山西毒蘑菇新記錄種：窄孢陀膠盤菌和赭紅擬口蘑

劉 虹 ，董淑英 ，楊 杰 ，白艷玲

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院，山西太原030031；2.忻州市科技發(fā)展戰(zhàn)略研究所，山西忻州034000）

中條山脈位于山西省南部，橫跨臨汾、運(yùn)城、晉城三市，居太行山及華山之間，山勢狹長。山體大體為東西偏東北-西南走向，長約160 km，寬10～15 km。中條山海拔1 200～2 300 m，相對高度800～1 500 m，北坡陡峭，南坡緩傾。中條山素有“山西天然植物園”之美稱，溫度適宜，雨量充沛，自然條件優(yōu)越，是溫帶向亞熱帶過渡的區(qū)域，在華北植物區(qū)系中占有獨(dú)特的地位。中條山是山西植物多樣性最為豐富、樹木種類最多的地區(qū)，其中，森林面積為2.47萬hm2，覆蓋率約40%。分布有櫟類為主的落葉闊葉雜木林以及油松林等暖溫性植被，主要樹種有多種櫟樹、樺樹、楊樹、油松、華山松等，并有珍貴的杜仲、黑椋子、獼猴桃和漆樹。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)面積約800 hm2左右保存完好的原始森林，這也是我國西北黃土高原上僅存的一塊原始森林。

2017年10月至2019年8月，筆者在考察山西南部中條山地區(qū)大型有毒蘑菇資源時(shí)，分別在櫟樹Quercussp.落枝上和松樹Pinussp.樹樁上采到1份大型膠質(zhì)盤菌樣本和1份大型紅色菌蓋的傘菌樣本。通過形態(tài)學(xué)特征和ITS分子鑒定研究，這2個(gè)物種均為有毒蘑菇物種，且此前在山西沒有記錄[1]。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本采集

本研究依據(jù)的子實(shí)體樣本分別于2017年10月和2019年8月采自我國山西省南部中條山脈中段夏縣祁家河一帶的櫟樹Quercussp.地面落枝上和中條山脈東段沁水縣松樹溝一帶的松樹Pinussp.木樁上。本研究所用的照片均為現(xiàn)場拍照。新鮮的子實(shí)體標(biāo)本經(jīng)45℃烘干后保存于山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所標(biāo)本館（HSA）和首都師范大學(xué)標(biāo)本館（BJTC）。

1.2 形態(tài)學(xué)觀察

子實(shí)體的宏觀特征觀察在手持放大鏡和體視顯微鏡下進(jìn)行，主要包括子實(shí)體的形狀、大小、顏色等表面特征。子實(shí)體的顯微結(jié)構(gòu)特征觀察在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所實(shí)驗(yàn)室光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行，采用手術(shù)刀進(jìn)行徒手切片，以蒸餾水、3%KOH作為浮載劑制作水封片，用Melzer試劑來檢驗(yàn)盤菌的子囊壁有無淀粉質(zhì)反應(yīng)。

1.3 DNA-ITS分子鑒定

DNA-ITS分子研究在首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，子實(shí)體標(biāo)本參照FAN等[2-3]的方法進(jìn)行DNA提取、PCR以及序列測定。子實(shí)體干標(biāo)本DNA采用CTAB法[4]提取后，擴(kuò)增核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（Internaltranscribedspacer，ITS）片段，PCR擴(kuò)增引物為ITS1f/ITS4[5]，擴(kuò)增條件為：94℃預(yù)變性3 min，94℃變性30 s，53℃退火45 s，72℃延伸1min，35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10min。PCR產(chǎn)物經(jīng)純化和測序獲得的序列經(jīng)手工校對后，采用BLAST工具在NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)觀察結(jié)果

2.1.1 窄孢陀膠盤菌Trichaleurina tenuisporaM.Carbone，Yei Z.Wang&ChengL.Huang（圖 1）子囊果陀螺狀或鼓狀，頂部盤面直徑5～10cm，高4～8cm，子實(shí)層面幼時(shí)灰黃色，后漸漸呈褐色或深褐色，成熟時(shí)黑褐色，平展或有龜裂；囊盤背面（子囊果側(cè)面）褐色或煙褐色，表面有褐色短絨毛；內(nèi)部菌肉強(qiáng)烈膠質(zhì)化，灰色或灰白色；子囊圓柱狀，（410～520）μm×（15～18）μm，內(nèi)含8個(gè)單行排列的子囊孢子；側(cè)絲線狀，無色，薄壁，分隔，與子囊等長，頂部棒狀；子囊孢子無色，（25～25）μm×（9～12）μm，長橢圓形，兩端稍銳，表面有小的疣狀突起。

標(biāo)本研究：山西省夏縣祁家河，櫟樹林Quercusspp.枯枝上，單生或群生，2017年10月26日，黃凱兵 HKB159（FANM0387，BJTC）。

2.1.2 赭紅擬口蘑Tricholomopsis rutilans（Schaeff.）Singer（圖 2）菌蓋初期扁半球形，后漸漸平展，邊緣稍內(nèi)卷，直徑4～12 cm，底色黃褐色到褐色，表面或多或少有紅色的纖維狀鱗片。菌肉淺黃色至黃色，厚3～5 mm。菌褶黃白色、淺黃色或黃色，不等長，密度中等。菌柄圓柱狀，長5～10cm，粗1～2cm，淺黃色至黃色，表面被紅色或粉紅色鱗片。緣生囊狀體棒狀或瓶狀，（50～120）μm×（10～252）μm。擔(dān)孢子橢圓形，（6.0～7.5）μm×（4.0～5.5）μm，光滑，無色。

標(biāo)本研究：山西省沁水縣，松樹Pinussp.木樁上，2019年 8月 23日，劉虹 LH688（HSA688）。

2.2 DNA-ITS比對結(jié)果

表1 盤菌樣本FANM0387的ITS片段在NCBI上BLAST結(jié)果

形態(tài)學(xué)觀察顯示，F(xiàn)ANM0387標(biāo)本在宏觀和微觀特征方面均與該物種發(fā)表時(shí)的文獻(xiàn)[6]描述完全吻合，結(jié)合ITS片段的BLAST結(jié)果（表1），支持該樣本為Trichaleurina tenuispora。將HSA688標(biāo)本的形態(tài)學(xué)特征與相關(guān)專業(yè)文獻(xiàn)[7-10]比較，結(jié)合DNA分析結(jié)果（表2），該樣本高度符合Tricholomopsis rutilans，為同一物種。

表2 傘菌樣本HSA688的ITS片段在NCBI上BLAST結(jié)果

3 結(jié)論與討論

本研究采用形態(tài)學(xué)方法和ITS分子鑒定方法比對均支持本研究樣本FANM0387為窄孢陀膠盤菌Trichaleurina tenuisporaM.Carbone，Yei Z.Wang&Cheng L.Huang，HSA688為赭紅擬口蘑Tricholomopsis rutilans（Schaeff.）Singer。對山西省和國內(nèi)其他相關(guān)菌物研究文獻(xiàn)分析，沒有發(fā)現(xiàn)這2個(gè)物種在山西分布的記載[1，7-8]，在山西屬于新記錄種。

依據(jù)文獻(xiàn)記載[6]，窄孢陀膠盤菌與爪哇陀膠盤菌Trichaleurina javanica相似，兩者形態(tài)非常相似，但DNA分子比對分析證實(shí)，它們是不同的物種。地理分布上，爪哇陀膠盤菌只分布于熱帶地區(qū)[6，9]，而本物種在亞洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)均有分布[6]。山西地處北溫帶地區(qū)，窄孢陀膠盤菌在山西的發(fā)現(xiàn)意味著山西南部地區(qū)真菌區(qū)系中有熱帶亞熱帶物種成分。赭紅擬口蘑是北溫帶常見的物種，其特點(diǎn)是子實(shí)體中大型、具有紅色鱗片的菌蓋以及黃色的菌褶。山西的樣本菌褶顏色較淡，多為黃白色，同時(shí)菌蓋的鱗片也較少，但DNA結(jié)果支持為同一個(gè)物種。中條山地區(qū)一些傘菌顏色較其他地區(qū)同一物種的蘑菇顏色較淡的現(xiàn)象還有其他物種，一個(gè)典型的例子是寬孢紅牛肝菌Rubroboletus latisporusKuan Zhao&Z.L.Yang，在其原產(chǎn)地云南省，它的菌蓋幾乎完全是紅色，菌柄基部也有大面積紅色，但是中條山沁水縣的樣本菌蓋僅有少量紅色，菌柄基部紅色也很少，但是DNA序列比對和系統(tǒng)發(fā)育分析均支持（BP＝99%）它們是同一個(gè)物種。文獻(xiàn)記載生于木樁上的擬口蘑屬物種此前在山西有華美擬口蘑Ticholomopsis decora（Fr.）Singer[1]，分布于呂梁山北部的管涔山一帶云杉朽木上，該物種顏色鮮黃色，菌蓋表面有褐色鱗片，易與赭紅擬口蘑區(qū)別。

據(jù)文獻(xiàn)記載，窄孢陀膠盤菌和赭紅擬口蘑都是有毒蘑菇[10]，誤食會(huì)導(dǎo)致胃腸炎型中毒反應(yīng)，中毒程度依食用量和個(gè)人體質(zhì)不同會(huì)有不同表現(xiàn)。由于這2種蘑菇個(gè)體均為大型，質(zhì)地感覺為肉膠質(zhì)和肉質(zhì)，而且與民間認(rèn)知的毒蘑菇有所不同，因此，有被誤采、誤食的可能性，人們在采食野生蘑菇時(shí)應(yīng)該注意鑒別。