GeneXpert MTB/RIF分子檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的實(shí)用性

徐紅梅　趙軍

【摘要】目的：探討GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的實(shí)用性。方法：選取2018年4月到2019年10月我院收集的隴南市（八縣一區(qū)）疑似肺結(jié)核的患者標(biāo)本，共183份，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行抗酸染色及結(jié)核分枝桿菌（MTB）培養(yǎng);GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)分子檢測(cè);同時(shí)抽取38份樣本，對(duì)其進(jìn)行Hain（線性探針/芯片）檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行觀察。結(jié)果：肺結(jié)核患者標(biāo)本的陽(yáng)性檢出份數(shù)為157份，檢出率為85.79%;經(jīng)RIF檢測(cè)顯示，共檢測(cè)出14株耐藥株，檢出率為7.65%。結(jié)論：GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中具有較高的實(shí)用性，能夠獲得較高的疾病診斷率。

【關(guān)鍵詞】GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè);肺結(jié)核;診斷價(jià)值

【中圖分類(lèi)號(hào)】R249【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1005-0019（2020）15-070-01

肺結(jié)核是一種常見(jiàn)的慢性感染性疾病，能夠?qū)χT多臟器產(chǎn)生不良累及，臨床中主要依據(jù)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷，包括抗酸染色與MTB培養(yǎng)等方式[1]。然而抗酸染色檢查的過(guò)程較為復(fù)雜，并且陽(yáng)性率較低，同時(shí)MTB培養(yǎng)較易受到感染，并且檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，因而導(dǎo)致肺結(jié)核無(wú)法獲得有效的診斷[2]。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，目前臨床中多使用GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)方式[3]。本研究將探討GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的實(shí)用性。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2018年4月到2019年10月我院收集的隴南市（八縣一區(qū)）疑似肺結(jié)核的患者標(biāo)本，共183份，其中男女各129份與54份，年齡為32-67歲，平均年齡為（45.5±4.9）歲。

1.2肺結(jié)核的診斷標(biāo)準(zhǔn)胸部影像學(xué)檢查符合以下指標(biāo)中至少1項(xiàng)：①結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)反應(yīng)≥15mm或存在丘疹、水泡、雙圈;②存在肺結(jié)核可疑癥狀;③血清抗結(jié)核抗體呈陽(yáng)性。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn)①均為疑似肺結(jié)核;②均獲得家屬的完全同意。

1.4排除標(biāo)準(zhǔn)①無(wú)法積極配合完成檢測(cè);②患有其他呼吸感染性疾病。

1.5方法（1）結(jié)核分枝桿菌（MTB）培養(yǎng)。使用40d/L的NaOH對(duì)183份樣本進(jìn)行處理，之后將其接種至酸性羅氏培養(yǎng)基上，將孵育溫度調(diào)整至35℃，連續(xù)8周每周對(duì)MTB生長(zhǎng)情況進(jìn)行嚴(yán)密管檢查，陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)為酸性羅氏培養(yǎng)基斜面有MTB菌落生長(zhǎng)，否則則為陰性;并按照菌落數(shù)量所占斜面面積多少分為1+、2+、3+、4+。

（2）Hain（線性探針/芯片）檢測(cè)。利用超聲波水浴破壞細(xì)菌，提取DNA;應(yīng)用熱啟動(dòng)Taq酶擴(kuò)增目的DNA片段;將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與試紙條上固定的探針進(jìn)行雜交顯色;利用酶顯色反應(yīng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀。以羅氏培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)作為“金標(biāo)準(zhǔn)”，檢測(cè)HAIN技術(shù)下藥物的耐藥程度、敏感程度分別計(jì)算其敏感度、特異度。

（3）GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)分子檢測(cè)。分別抽取183份樣本的1ml痰樣本，使用GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)分子進(jìn)行檢測(cè)，2h后觀察檢測(cè)結(jié)果。將MTBDNA拷貝的高低分為高、中、低、極低與未檢出5個(gè)量級(jí)作為MTB數(shù)量，將利福平檢測(cè)結(jié)果作為耐藥檢測(cè)結(jié)果。

1.6觀察指標(biāo)

Hain檢測(cè)與GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)分子檢測(cè)結(jié)果。

2結(jié)果

Hain檢測(cè)與GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)分子檢測(cè)結(jié)果

肺結(jié)核患者標(biāo)本的陽(yáng)性檢出份數(shù)為157份，檢出率為85.79%;經(jīng)RIF檢測(cè)顯示，共檢測(cè)出14株耐藥株，檢出率為7.65%;經(jīng)Hain檢測(cè)顯示，有2份未檢出，而GeneXpert全部檢出。

3討論

肺結(jié)核是一種十分常見(jiàn)的臨床疾病，由于其病情較長(zhǎng)，病情較重，因而若能夠在患病早期并予以及時(shí)正確的診斷，能夠在較大程度上控制該疾病的傳播，并且能夠及時(shí)為患者提供良好的治療，進(jìn)而提升其健康水平。目前臨床中主要將細(xì)菌學(xué)檢查作為診斷該疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，主要分為痰涂片與培養(yǎng)等方式;然而對(duì)于痰涂片方式而言，其檢驗(yàn)質(zhì)量在較大程度上取決于標(biāo)本質(zhì)量，同時(shí)無(wú)法獲得較高的陽(yáng)性檢出率;對(duì)于培養(yǎng)方式而言，由于需要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行5-8周的培養(yǎng)，因此使得檢測(cè)時(shí)間明顯滯后[4]。因此為獲得較高的陽(yáng)性檢出率，則需要使用一種更加有效的方式進(jìn)行檢測(cè)。

GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)是近年來(lái)新興的一種檢測(cè)方式。該種檢測(cè)技術(shù)主要是以半巢式實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)，并且對(duì)PCR檢測(cè)步驟進(jìn)行了良好的整合，從而完全實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化的檢測(cè)目標(biāo)，并且整個(gè)檢測(cè)全過(guò)程不超過(guò)2h便可完成。該種檢測(cè)技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)較短、較高的敏感度與特異度的特點(diǎn)，無(wú)需對(duì)患者造成不良任何不良損傷，因而具有較高的安全性;并且作為集MTB檢測(cè)與MTB利福平耐藥檢測(cè)于一體的新型檢測(cè)技術(shù)，因而具有較高的檢出率與較大的應(yīng)用價(jià)值[5]。依據(jù)本研究的檢測(cè)結(jié)果顯示，采用GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)技術(shù)后，陽(yáng)性檢出率高達(dá)85.79%，并且經(jīng)RIF檢測(cè)顯示，耐藥株的檢出率為7.65%;經(jīng)Hain檢測(cè)顯示，有2份未檢出，而GeneXpert全部檢出。這足以說(shuō)明GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)技術(shù)具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，本研究認(rèn)為GeneXpertMTB/RIF分子檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中具有較高的實(shí)用性，能夠獲得較高的疾病診斷率，可作為肺結(jié)核診斷的首選檢測(cè)方式。然而通過(guò)相關(guān)臨床研究顯示，GeneXpertMTB/RIF雖然對(duì)涂陽(yáng)培陽(yáng)的樣本陽(yáng)性檢出率較高但對(duì)涂陰培陰的檢出率仍較低，因此仍按需要加強(qiáng)對(duì)該種方式的研究。

參考文獻(xiàn)

[1]陳子芳，孫義軍，孫本海，etal.GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)在肺結(jié)核診斷及利福平耐藥檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值[J].中華臨床感染病雜志，2014，7（4）：351-353.

[2]陳子芳，孫本海，霍麗麗，王建，陳琦.GeneXpertMTB/RIF技術(shù)在結(jié)核性胸膜炎診斷及利福平耐藥檢測(cè)中的價(jià)值[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2017，27（06）：819-821.

[3]田斌，王孝君，文嵐，郭彥昌.XpertMTB/RIF檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)肺結(jié)核臨床診斷病例的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)，2016，32（09）：798-801.

[4]張青，薛冰茹，李克誠(chéng).GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2016，31（07）：599-602.

[5]牛海軍，王歌，李明虎.GeneXpertMTB/RIF檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的價(jià)值評(píng)估[J].中國(guó)防癆雜志，2017，39（8）：829-832.