曾 暉，林 玲，馬 馳，袁粒星，何 賢

（四川大學(xué)華西第二醫(yī)院科技部出生缺陷與相關(guān)婦兒疾病教育部重點實驗室，四川 成都 610041）

隨著醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的快速發(fā)展，動物實驗涉及細(xì)分的科研領(lǐng)域也更加廣泛，如新藥測試、疾病模型建立、腫瘤研究和遺傳學(xué)研究等[1-2]。為了保證動物實驗的準(zhǔn)確性和有效性，各科研單位開始廣泛使用無特定病原體SPF(Specific Pathogen Free,SPF)實驗動物，并為SPF實驗動物配置屏障設(shè)施，對人、實驗動物、飼料、飲水、墊料、空氣及其他物品都要進行嚴(yán)格的微生物控制[3]。

然而，屏障設(shè)施內(nèi)飼養(yǎng)的SPF級實驗動物存在被微生物污染的可能，管理者應(yīng)當(dāng)從硬件設(shè)施、實驗人員及實驗動物方面入手進行微生物控制。我們在日常管理工作中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)硬件設(shè)施穩(wěn)定運行時，控制動物中心的生物安全風(fēng)險在于監(jiān)管入室動物和規(guī)范人員操作。本文從實驗動物管理和人員管理兩方面入手，分析討論了微生物感染途徑，并通過實施相應(yīng)的管理措施降低實驗動物感染風(fēng)險。

1 實驗動物管理常見的生物安全風(fēng)險

1.1 使用來源復(fù)雜的實驗動物

由于國內(nèi)實驗動物生產(chǎn)單位環(huán)境條件參差不齊，即使有實驗動物生產(chǎn)許可證，也存在售賣實驗動物微生物等級不一致的現(xiàn)象。同時，在運輸途中如果動物運輸箱破損，也會導(dǎo)致實驗動物微生物等級不合格[4]。另外，未經(jīng)檢測直接接收從其他動物中心轉(zhuǎn)入的實驗動物，同樣存在生物污染風(fēng)險。如果屏障設(shè)施接收了這類動物，就存在被病原微生物感染已飼養(yǎng)動物的風(fēng)險。一旦入室的實驗動物攜帶人獸共患病和烈性動物傳染病的病原微生物，極易造成生物安全事故。

1.2 實驗人員操作不規(guī)范

學(xué)生在屏障設(shè)施內(nèi)做動物實驗時，普遍缺乏規(guī)范化操作意識，表現(xiàn)為不戴手套、不戴口罩、半敞開隔離服、攜帶未消毒的手機進入潔凈區(qū)，以及人員和物品違規(guī)從緩沖區(qū)返回潔凈區(qū)，進出房間沒有隨手關(guān)門導(dǎo)致房間壓差異常等。

當(dāng)實驗人員攜帶微生物病原體時，這些違規(guī)操作行為容易導(dǎo)致病原微生物感染動物實驗員。

1.3 屏障設(shè)施內(nèi)檢測出病原體

按照實驗動物微生物學(xué)控制要求，應(yīng)當(dāng)定期對哨兵鼠進行檢疫，排除人獸共患病的病原體和烈性動物傳染病的病原體。實驗動物高密度規(guī)?；酗曫B(yǎng)的現(xiàn)象非常普遍，一旦外來傳染性強的病原微生物侵入飼養(yǎng)間，交叉感染現(xiàn)象會很快發(fā)生，動物疫情將以極快速度暴發(fā)。

2 實驗動物安全問題解決對策

2.1 采取嚴(yán)格的動物準(zhǔn)入制度

實行嚴(yán)格的準(zhǔn)入制度，拒絕接收無實驗動物質(zhì)量合格證的動物。新購的動物實行廠家白名單管理制度，定期送檢生產(chǎn)廠家的實驗動物并做記錄，篩選出實際微生物等級達標(biāo)的實驗動物生產(chǎn)廠家并建立白名單，拒絕接收白名單以外生產(chǎn)廠家的實驗動物。實驗動物送達時，要及時檢查外包裝，尤其要嚴(yán)格查看通氣膜的完整情況，拒絕接收運輸箱外包裝破損的實驗動物。如果準(zhǔn)備接收其他動物中心的動物，必須抽檢該批動物。當(dāng)出現(xiàn)微生物等級不達標(biāo)的情況時，應(yīng)當(dāng)首先對該批動物做凈化處理，再將凈化成功的子代轉(zhuǎn)入。

2.2 規(guī)范動物實驗操作

通過實驗人員入室培訓(xùn)及考試，可初步建立實驗人員基本的微生物控制規(guī)范操作意識。在培訓(xùn)中必須明確指出進入動物中心的實驗人員和實驗動物是潛在傳染源，只有同時規(guī)范實驗人員操作和控制實驗動物微生物學(xué)等級才能避免生物安全問題產(chǎn)生。

針對屏障系統(tǒng)內(nèi)實驗人員出現(xiàn)違規(guī)操作，如不正確穿戴防護服、不按規(guī)定流向進入飼養(yǎng)間以及攜帶違規(guī)物品等情況，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，立即在管理群內(nèi)通報批評，并責(zé)令違規(guī)人員整改并寫情況說明，由該課題組負(fù)責(zé)人簽字后交由動物中心管理人員備案。嚴(yán)格執(zhí)行監(jiān)察管理制度可杜絕違規(guī)情況發(fā)生，能夠有效避免實驗人員把病原微生物帶入飼養(yǎng)區(qū)。

2.3 已出現(xiàn)微生物污染的處理方案

當(dāng)屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)間的哨兵鼠檢測出無特定病原體動物規(guī)定以外的病原時，首先應(yīng)當(dāng)及時對該房間隔離，并排查該房間與周圍房間的動物進出情況。其次是通過動物送檢確定該病原體的感染范圍，對確定污染的房間進行徹底消毒，并全部淘汰該房間內(nèi)的實驗動物。淘汰的動物尸體及一般廢棄物應(yīng)當(dāng)按照規(guī)范存放在專用冰箱，交由無害化處置單位進行動物尸體回收處理，避免造成二次污染。

3 結(jié)束語

屏障設(shè)施的新風(fēng)系統(tǒng)在正常運行的情況下，病原感染設(shè)施內(nèi)動物的途徑主要有兩條：一條是通過入室動物攜帶病原進入屏障系統(tǒng)，另一條是通過實驗人員攜帶病原進入屏障系統(tǒng)。通過嚴(yán)格控制這兩條傳播途徑，可以有效降低病原的傳播風(fēng)險，從而保障屏障設(shè)施內(nèi)實驗動物的微生物等級。