鐘衛(wèi)華，梁生林

截葉鐵掃帚提取物促胃腸動(dòng)力作用初探

鐘衛(wèi)華1，*梁生林2

（1．井岡山大學(xué)附屬醫(yī)院，江西，吉安 343000；2．井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部，江西，吉安 343000）

初步探究截葉鐵掃帚水提物和醇提物對(duì)腸胃向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能的影響。采用整體腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)及胃排空實(shí)驗(yàn)法以及離體腸實(shí)驗(yàn)法，研究截葉鐵掃帚水提物和醇提物對(duì)腸胃運(yùn)動(dòng)功能的影響。與蒸餾水組相比較，截葉鐵掃帚水提物和醇提物高、低劑量（10.0、5.0 g生藥/kg）組均使胃內(nèi)容物殘留率降低顯著（< 0.01），小腸推進(jìn)率明顯提高（< 0.05，< 0.01）；截葉鐵掃帚水提物高劑量與相同劑量醇提物相比，在胃內(nèi)容物殘留率的降低和小腸推進(jìn)率的提高兩方面具有顯著差異（< 0.05）。在離體實(shí)驗(yàn)中，與給藥前比較，截葉鐵掃帚水提物給藥后的回腸管收縮幅度和收縮活動(dòng)力顯著強(qiáng)于給藥前（< 0.01）；截葉鐵掃帚醇提物給藥后回腸管收縮幅度也明顯比給藥前強(qiáng)（< 0.05）；從家兔離體回腸收縮幅度、收縮活動(dòng)力比較，截葉鐵掃帚水提物顯著比醇提物強(qiáng)（< 0.01）。截葉鐵掃帚水提物和醇提物具有促進(jìn)腸胃運(yùn)動(dòng)的作用，且水提物比醇提物強(qiáng)。

截葉鐵掃帚；水提物和醇提物；胃腸運(yùn)動(dòng)

截葉鐵掃帚(Dum. –Cours.) G. Don為豆科胡枝子屬植物，以根及全株入藥。其性平、味甘、微苦，具有消食除積的功效?？捎糜诠δ苄韵涣肌⑿吼岱e等的治療[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明截葉鐵掃帚具有保肝[2]、抗炎[3]、抗氧化[4-5]等多種生物活性。但有關(guān)截葉鐵掃帚胃腸促動(dòng)作用的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本次實(shí)驗(yàn)研究采用整體腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空實(shí)驗(yàn)法，以及離體回腸管實(shí)驗(yàn)法，初步探究截葉鐵掃帚水提物和醇提物對(duì)腸胃向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響，并對(duì)截葉鐵掃帚的水提物和醇提物作用強(qiáng)弱進(jìn)行比較，其目的是為截葉鐵掃帚在腸胃向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)方面的開(kāi)發(fā)和臨床上的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 藥物

截葉鐵掃帚采于江西吉安，由井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)教研室周秋貴副教授鑒定為豆科胡枝子屬植物截葉鐵掃帚(Dum. –Cours.) G. Don的全草；莫沙必利片，成都康弘藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，規(guī)格5 mg/片，批號(hào)111102。

1.2 動(dòng)物

72只清潔級(jí)昆明種小鼠，體質(zhì)量20g左右，雌雄各半；2.5 kg左右家兔6只，雌雄均可，均由南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào) SCXK (贛) 2014-0005。

1.3 儀器

RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；JA2003N 電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；RM6240微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，張力換能器及微調(diào)固定器，HSS-1B型恒溫浴槽，麥?zhǔn)显」埽沙啥純x器廠提供。

2 方法

2.1 截葉鐵掃帚提取物的制備

2.1.1 水提物的制備[6]

取干燥切成小段的截葉鐵掃帚300 g，用蒸餾水浸泡30 min，加10倍量蒸餾水（第一次多加2倍量）用文火煎煮3次，第1次1 h，第2、3次各30 min。把3次煎出液合并在一起，靜置去除渣，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮為浸膏狀，貯存?zhèn)溆?。用時(shí)用蒸餾水配制。

2.1.2 醇提物的制備[6]

用回流提取法，將適度粉碎的干燥截葉鐵掃帚300 g，用80%乙醇浸泡24 h，水浴中加熱回流提取3次，每次回流1 h。合并3次提取液，回收乙醇，減壓蒸干，貯存?zhèn)溆?。用時(shí)用蒸餾水配制。

2.2 半固體營(yíng)養(yǎng)糊的制備[7]

取羧甲纖維素鈉5 g，放入裝有125 mL蒸餾水的燒杯中，加熱攪拌溶解后，再分別加入奶粉8 g、糖4 g、淀粉4 g、墨汁2 mL，攪拌均勻。配成150 mL約為150 g黑色半固體營(yíng)養(yǎng)糊狀物。

2.3 截葉鐵掃帚提取物的胃腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)

2.3.1 截葉鐵掃帚提取物對(duì)小鼠小腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空功能的影響[8-9]

將72只雌雄各半小鼠，按雌雄和體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，每組小鼠12只：蒸餾水（10 mL/kg）對(duì)照組，莫沙必利（0.003 g/kg）陽(yáng)性對(duì)照組，截葉鐵掃帚水提物和醇提物高劑量及低劑量（10.0、5.0 g生藥/kg）組。小鼠均灌胃給藥，給藥容積均為0.1 mL/10 g，1天1次，連續(xù)給藥5 d。第4天灌胃給藥后將小鼠禁食但可自由飲水24 h，末次給藥后1 h，每只小鼠均用0.5 mL半固體營(yíng)養(yǎng)糊灌服。15 min后把小鼠頸椎拉脫致死，剪開(kāi)腹腔，用細(xì)線在胃賁門(mén)和幽門(mén)處分別結(jié)扎，迅速?gòu)馁S門(mén)處至回腸末端分離胃腸，輕輕剝離腸系膜后，在不過(guò)度用力牽拉的情況下將胃腸鋪直于白色實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用卷尺測(cè)量幽門(mén)到黑色半固體糊前沿的距離和幽門(mén)到回盲部的小腸全長(zhǎng)，計(jì)算小腸向下推進(jìn)率。再剪下胃，輕輕用濾紙把胃拭干后稱重為全重，然后沿胃大彎縱行剪開(kāi)胃，把胃內(nèi)容物清洗干凈，輕輕用濾紙拭干后稱重為凈重，計(jì)算胃內(nèi)容物殘留率。比較各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有差異。

2.3.2 截葉鐵掃帚提取物對(duì)家兔離體回腸管功能的影響[8-9]

調(diào)節(jié)恒溫浴槽的水溫，使溫度穩(wěn)定在（37 ± 0.1）℃。張力換能器連接于RM6240微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)。用木棒敲擊已禁食不禁水24 h家兔頭部致暈，立即剖開(kāi)腹腔，找到回盲部，從回盲部向上取回腸一段長(zhǎng)10 cm左右，迅速把它放入通有氧氣的冷Tyrode’s液的器皿中。剪去腸系膜和脂肪組織，用10 mL注射器抽取Tyrode’s液把腸管內(nèi)容物沖掉，反復(fù)多次直至洗凈為止。洗凈腸管后將腸管剪成長(zhǎng)2 cm左右的數(shù)段置于通有氧氣的冷Tyrode’s液中備用。取一小段腸管置于盛有Tyrode’s液的培養(yǎng)皿中，在其兩端對(duì)角壁處用手術(shù)縫合針穿線打結(jié)。注意保持腸管通暢，勿使其封閉。一端固定在麥?zhǔn)显」芄潭ㄣ^上，放入裝有20 mL Tyrode’s液的麥?zhǔn)显」苤?，另一端連接于張力換能器上，給予腸管2 g左右的前負(fù)荷。通過(guò)調(diào)節(jié)螺旋閘門(mén)來(lái)調(diào)節(jié)氧氣流量，使麥?zhǔn)显」苤袣馀莅疵棵?~2個(gè)左右逸出為止。等離體回腸管收縮曲線穩(wěn)定平衡0.5 h后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。截葉鐵掃帚水提物和醇提物均采用累積方式給藥，實(shí)驗(yàn)時(shí)先記錄一段正常收縮曲線，然后給藥，每次給藥后記錄回腸管收縮曲線5 min，并按照下式計(jì)算：

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 截葉鐵掃帚提取物對(duì)小鼠小腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空功能的影響

3.1.1 截葉鐵掃帚提取物對(duì)小鼠胃排空功能影響

與蒸餾水組相比較，截葉鐵掃帚水提物和醇提物高、低劑量組、莫沙必利組均使胃內(nèi)容物殘留率較蒸留水組顯著降低（< 0.01）。截葉鐵掃帚水提物高劑量組與相對(duì)應(yīng)劑量醇提物組相比胃內(nèi)容物殘留率明顯降低（<0.05）。截葉鐵掃帚水提物高劑量組與莫沙必利組相比，胃內(nèi)容物殘留率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（> 0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳細(xì)情況見(jiàn)表1。

3.1.2 截葉鐵掃帚提取物對(duì)小鼠小腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響

與蒸餾水組相比較，截葉鐵掃帚水提物和醇提物高、低劑量組均使小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)明顯增強(qiáng)，小腸推進(jìn)率比蒸餾水組明顯增高（< 0.05，< 0.01）。莫沙必利組使小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)顯著增加，小腸推進(jìn)率比蒸餾水組顯著增加（< 0.01）。與相應(yīng)醇提物組比較，截葉鐵掃帚水提物高劑量組小腸推進(jìn)率比醇提物高劑量組明顯增加（< 0.05）。與莫沙必利組相比較，截葉鐵掃帚水提物高劑量組與莫沙必利組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（> 0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳細(xì)情況見(jiàn)表1。

表1 截葉鐵掃帚提取物對(duì)小鼠腸胃向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能的影響（, n=12）

注：與蒸餾水對(duì)照組比較，**< 0.01，*< 0.05；與莫沙必利比較，#> 0.05；水提物與相對(duì)應(yīng)醇提物比較，&< 0.05

3.2 截葉鐵掃帚提取物對(duì)家兔離體空腸管作用

與給藥前相比較，給藥后截葉鐵掃帚水提物使腸管收縮的幅度、收縮活動(dòng)力明顯比給藥前顯著增強(qiáng)（< 0.01）；收縮張力及收縮頻率與給藥前比較無(wú)差異（> 0.05）；截葉鐵掃帚醇提物使腸管收縮的幅度較給藥前明顯增大（< 0.05）；收縮頻率、收縮張力及收縮活動(dòng)力與給藥前相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（> 0.05）。截葉鐵掃帚水提物對(duì)家兔離體回腸收縮幅度、收縮活動(dòng)力較醇提物顯著增高（< 0.01）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 截葉鐵掃帚提取物對(duì)家兔離體回腸平滑肌的影響（, n=6）

注：與給藥前相比較，**< 0.01；水提物與醇提物相比較，&&< 0.01

4 討論

功能性消化不良（Functional Dyspepsia，F(xiàn)D）是臨床常見(jiàn)的胃腸疾病之一，其患病率較高，西方國(guó)家為10%~40%，亞洲國(guó)家為5%~30%[10]；我國(guó)FD的發(fā)病率為18%~45%，占消化科門(mén)診的20%~50%[11]；且FD病情反復(fù)發(fā)作遷延不愈，嚴(yán)重影響了人們的身體健康和生存質(zhì)量。

功能性消化不良，其主要病理變化是胃腸動(dòng)力障礙[12]，胃腸動(dòng)力障礙主要特征為胃腸蠕動(dòng)功能減慢、胃排空延遲[13]，因而促進(jìn)胃排空、腸蠕動(dòng)在功能性消化不良的治療中發(fā)揮重要作用。但是目前臨床上促胃腸動(dòng)力藥物存在療效不佳或副反應(yīng)嚴(yán)重的問(wèn)題[14]，因此尋找和研發(fā)新的促胃腸動(dòng)力藥具有重要意義。

本研究采用整體小鼠腸胃向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)，以及家兔離體的回腸實(shí)驗(yàn)初步探究截葉鐵掃帚水提物和醇提物對(duì)腸胃運(yùn)動(dòng)功能的影響。

小鼠胃排空實(shí)驗(yàn)是根據(jù)胃排空的原理，給小鼠灌服一定量的營(yíng)養(yǎng)性半固體糊，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后，稱重胃中殘留的半固體糊，以半固體糊在胃內(nèi)殘留率為指標(biāo)，觀察所用藥物對(duì)小鼠胃排空運(yùn)動(dòng)功能的影響。加入墨汁到半固體糊中作為指示物，可同時(shí)觀察所用藥物對(duì)小鼠小腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能的影響[7]。本實(shí)驗(yàn)截葉鐵掃帚水提物和醇提物灌胃給藥均能使小鼠胃內(nèi)容物殘留率顯著減少，小腸推進(jìn)率明顯增加，表明截葉鐵掃帚水提物和醇提物均具有明顯促進(jìn)整體小鼠腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明，截葉鐵掃帚水提物促進(jìn)腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空的作用明顯較醇提物強(qiáng)。

胃腸平滑肌離體時(shí)，在適當(dāng)?shù)臏囟?、給氧和適宜的營(yíng)養(yǎng)液中，可呈現(xiàn)出自發(fā)性的收縮活動(dòng)。離體平滑肌實(shí)驗(yàn)條件比較容易控制，操作也較簡(jiǎn)便，為藥物初篩的常用方法[7]。本實(shí)驗(yàn)截葉鐵掃帚水提物能顯著增加家兔離體回腸管收縮幅度、增強(qiáng)收縮活動(dòng)力，醇提物明顯增加腸管收縮的幅度，這表明截葉鐵掃帚水提物和醇提物均具有促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)功能的作用。截葉鐵掃帚水提物對(duì)家兔離體回腸管的收縮幅度、收縮活動(dòng)力顯著高于醇提物。

綜上所述，本研究采用了整體小鼠腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)及胃排空實(shí)驗(yàn)和離體家兔腸實(shí)驗(yàn)來(lái)研究截葉鐵掃帚提取物對(duì)腸胃運(yùn)動(dòng)功能的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，截葉鐵掃帚水提物和醇提物均具有明顯促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)的作用，且水提物作用強(qiáng)于醇提物。有研究報(bào)道[15]，截葉鐵掃帚含有黃酮類、酚酸類、木脂素類、甾體類、萜類等化合物，尤其是酚酸類化合物，極性較多。而實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)截葉鐵掃帚水提物促胃腸運(yùn)動(dòng)作用比醇提物強(qiáng)，這可能與其水提物中更多含有某種水溶性化合物有關(guān)，其促胃腸運(yùn)動(dòng)成分很可能是上述類型中含有酚羥基、羧基等極性基團(tuán)的水溶性化學(xué)成分。下一步研究需要明確其促進(jìn)腸向下推進(jìn)運(yùn)動(dòng)和胃排空的有效部位、活性成分及作用機(jī)制，對(duì)進(jìn)行其深入的研究，有望今后研制開(kāi)發(fā)出治療功能性消化不良的新藥。

[1] 《全國(guó)中草藥匯編》編寫(xiě)組. 全國(guó)中草藥匯編（上冊(cè)）[M]. 2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996: 723-724.

[2] Kim S M, Kang K, Jho E H, et al. Hepatoprotective effect of flavonoid glycosides from Lespedeza cuneata against oxidative stress induced by tert-butyl hyperoxide[J]. Phytotherapy Research, 2011, 25 (7): 1011-1017．

[3] Zhou J, Li CJ, Yang J Z, et al. Phenylpropanoid and lignan glycosides from the aerial parts of Lespedeza cuneata[J]. Phytochemistry, 2016, 121: 58-64.

[4] Lee HJ, Lim GN, Park MA, et al. Antibacterial and antioxidative activity of Lespedeza cuneata G． Don extracts[J]. Kor J Microb Bio, 2011, 39(1): 63-69.

[5] 朱曉勤,鄭孟蘇,鄒秀紅,等. 截葉鐵掃帚不同藥用部位提取物體外抗氧化活性研究[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2012, 23(1): 166-168.

[6] 鐘衛(wèi)華,梁生林. 大葉胡枝子根皮提取物抗炎鎮(zhèn)痛作用研究[J]. 井岡山大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2019,40(1): 82-87.

[7] 陳奇. 中藥藥理研究方法學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2006: 429-438.

[8] 李正紅,梁生林,鐘興華. 葎草提取物胃腸促動(dòng)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 井岡山大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 2016, 37(6): 83-88.

[9] 羅輝,陳博,梁生林. 雞屎藤水提液促胃腸動(dòng)力作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 井岡山大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 2019, 40(3): 89-93.

[10] Mahadeva S, Ford A C. Clinical and epidemiological differences in functionaldyspepsia between the East and the West[J]. Neurogastroenterology & Motility, 2016, 28(2): 167-174.

[11] 陳灝珠,林果為,石吉耀. 實(shí)用內(nèi)科學(xué)[M]. 14版. 北京:人民衛(wèi)生出版社, 2013: 1938.

[12] 稅典奎,謝勝. 胃腸動(dòng)力障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)及診治進(jìn)展[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2013, 21(1):47-51.

[13] 仝甲釗,曲波,王蓓蓓,等. 功能性消化不良的發(fā)病機(jī)制[J]. 世界華人消化雜志, 2013, 21 (9): 785-790.

[14] Quigley EMM. Prokinetics in the Management of Functional Gastrointestinal Disorders [J]. J Neurogastroenterol Motil, 2017, 53(19): 593-599

[15] 周健,張創(chuàng)峰,呂燕妮,等. 截葉鐵掃帚化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2017, 23(1): 228-234

PRELIMINARY STUDY ON GASTROINTESTINAL MOTILITY OFEXTRACT

ZHONG Wei-hua1,*LIANG Sheng-lin2

(1. Affiliated Hospital of Jinggangshan University, Ji′an Jiangxi 343000, China; 2. Health Science Center, Jinggangshan University, Ji′an Jiangxi 343009, China)

To explore gastrointestinal motility of the water extract and alcohol extract from.The intestinal downward propulsion motor, gastric emptying experimental methods were used in investigating the influence of the stomach, bowel movement function of the water extract and alcohol extract from.Compared with the distilled water group, high- and low-dose (10.0, 5.0 g/kg) groups of the water and alcohol extract obviously decreased gastric content residual rates (< 0.01), and obviously increased the intestinal downward propulsion rates in mice (< 0.05,< 0.01 ). Compared with the same dose of alcohol extract, high-dose water extract obviously decreased the gastric content residual rates and increased the intestinal downward propulsion rates (< 0.05). In vitro experiments, after the administration of water extract, the contraction amplitude and activity of the isolated ileum increased significantly in rabbits (< 0.01); after the administration of alcohol extract, the contraction amplitude of the isolated ileum increased obviously in rabbits(< 0.05). The water extract had stronger effects than alcohol extract (< 0.01), based on the comparison of the contraction amplitude and activity of the isolated ileum in rabbits.The water extract and alcohol extract fromhad obvious effects on promoting gastrointestinal motility, and the water extract has stronger effects than the alcohol extract.

; water extract and alcohol extract; gastrointestinal movement

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674-8085.2020.05.014

1674-8085(2020)05-0078-05

2020-03-06；

2020-05-17

國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題子課題項(xiàng)目(2012BAC11B02-6)；全國(guó)中藥資源普查項(xiàng)目(財(cái)社[2018]43號(hào))

鐘衛(wèi)華(1976-)，女，江西吉安人，副主任醫(yī)師，主要從事B超臨床工作(E-mail: 269568714@qq.com);

*梁生林(1962-)，男，江西吉安縣人，教授，主要從事中草藥藥理及毒理研究(E-mail: slliang1962@163.com).