(jīng)過(guò)分離提取等預(yù)先處理過(guò)程;3.操作簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，但許多近緣中藥材品種在圖譜特征上變化稍小，因此對(duì)MIR應(yīng)用一定局限性[3]。

XRD是使用X射線對(duì)晶粒的形狀大小進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)，且不污染受測(cè)樣品，其測(cè)量精度非常高，還能準(zhǔn)確反應(yīng)晶體大量的相關(guān)信息。XRD主要運(yùn)用于對(duì)礦物類中藥材的檢測(cè)鑒定。據(jù)相關(guān)研究表明，XRD可以用于對(duì)爐甘石化學(xué)成分含量的鑒定檢測(cè)，通過(guò)檢測(cè)受鑒定爐甘石樣品中的主要化學(xué)成分ZnCO3 或ZnO的含量，來(lái)鑒別受檢測(cè)爐甘石樣品的真?zhèn)巍?/p>

2 色譜法

在中藥材鑒定領(lǐng)域當(dāng)中對(duì)色譜法的運(yùn)用范圍較一般方法廣，依據(jù)流動(dòng)相和固定相的分子聚集狀態(tài)和操作形式將色譜法又細(xì)化為：薄層色譜法（TLC）、氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）、紙色譜法和柱色譜法等。而最近幾年，包含在色譜法當(dāng)中的新中藥材鑒定方法如：蛋白電泳色譜法、指紋圖譜法等也開(kāi)始逐漸推廣使用。

蛋白電泳色譜法廣泛適用于對(duì)蛋白質(zhì)、氨基酸類成分的鑒定與分析，中藥材大多含有蛋白質(zhì)及氨基酸，尤其是果實(shí)種子類中藥材，如桃仁、杏仁等，以及動(dòng)物類藥材，如壁虎、烏梢蛇等。目前該方法已經(jīng)用于對(duì)西洋參、人參及其偽品的鑒定。

首先介紹蛋白電泳色譜法，很多中藥材中含有蛋白質(zhì)和氨基酸，譬如植物類中藥材，如桃仁、杏仁等，然后是動(dòng)物類中藥材，如壁虎、烏梢蛇等，而蛋白電泳色譜法正是適用于對(duì)蛋白質(zhì)和氨基酸類成分的檢測(cè)，其適用范圍非常廣，就新階段成果表明，該方法能夠準(zhǔn)確鑒別西洋參、人參的真?zhèn)巍?/p>

然后是指紋圖譜法，HPLC指紋圖譜法是當(dāng)下使用率最高的指紋圖譜分析方法，現(xiàn)在最新使用的指紋圖譜方法借助了液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS）、氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）等新技術(shù)。高效的分離能力和可以準(zhǔn)確定性分析受檢測(cè)中藥材的小分子化學(xué)成分是HPLC 指紋圖譜鑒定法的優(yōu)點(diǎn)亮點(diǎn)，而缺點(diǎn)是其通用性較差，HPLC指紋圖譜反所應(yīng)出的的化學(xué)信息相當(dāng)精細(xì)，在給中藥材進(jìn)行鑒定檢測(cè)時(shí)需要較大的樣本量來(lái)總結(jié)物種之間的共性特征[4]。

3 分子生物技術(shù)

在中藥材鑒定領(lǐng)域，分子生物技術(shù)類的中藥材鑒定方法當(dāng)中，最新的正在運(yùn)用的方法技術(shù)手段有：細(xì)胞生物學(xué)鑒定法、生物效價(jià)測(cè)定法、mRNA差異顯示鑒定法、DNA 條形碼鑒定技術(shù)和PCR分子鑒定技術(shù)等。下文是對(duì)其中DNA條形碼鑒定技術(shù)的詳細(xì)介紹。

首先是DNA條形碼鑒定技術(shù)，其作為分子生物學(xué)鑒定技術(shù)當(dāng)中較為成熟的一種，核心原理是采用較短而又標(biāo)準(zhǔn)化的 DNA 序列作為條形碼，實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥材快速而又準(zhǔn)確的鑒定[5]。例如某個(gè)研究，選用了992個(gè)藥用植物樣本作為研究對(duì)象，將其中的7項(xiàng)遴選的DNA條形碼序列進(jìn)行高質(zhì)量篩選，組建了以ITS2與trn H-psb A為根基的大型中藥DNA條形碼鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)。

然后在2010年版的《中國(guó)藥典》（第三增補(bǔ)本）當(dāng)中收錄了關(guān)于中藥材DNA條形碼分子鑒定技術(shù)的指導(dǎo)原則，DNA條形碼鑒定技術(shù)在中藥材基原鑒定方面擁有著良好的運(yùn)用前景。此外張彩云等人[5]的研究結(jié)果顯示，DNA條形碼鑒定技術(shù)可以對(duì)道地藥材的藥用品質(zhì)進(jìn)行鑒別，因?yàn)橥N中藥材因產(chǎn)地原因而造成的品質(zhì)差異，會(huì)在不同居群間的遺傳特征上反映出來(lái)。

結(jié)束語(yǔ)

隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)當(dāng)中明星學(xué)科（計(jì)算機(jī)科學(xué)、物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)）的不斷深入發(fā)展，科學(xué)技術(shù)之間一些錯(cuò)誤的屏障正在被打破，在各個(gè)學(xué)科和中藥材鑒定技術(shù)的不斷借鑒和結(jié)合的過(guò)程當(dāng)中，誕生了諸如光譜法、色譜法、顯微測(cè)定法、鑒定法和細(xì)胞生物技術(shù)等運(yùn)用范圍廣泛應(yīng)用效果良好的新技術(shù)新方法。使得中藥材的鑒定正在朝著精細(xì)化、準(zhǔn)確化、科學(xué)化、前沿化的方向發(fā)展，其正在促使中藥鑒定不斷地優(yōu)化和發(fā)生變革，使得系統(tǒng)化、信息化成為現(xiàn)代中藥材鑒定技術(shù)未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)，而隨著系統(tǒng)生物學(xué)、基因組學(xué)和代謝組學(xué)等現(xiàn)代生物技術(shù)科學(xué)技術(shù)理論不斷運(yùn)用到中藥材現(xiàn)代鑒定領(lǐng)域，將會(huì)推動(dòng)不斷中醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展進(jìn)程。

參考文獻(xiàn)

[1]孫得淼，王欣然，王京昆，等.中藥材鑒定方法概述 [J]. 中南藥學(xué)，2017，15（4）：487-491.

[2]龔海燕，羅曉，雷敬衛(wèi)，等 .不同產(chǎn)地金銀花中紅外光譜分析 [J]. 中醫(yī)學(xué)報(bào)，2016，31（1）：96-98.

[3]高珊珊.中藥飲片中紅外光譜鑒定的方法研究[D]. 成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2016.

[4]孫揚(yáng)波 . 礦物類中藥爐甘石鑒定方法的系統(tǒng)研究[D].武漢：湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[5]張彩云，黃珊珊，顏海飛 . DNA 條形碼技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用進(jìn)展 [J]. 中草藥，2017，48（11）：2306-2312.