劉 虹 ,董淑英 ,楊 杰 ,白艷玲
(1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院,山西太原030031;2.忻州市科技發(fā)展戰(zhàn)略研究所,山西忻州034000)
中條山脈位于山西省南部,橫跨臨汾、運(yùn)城、晉城三市,居太行山及華山之間,山勢狹長。山體大體為東西偏東北-西南走向,長約160 km,寬10~15 km。中條山海拔1 200~2 300 m,相對高度800~1 500 m,北坡陡峭,南坡緩傾。中條山素有“山西天然植物園”之美稱,溫度適宜,雨量充沛,自然條件優(yōu)越,是溫帶向亞熱帶過渡的區(qū)域,在華北植物區(qū)系中占有獨(dú)特的地位。中條山是山西植物多樣性最為豐富、樹木種類最多的地區(qū),其中,森林面積為2.47萬hm2,覆蓋率約40%。分布有櫟類為主的落葉闊葉雜木林以及油松林等暖溫性植被,主要樹種有多種櫟樹、樺樹、楊樹、油松、華山松等,并有珍貴的杜仲、黑椋子、獼猴桃和漆樹。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)面積約800 hm2左右保存完好的原始森林,這也是我國西北黃土高原上僅存的一塊原始森林。
2017年10月至2019年8月,筆者在考察山西南部中條山地區(qū)大型有毒蘑菇資源時(shí),分別在櫟樹Quercussp.落枝上和松樹Pinussp.樹樁上采到1份大型膠質(zhì)盤菌樣本和1份大型紅色菌蓋的傘菌樣本。通過形態(tài)學(xué)特征和ITS分子鑒定研究,這2個(gè)物種均為有毒蘑菇物種,且此前在山西沒有記錄[1]。
本研究依據(jù)的子實(shí)體樣本分別于2017年10月和2019年8月采自我國山西省南部中條山脈中段夏縣祁家河一帶的櫟樹Quercussp.地面落枝上和中條山脈東段沁水縣松樹溝一帶的松樹Pinussp.木樁上。本研究所用的照片均為現(xiàn)場拍照。新鮮的子實(shí)體標(biāo)本經(jīng)45℃烘干后保存于山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所標(biāo)本館(HSA)和首都師范大學(xué)標(biāo)本館(BJTC)。
子實(shí)體的宏觀特征觀察在手持放大鏡和體視顯微鏡下進(jìn)行,主要包括子實(shí)體的形狀、大小、顏色等表面特征。子實(shí)體的顯微結(jié)構(gòu)特征觀察在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所實(shí)驗(yàn)室光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行,采用手術(shù)刀進(jìn)行徒手切片,以蒸餾水、3%KOH作為浮載劑制作水封片,用Melzer試劑來檢驗(yàn)盤菌的子囊壁有無淀粉質(zhì)反應(yīng)。
DNA-ITS分子研究在首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,子實(shí)體標(biāo)本參照FAN等[2-3]的方法進(jìn)行DNA提取、PCR以及序列測定。子實(shí)體干標(biāo)本DNA采用CTAB法[4]提取后,擴(kuò)增核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internaltranscribedspacer,ITS)片段,PCR擴(kuò)增引物為ITS1f/ITS4[5],擴(kuò)增條件為:94℃預(yù)變性3 min,94℃變性30 s,53℃退火45 s,72℃延伸1min,35個(gè)循環(huán),最后72℃延伸10min。PCR產(chǎn)物經(jīng)純化和測序獲得的序列經(jīng)手工校對后,采用BLAST工具在NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。
2.1.1 窄孢陀膠盤菌Trichaleurina tenuisporaM.Carbone,Yei Z.Wang&ChengL.Huang(圖 1)子囊果陀螺狀或鼓狀,頂部盤面直徑5~10cm,高4~8cm,子實(shí)層面幼時(shí)灰黃色,后漸漸呈褐色或深褐色,成熟時(shí)黑褐色,平展或有龜裂;囊盤背面(子囊果側(cè)面)褐色或煙褐色,表面有褐色短絨毛;內(nèi)部菌肉強(qiáng)烈膠質(zhì)化,灰色或灰白色;子囊圓柱狀,(410~520)μm×(15~18)μm,內(nèi)含8個(gè)單行排列的子囊孢子;側(cè)絲線狀,無色,薄壁,分隔,與子囊等長,頂部棒狀;子囊孢子無色,(25~25)μm×(9~12)μm,長橢圓形,兩端稍銳,表面有小的疣狀突起。
標(biāo)本研究:山西省夏縣祁家河,櫟樹林Quercusspp.枯枝上,單生或群生,2017年10月26日,黃凱兵 HKB159(FANM0387,BJTC)。
2.1.2 赭紅擬口蘑Tricholomopsis rutilans(Schaeff.)Singer(圖 2)菌蓋初期扁半球形,后漸漸平展,邊緣稍內(nèi)卷,直徑4~12 cm,底色黃褐色到褐色,表面或多或少有紅色的纖維狀鱗片。菌肉淺黃色至黃色,厚3~5 mm。菌褶黃白色、淺黃色或黃色,不等長,密度中等。菌柄圓柱狀,長5~10cm,粗1~2cm,淺黃色至黃色,表面被紅色或粉紅色鱗片。緣生囊狀體棒狀或瓶狀,(50~120)μm×(10~252)μm。擔(dān)孢子橢圓形,(6.0~7.5)μm×(4.0~5.5)μm,光滑,無色。
標(biāo)本研究:山西省沁水縣,松樹Pinussp.木樁上,2019年 8月 23日,劉虹 LH688(HSA688)。
表1 盤菌樣本FANM0387的ITS片段在NCBI上BLAST結(jié)果
形態(tài)學(xué)觀察顯示,F(xiàn)ANM0387標(biāo)本在宏觀和微觀特征方面均與該物種發(fā)表時(shí)的文獻(xiàn)[6]描述完全吻合,結(jié)合ITS片段的BLAST結(jié)果(表1),支持該樣本為Trichaleurina tenuispora。將HSA688標(biāo)本的形態(tài)學(xué)特征與相關(guān)專業(yè)文獻(xiàn)[7-10]比較,結(jié)合DNA分析結(jié)果(表2),該樣本高度符合Tricholomopsis rutilans,為同一物種。
表2 傘菌樣本HSA688的ITS片段在NCBI上BLAST結(jié)果
本研究采用形態(tài)學(xué)方法和ITS分子鑒定方法比對均支持本研究樣本FANM0387為窄孢陀膠盤菌Trichaleurina tenuisporaM.Carbone,Yei Z.Wang&Cheng L.Huang,HSA688為赭紅擬口蘑Tricholomopsis rutilans(Schaeff.)Singer。對山西省和國內(nèi)其他相關(guān)菌物研究文獻(xiàn)分析,沒有發(fā)現(xiàn)這2個(gè)物種在山西分布的記載[1,7-8],在山西屬于新記錄種。
依據(jù)文獻(xiàn)記載[6],窄孢陀膠盤菌與爪哇陀膠盤菌Trichaleurina javanica相似,兩者形態(tài)非常相似,但DNA分子比對分析證實(shí),它們是不同的物種。地理分布上,爪哇陀膠盤菌只分布于熱帶地區(qū)[6,9],而本物種在亞洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)均有分布[6]。山西地處北溫帶地區(qū),窄孢陀膠盤菌在山西的發(fā)現(xiàn)意味著山西南部地區(qū)真菌區(qū)系中有熱帶亞熱帶物種成分。赭紅擬口蘑是北溫帶常見的物種,其特點(diǎn)是子實(shí)體中大型、具有紅色鱗片的菌蓋以及黃色的菌褶。山西的樣本菌褶顏色較淡,多為黃白色,同時(shí)菌蓋的鱗片也較少,但DNA結(jié)果支持為同一個(gè)物種。中條山地區(qū)一些傘菌顏色較其他地區(qū)同一物種的蘑菇顏色較淡的現(xiàn)象還有其他物種,一個(gè)典型的例子是寬孢紅牛肝菌Rubroboletus latisporusKuan Zhao&Z.L.Yang,在其原產(chǎn)地云南省,它的菌蓋幾乎完全是紅色,菌柄基部也有大面積紅色,但是中條山沁水縣的樣本菌蓋僅有少量紅色,菌柄基部紅色也很少,但是DNA序列比對和系統(tǒng)發(fā)育分析均支持(BP=99%)它們是同一個(gè)物種。文獻(xiàn)記載生于木樁上的擬口蘑屬物種此前在山西有華美擬口蘑Ticholomopsis decora(Fr.)Singer[1],分布于呂梁山北部的管涔山一帶云杉朽木上,該物種顏色鮮黃色,菌蓋表面有褐色鱗片,易與赭紅擬口蘑區(qū)別。
據(jù)文獻(xiàn)記載,窄孢陀膠盤菌和赭紅擬口蘑都是有毒蘑菇[10],誤食會(huì)導(dǎo)致胃腸炎型中毒反應(yīng),中毒程度依食用量和個(gè)人體質(zhì)不同會(huì)有不同表現(xiàn)。由于這2種蘑菇個(gè)體均為大型,質(zhì)地感覺為肉膠質(zhì)和肉質(zhì),而且與民間認(rèn)知的毒蘑菇有所不同,因此,有被誤采、誤食的可能性,人們在采食野生蘑菇時(shí)應(yīng)該注意鑒別。