韓安棣 陳維增
(蒼南縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 浙江 溫州 325800)
B 群鏈球菌(Group B Streptococcus,GBS)又名無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae),是一種正常寄生于女性泌尿生殖道和人類腸道的革蘭陽性球菌,為條件致病菌。GBS 的定值攜帶給孕產(chǎn)婦和新生兒健康帶來極大潛在危害,是一種可引起孕產(chǎn)婦和新生兒感染的病原菌,易造成孕產(chǎn)婦的產(chǎn)褥期感染、早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎膜早破[1]等。疾病的發(fā)生以及導(dǎo)致新生兒敗血癥、肺炎、腦膜炎[2,3]等即使治愈,也可能遺留長期病理狀態(tài)如耳聾、視力受損、發(fā)育障礙及腦癱等嚴(yán)重后果。據(jù)報(bào)道研究,GBS 在孕產(chǎn)婦的定值率在世界不同國家、不同地區(qū)差異較大,從3%~35%不等[4,5],通過此次調(diào)查研究,分析孕產(chǎn)婦B 群鏈球菌定值情況,形成地區(qū)性的GBS 流行病學(xué)和病原學(xué)特征,對臨床防治圍產(chǎn)期感染提供證據(jù)支持,提高預(yù)防效率,節(jié)省資源,同時(shí)減少大量不必要的抗生素使用,保護(hù)婦幼健康。
選擇2019 年1—11 月在蒼南縣人民醫(yī)院就診的孕晚期產(chǎn)婦(35 ~37 周)2830 例,并且自愿進(jìn)行直腸和陰道的GBS 定值篩查,留取陰道拭子和肛拭子標(biāo)本各一份,總計(jì)5660份標(biāo)本,即時(shí)送檢。
法國梅里埃公司的VITEK MS 質(zhì)譜儀及配套試劑和耗材,VITEK 2 compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀及配套GP 鑒定卡,法國梅里埃公司的電子比濁儀,美國Thermo Scientific 二氧化碳培養(yǎng)箱,質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC8739、肺炎鏈球菌ATCC49619 和金黃色葡萄球菌ATCC25923,chromID Strepto B 培養(yǎng)基。
采集陰道拭子和直腸拭子兩個(gè)標(biāo)本,先用無菌拭子深入陰道下1/3 深部(不使用陰道窺器),取得孕產(chǎn)婦陰道分泌物拭子,再將另外無菌拭子插入肛門,在肛門括約肌上2 ~3cm 處輕輕旋轉(zhuǎn)取得直腸分泌物拭子,1 小時(shí)內(nèi)送檢進(jìn)行培養(yǎng),嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的方法進(jìn)行分離培養(yǎng),兩根拭子直接接種GBS 顯色培養(yǎng)基于35℃ 5% CO2孵育18 ~24h 后觀察培養(yǎng)結(jié)果。
挑取培養(yǎng)基上淺粉至紅色菌落進(jìn)行鑒定,選用國梅里埃公司的VITEK MS 質(zhì)譜儀和VITEK 2 compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀嚴(yán)格按照儀器和試劑說明書步驟上機(jī)鑒定,兩種方式鑒定均是目前較常用且可靠的鑒定方法,鑒定率99.9%,結(jié)果為Streptococcus agalactiae 均是目標(biāo)菌B 群鏈球菌。
chromID Strepto B 培養(yǎng)基上的GBS 菌落為淺粉色、淺紅色至紅色及深紅色中等大小,濕潤,飽滿圓形呈珍珠狀菌落,挑取的菌落經(jīng)VITEK MS 質(zhì)譜儀和VITEK 2 compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀鑒定為GBS。
圍產(chǎn)期孕35 ~37 周GBS 定值率2019 年1 月—11 月共收集標(biāo)本5660 份,其中GBS 培養(yǎng)鑒定陽性標(biāo)本數(shù)509 例,陰性標(biāo)本數(shù)5151 例,陽性率為8.99%。
B 群鏈球菌(GBS)是一種條件致病菌,細(xì)胞壁有C 物質(zhì)(族特異性碳水化合物抗原)和S 物質(zhì)(型特異性莢膜多糖抗原),可產(chǎn)生多種外毒素和溶組織酶,在機(jī)體免疫力下降、GBS 定值部位發(fā)生改變及泌尿生殖道微生態(tài)紊亂或遭到破壞時(shí)易發(fā)生機(jī)會(huì)性感染,而圍產(chǎn)期孕產(chǎn)婦由于生理特殊性,若處于GBS 定值的高風(fēng)險(xiǎn)狀態(tài)下,易造成母嬰感染,孕產(chǎn)婦的臨床致病表現(xiàn)為菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染、胎膜感染、胎膜早破、晚期流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)褥感染、子宮內(nèi)膜感染以及創(chuàng)傷感染,新生兒經(jīng)產(chǎn)道感染GBS,早期典型GBS 感染表現(xiàn)為24h 內(nèi)引起中毒性休克、肺炎、敗血癥或腦膜炎等不良后果,早期感染比例約為80%[6],是引起新生兒敗血癥首要傳染病,晚期感染發(fā)生于出生后第1 周至3 個(gè)月,平均時(shí)間1個(gè)月,通常橫向傳播引起,表現(xiàn)為菌血癥發(fā)熱和腦膜炎[7,8],即使剖宮產(chǎn)也不能避免GBS 感染的風(fēng)險(xiǎn),且感染治愈后仍能長期遺留病理狀態(tài)[9]。在新生兒細(xì)菌性感染中,GBS 感染比例高,且感染的死亡率也較高,部分研究數(shù)據(jù)顯示高達(dá)50%。
美國疾病控制與預(yù)防中心(CDC)2010 年更新修訂了《圍生期B 族鏈球菌感染篩查及防治指南》[10],使得新生兒GBS 感染的發(fā)病率由原先的1.7/1000 個(gè)新生兒降低到近年來的0.34 ~0.37/1000 個(gè)新生兒[11],指南建議對所有妊娠35 ~37 周的孕產(chǎn)婦進(jìn)行陰道和直腸拭子GBS 篩查,歐美等其他發(fā)達(dá)國家較早較規(guī)范的開展了GBS 的全面篩查工作,在防治孕產(chǎn)婦和新生兒GBS感染方面做得比較好,截至目前,我國GBS 篩查普及工作還不夠,形勢較為嚴(yán)峻。隨著2015 年二胎政策的出臺(tái),二胎孕產(chǎn)婦逐漸增多,二胎孕產(chǎn)婦具有年齡大、妊娠風(fēng)險(xiǎn)因素增加,妊娠合并癥多、高危妊娠發(fā)生率高等特點(diǎn),一定程度上導(dǎo)致GBS 感染率的升高,感染GBS機(jī)率增高,生產(chǎn)時(shí)新生兒感染GBS風(fēng)險(xiǎn)也相應(yīng)增加,造成較大的社會(huì)負(fù)擔(dān)。
孕產(chǎn)婦陰道和直腸定值GBS 是新生兒感染的高危因素之一,要降低孕產(chǎn)婦的GBS 定值率以及新生兒的發(fā)病率和病死率,就需要開展全面的GBS 篩查,不斷提升GBS 診斷技術(shù),相關(guān)研究顯示,PCR 和免疫學(xué)檢測GBS 的方法相對培養(yǎng)法有速度上的優(yōu)勢,但對于篩查孕產(chǎn)婦,并不急于診斷,所以實(shí)驗(yàn)室和臨床可以接受培養(yǎng)相對較慢的速度,降低假陰性,提高GBS 檢出率,避免漏診。此次篩查5660 份標(biāo)本,陽性率8.99%,處于國內(nèi)平均水平,低于部分地區(qū)的定值率,但各醫(yī)院仍應(yīng)常規(guī)開展GBS 的全面篩查工作,婦幼保健部門、婦產(chǎn)科相關(guān)醫(yī)務(wù)人員和孕產(chǎn)婦家庭應(yīng)引起高度重視,做好GBS的篩查工作,爭取做到早發(fā)現(xiàn),早預(yù)防,早治療,及時(shí)有效地對GBS攜帶者進(jìn)行預(yù)防和治療,達(dá)到優(yōu)生優(yōu)育的目的。