疏穗處理對(duì)‘赤霞珠’葡萄果皮類黃酮物質(zhì)的影響

曾桂花，高飛飛，高邦牢，惠竹梅,2,，張振文,2,

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)葡萄酒學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2.陜西省葡萄與葡萄酒工程中心，陜西 楊凌 712100）

類黃酮物質(zhì)是植物中重要的次級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛分布于植物的根、莖、葉和果實(shí)中，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起重要作用[1-2]。此外，類黃酮物質(zhì)可以清除人體內(nèi)的自由基，具有抗氧化、抗衰老和降低心血管疾病等保健功能[3-4]。在葡萄中，花色苷、黃烷-3-醇和黃酮醇是最重要的3 種類黃酮物質(zhì)[5]。

花色苷是由花色素與糖基以糖苷鍵結(jié)合形成的一類化合物，是葡萄和葡萄酒的主要呈色物質(zhì)。葡萄果實(shí)中的花色苷主要有花翠素、花青素、甲基花翠素、甲基花青素和二甲花翠素5 種形式[6]。此外，花色苷的糖殘基可以與芳香族化合物或脂肪酸發(fā)生葡萄糖苷?；磻?yīng)。酰化花色苷較非?；ㄉ站哂懈鼜?qiáng)的化學(xué)穩(wěn)定性，有利于葡萄酒顏色的穩(wěn)定[7]。黃烷-3-醇是葡萄果實(shí)中一類重要的類黃酮物質(zhì)，其單體可以通過(guò)縮合或聚合作用形成縮合單寧，是葡萄酒中苦味和澀味的主要來(lái)源，構(gòu)成了葡萄酒的基本骨架[8-9]。此外，黃烷-3-醇可以與色素分子結(jié)合，有利于葡萄酒顏色的穩(wěn)定[10]。黃酮醇類物質(zhì)具有很好的輔色作用，可以與花色苷作用生成穩(wěn)定的復(fù)合物，增強(qiáng)和保護(hù)葡萄酒的顏色[11]。

類黃酮物質(zhì)是葡萄果實(shí)和葡萄酒重要的質(zhì)量參數(shù)之一，其種類和含量受品種[12]、溫度[13-14]、光照[15-16]、水分[17]和栽培管理措施[18-19]等因素的影響。疏穗處理是一種在葡萄栽培中常用的提高其果實(shí)品質(zhì)的技術(shù)管理手段。研究表明，葡萄疏穗處理有助于葡萄果實(shí)類黃酮物質(zhì)的合成和積累[20-22]。但是由于產(chǎn)地和品種等因素的不同，相同的疏穗處理可能導(dǎo)致不同的結(jié)果。因此，為特定葡萄酒產(chǎn)區(qū)的葡萄品種確定適合的疏穗方案至關(guān)重要。本研究通過(guò)分析不同疏穗處理對(duì)山西鄉(xiāng)寧縣釀酒葡萄‘赤霞珠’果皮類黃酮物質(zhì)的影響，為制定該地區(qū)‘赤霞珠’葡萄最佳疏穗方案提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試釀酒葡萄‘赤霞珠’（Vitis viniferaL. Cabernet Sauvignon）于2012年定植在山西省鄉(xiāng)寧縣（35.97°N，110°E），該地年平均氣溫9.9 ℃，年降水量570 mm，年均無(wú)霜期212 d，行株距為2.5 m×1.2 m，采用水平式獨(dú)龍蔓樹形和單臂籬架架式[23]。

坐果后20 d進(jìn)行手動(dòng)疏穗處理。設(shè)置3 個(gè)疏穗水平：不疏除果穗（CK）、疏除27%果穗（C1）、疏除54%果穗（C2）。每個(gè)疏穗水平選取30 株長(zhǎng)勢(shì)一致的植株進(jìn)行處理。為了避免邊際效應(yīng)，處理兩側(cè)各兩行葡萄植株，兩端各5 株植株不進(jìn)行采樣。果實(shí)采收期，每處理兼顧植株的陰面與陽(yáng)面隨機(jī)采樣20 穗，樣品裝在泡沫箱中運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室后立即剪下全部果粒，混勻后保存于－40 ℃超低溫冰箱待用。

氫氧化鈉、葡萄糖、甲醇、甲酸、乙酸乙酯（均為分析純） 天津市博迪化工有限公司；甲醇、甲酸、乙腈和乙酸（均為色譜級(jí)） 美國(guó)Fisher公司；類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品：二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷、兒茶素、表兒茶素、表沒(méi)食子酸兒茶素、表兒茶素沒(méi)食子酸酯和槲皮素-3-O-葡萄糖苷 美國(guó)Sigma-Aldrich公司。

1.2 儀器與設(shè)備

PAL-1數(shù)顯手持式折糖儀 日本Atago公司；UV-1800紫外-可見分光光度計(jì) 日本島津公司；FD5系列真空冷凍干燥機(jī) 美國(guó)Gold Sim公司；5804R型高速冷凍離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司；CentriVap低溫冷凍濃縮儀 美國(guó)Labconco公司；1100系列LC/MSD Trap-VL液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀（配二極管陣列檢測(cè)器）美國(guó)Agilent公司。

1.3 方法

1.3.1 果實(shí)基本理化指標(biāo)測(cè)定

可溶性固形物含量使用數(shù)顯手持式折糖儀測(cè)定；果粒質(zhì)量使用電子天平測(cè)定；果粒橫徑使用游標(biāo)卡尺測(cè)定；還原糖含量測(cè)定采用斐林試劑滴定法，結(jié)果以葡萄糖計(jì)；總酸含量測(cè)定采用氫氧化鈉滴定法，結(jié)果以酒石酸計(jì)[24]；總酚含量測(cè)定采用福林-肖卡法，結(jié)果以沒(méi)食子酸計(jì)；總花色苷含量測(cè)定采用pH示差法，結(jié)果以二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷計(jì)；單寧含量測(cè)定采用甲基纖維素法，結(jié)果以兒茶素計(jì)[25]。

1.3.2 果皮單體花色苷測(cè)定

每個(gè)處理隨機(jī)選取100 粒葡萄，在冷凍狀態(tài)下剝皮，經(jīng)液氮研磨后于真空冷凍干機(jī)中冷凍24 h，充分冷凍干燥后保存在－80 ℃冰箱中，備用。

單體花色苷含量測(cè)定參考Wang Yu等[26]的方法進(jìn)行。稱取0.500 g葡萄果皮干粉于離心管中，加入10 mL含有2%甲酸的甲醇溶液，避光超聲10 min后在搖床中振蕩提取30 min，8 000×g離心10 min，轉(zhuǎn)上清液于50 mL離心管中，重復(fù)提取3 次，合并上清液在離心濃縮儀濃縮至干，剩余物質(zhì)用流動(dòng)相A∶B（9∶1，V/V）定容至10 mL。過(guò)0.45 μm有機(jī)濾膜后采用1100系列配有二極管陣列檢測(cè)器的LC/MSD Trap-VL液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行樣品的定性和定量分析。

色譜條件：Kromasil 100-5C18色譜柱（25 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相A相為水-甲酸-乙腈溶液（92∶2∶6，V/V）；B相為水-甲酸-乙腈溶液（44∶2∶54，V/V）；洗脫程序：1～18 min，90%～75% A，10%～25% B；18～20 min，75% A，25% B；20～30 min，75%～60% A，25%～40% B；30～35 min，60%～30% A，40%～70% B；35～40 min，30%～0% A，70%～100% B。流動(dòng)相流速1.0 mL/min；柱溫50 ℃。

單體花色苷的定性研究根據(jù)文獻(xiàn)[27]中的“葡萄與酒花色苷HPLC-UV-MS指紋譜庫(kù)”進(jìn)行。花色苷定量以二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷為外標(biāo)物建立質(zhì)量濃度為5～500 mg/L的花色苷定量回歸方程Y=38.548X－106.32，其中Y為峰面積，X為二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷質(zhì)量濃度，該方程回歸系數(shù)為0.999 7。

1.3.3 果皮非花色苷酚類物質(zhì)測(cè)定

參考Wang Yu等[26]的方法進(jìn)行。稱取0.500 g葡萄果皮干粉于離心管中，加入1 mL蒸餾水和9 mL乙酸乙酯，搖床中避光振蕩30 min，轉(zhuǎn)上清液于50 mL離心管中，重復(fù)3 次。合并上清液在離心濃縮儀濃縮至干，殘?jiān)? mL甲醇定容。采用1100系列LC/MSD Trap-VL高效液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析。

色譜條件：流動(dòng)相A為0.1%甲酸溶液，流動(dòng)相B為1%乙酸-乙腈溶液。洗脫程序：0～20 min，90% A，10.0% B；20～30 min，90%～85% A，10%～15% B；30～40 min，85%～80% A，15%～20% B；40～50 min，80%～67% A，20%～33% B；50～55 min，67%～60% A，33%～40% B；55～58 min，60%～0% A，40%～100% B；58～63 min，100% B；63～64 min，90% A，10% B。流動(dòng)相流速1.0 mL/min；柱溫25 ℃。非花色苷酚類物質(zhì)的定性與定量參考Liang Nana等[27]的方法。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 疏穗處理對(duì)葡萄果實(shí)理化指標(biāo)的影響

如表1所示，疏穗處理提高了葡萄果粒質(zhì)量和果粒橫徑。隨著疏穗量的增加，果實(shí)中還原糖含量和可溶性固形物含量增加，總酸含量降低。與CK相比，C1、C2還原糖含量分別提高了6.32%和8.76%，總酸含量分別降低了3.60%和2.85%。

表1 疏穗處理對(duì)葡萄果實(shí)理化指標(biāo)的影響Table 1 ffect of cluster thinning on physicochemical parameters of grape berries

表1 疏穗處理對(duì)葡萄果實(shí)理化指標(biāo)的影響Table 1 ffect of cluster thinning on physicochemical parameters of grape berries

注：數(shù)據(jù)為3 個(gè)重復(fù)的平均值，同行不同小寫字母表示差異顯著（P＜0.05），下同。

指標(biāo) 處理CK C1 C2果粒質(zhì)量/g 1.55±0.16b 1.58±0.19b 1.69±0.16a果粒橫徑/mm 12.87±0.56ab 12.65±0.82b 13.14±0.67a還原糖質(zhì)量濃度/（g/L） 194.65±2.86b207.69±7.34a212.44±7.81a總酸質(zhì)量濃度/（g/L） 5.28±0.12a 5.09±0.01b 5.13±0.04b可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)/% 20.70±0.00b 21.10±0.00a 21.10±0.12a總酚含量/（mg/g） 37.40±2.45b 42.74±1.22a 38.80±3.41ab單寧含量/（mg/g） 19.06±2.76c 24.97±6.6a 21.63±0.30b總花色苷含量/（mg/g） 13.09±1.01c 16.67±1.80a 14.62±1.01b

采收期各處理葡萄果實(shí)總酚含量存在顯著差異，C1、C2總酚含量比CK分別提高了14.28%和3.75%，其中，C1總酚含量顯著高于CK。疏穗處理后，葡萄果實(shí)中單寧和總花色苷含量均顯著升高，與CK相比，C1、C2單寧含量分別提高了31.01%和13.48%，總花色苷含量分別提高了27.35%和11.69%。

2.2 疏穗處理對(duì)果皮單體花色苷的影響

表2 疏穗處理對(duì)葡萄果皮單體花色苷含量的影響Table 2 ffect of cluster thinning on contents of monomeric anthocyanin in grape skins

表2 疏穗處理對(duì)葡萄果皮單體花色苷含量的影響Table 2 ffect of cluster thinning on contents of monomeric anthocyanin in grape skins

類別 單體花色苷含量/（μg/g） 處理CK C1 C2花翠素-3-O-葡萄糖苷delphinidin-3-O-glucoside (Dp) 1 205.92±85.33b 1 311.81±18.98a 1 386.09±14.97a花青素-3-O-葡萄糖苷cyanidin-3-O-glucoside (Cy) 285.45±11.57a 192.32±4.28c 247.45±4.98b基本花色苷甲基花翠素葡萄糖苷petunidin-3-O-glucoside (Pt) 802.47±47.10b 759.69±7.96b 929.35±57.84a甲基花青素葡萄糖苷peonidin-3-O-glucoside (Pn) 665.23±30.50a 678.42±6.03a 761.61±88.37a二甲花翠素葡萄糖苷malvidin-3-O-glucoside (Mv) 5 583.90±82.89b5 784.20±60.18ab5 943.70±153.67a小計(jì) 8 542.97±189.92 8 726.44±43.57 9 268.21±164.24比例/% 57.22 55.96 53.24花翠素-3-O-(6-O-乙?；?葡萄糖苷Dp-3-O-(6-acetyl)-glucoside 772.59±25.56c 926.24±29.20b 1 644.60±52.14a花青素-3-O-(6-O-乙?；?葡萄糖苷Cy-3-O-(6-acetyl)-glucoside 135.14±7.60a 132.13±16.40a 107.53±16.05a乙酰化花色苷二甲花翠素乙?；咸烟擒誐v-3-O-(6-acetyl)-glucoside 3 159.37±33.77c 3 476.94±6.14b 3 810.45±9.88a甲基花翠素乙酰化葡萄糖苷Pt-3-O-(6-acetyl)-glucoside 400.69±13.08a 426.62±3.89a 427.91±22.08a甲基花青素乙?；咸烟擒誔n-3-O-(6-acetyl)-glucoside 418.53±15.92a 428.08±1.41a 457.53±61.83a小計(jì) 4 886.32±48.88 5 390.00±16.31 6 448.01±57.71a比例/% 32.72 34.57 37.04甲基花翠素咖啡?；咸烟擒誔t-3-O-(6-caffeoyl)-glucoside 21.39±2.37ab 27.90±2.94a 19.35±4.60b咖啡?；ㄉ斩谆ù渌乜Х弱；咸烟擒誐v-3-O-(6-caffeoyl)-glucoside 88.43±3.85ab 83.92±1.01b 90.83±3.94a小計(jì) 109.82±1.47 111.82±1.93 110.18±8.53比例/% 0.74 0.72 0.63

續(xù)表2

如表2所示，在3 種處理的皮中均檢測(cè)出18 種單體花色苷，包括5 種基本花色苷、5 種乙酰化花色苷、2 種咖啡酰化花色苷和6 種香豆?；ㄉ铡Ｊ杷胩幚砗笃咸压ぶ袉误w花色苷含量顯著升高，C1、C2單體花色苷含量較CK分別提高了4.43%和16.59%。

隨著疏穗量的增加，葡萄果皮中花翠素類和二甲花翠素類花色苷含量升高。花色苷B環(huán)上游離羥基數(shù)目越多，其藍(lán)色色調(diào)越深，甲基化數(shù)目越多，其紅色色調(diào)越深[10]。因此，隨著疏穗量的增加，‘赤霞珠’葡萄果皮顏色越來(lái)越深，說(shuō)明疏穗處理有利于果實(shí)著色。葡萄果皮中非酰化花色苷占總量的53%以上；其次為乙?；ㄉ眨伎偭康?2%～37%；香豆酰化花色苷占總量的9%左右；只有微量咖啡酰化花色苷。非?；ㄉ帐撬谢ㄉ罩泻孔罡叩慕M分，疏穗處理后，果皮中非?；ㄉ蘸可撸贑2中含量最高為9 268.21 μg/g。與非酰化花色苷相比，?；ㄉ盏幕瘜W(xué)穩(wěn)定性更強(qiáng)，疏穗處理后，果皮中酰化花色苷所占比例增加。

圖1 不同疏穗處理葡萄果皮單體花色苷聚類分析Fig. 1 Cluster analysis of monomeric anthocyanins in grape skins with different levels of cluster thinning

為進(jìn)一步分析不同疏穗處理葡萄果皮單體花色苷組分的差異，利用RStudio軟件進(jìn)行聚類熱圖分析，結(jié)果如圖1所示。18 種單體花色苷被聚為III類。第I類物質(zhì)包括甲基花翠素咖啡酰化葡萄糖苷、反式-二甲花翠素香豆?；咸烟擒?、花青素-3-O-(6-O-乙?；?葡萄糖苷和花青素香豆?；咸烟擒? 種，在C1中含量較高。第II類物質(zhì)包括甲基花翠素香豆?；咸烟擒?、二甲花翠素葡萄糖苷和花青素-3-O-葡萄糖苷3 種，在C1中含量最低。第III類物質(zhì)包括甲基花青素葡萄糖苷、甲基花翠素乙?；咸烟擒盏?1 種，在C2處理中最高。

2.3 疏穗處理對(duì)果皮非花色苷酚類物質(zhì)的影響

表3 疏穗處理對(duì)果皮非花色苷酚類物質(zhì)含量的影響Table 3 ffect of cluster thinning on contents of non-anthocyanin phenolic compounds in grape skins

表3 疏穗處理對(duì)果皮非花色苷酚類物質(zhì)含量的影響Table 3 ffect of cluster thinning on contents of non-anthocyanin phenolic compounds in grape skins

類別 非花色苷酚類物質(zhì)含量/（μg/g）處理CK C1 C2黃烷醇原花色素B1 procyanin B1 2.44±0.22b 1.15±0.18c 5.10±0.35a棓兒茶素 gallocatechin 2.77±0.05c 3.11±0.01b 4.75±0.10a表?xiàng)攦翰杷?epigallocatechin 0.50±0.00b 0.51±0.01b 0.72±0.04a兒茶素 catechin 1.784±0.14c 2.22±0.04b 3.61±0.26a原兒茶素 protocatechuic acid 0.06±0.00a 0.06±0.00a 0.10±0.00a表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯epigallocatechin gallate 1.10±0.00a 1.12±0.01a 1.10±0.01a小計(jì) 8.65±0.11 8.17±0.28 15.38±0.48比例/% 1.52 1.29 2.67楊梅酮-半乳糖苷myricetin-galactoside 28.19±0.06b 29.75±0.36a 26.21±0.28c黃酮醇 楊梅酮-葡萄糖苷myricetin-glucoside 126.99±0.30a128.03±1.31a122.02±0.86b槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸酐quercetin-3-O-glucuronide 84.82±0.10c 108.26±0.56a 99.54±0.96b槲皮素-3-O-半乳糖苷quercetin-3-O-galactoside 48.40±0.01b 54.65±0.125a 47.00±0.24c槲皮素-3-O-葡萄糖苷quercetin-3-O-glucoside 158.29±0.14b169.30±0.53a154.89±1.03c鼠李糖素-3-O-葡萄糖苷isorhamnetin-3-O-glucoside 2.64±0.02b 4.06±0.56a 2.31±0.04b槲皮素-3-O-鼠李糖苷quercetin-3-O-rhamnoside 1.08±0.04a 1.95±0.09a 1.28±0.05a山柰酚-3-O-半乳糖苷kaempferol-3-O-galactoside 15.44±0.01b 18.64±0.08a 12.56±0.03c山柰酚-3-O-葡萄糖苷kaempferol-3-O-glucoside 38.64±0.04b 46.62±0.12a 32.63±0.26c楊梅酮 myricetin 1.96±0.04a 1.96±0.09a 1.92±0.22a異鼠李亭 isorhamnetin 0.96±0.00a 0.98±0.05a 1.02±0.00a西伯利亞落葉松黃酮 laricitrin 0.96±0.02b 1.02±0.05a 1.08±0.06b丁香亭-葡萄糖苷syringetin-glucoside 25.03±0.09c 27.04±0.28a 26.32±0.26b丁香亭-半乳糖苷syringetin-galactoside 25.23±0.09c 27.26±0.35a 26.53±0.33b丁香亭 syringetin 0.62±0.01b 0.65±0.06b 0.92±0.08a小計(jì) 559.25±0.34 620.17±0.96 556.14±3.46比例/% 98.48 98.71 97.33總計(jì) 567.90±0.06b628.34±1.10a571.52±2.98b

從表3可以看出，在3 種處理的果皮中均檢測(cè)出21 種非花色苷酚類物質(zhì)，包括6 種黃烷醇和15 種黃酮醇。處理C1和C2非花色苷酚類物質(zhì)含量較CK分別提高了10.64%和0.64%，其中，C1非花色苷酚類物質(zhì)含量顯著高于CK。

黃烷醇類：各處理果皮中均檢測(cè)出6 種黃烷醇，分別為原花色素B1、棓兒茶素、表?xiàng)攦翰杷亍翰杷?、原兒茶素和表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯。不同疏穗處理葡萄果皮中黃烷醇類物質(zhì)總量存在顯著差異，但占非花色苷酚類物質(zhì)總量的比例均較低，不足3%。

黃酮醇類：黃酮醇占非花色苷酚類物質(zhì)的比例很高，在97%左右。槲皮素類在黃酮醇中含量最高，約占黃酮醇總量的53%。疏穗處理后，果皮中黃酮醇含量升高，C1黃酮醇含量較CK提高了10.89%，達(dá)到差異顯著水平，C2黃酮醇含量與CK無(wú)顯著差異。

圖2 不同疏穗處理葡萄果皮非花色苷酚類物質(zhì)聚類分析Fig. 2 Cluster analysis of non-anthocyanin phenolics in grape skins with different levels of cluster thinning

如圖2所示，21 種非花色苷酚類物質(zhì)聚為5 類，第I類成分包括鼠李糖素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-半乳糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷等7 種非花色苷單體，在處理C1中含量最高；第II類成分包括表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯、丁香亭-半乳糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸酐、丁香亭-葡萄糖苷4 種，且C1和C2處理組明顯高于CK。第III類成分包括異鼠李亭、原花色素B1、表?xiàng)攦翰杷氐? 種，其中C2處理組最高。第IV類成分包括槲皮素-3-O-鼠李糖苷、楊梅酮和西伯利亞落葉松黃酮3 種。

2.4 PCA結(jié)果

對(duì)不同疏穗處理的葡萄果實(shí)基本理化指標(biāo)和類黃酮物質(zhì)進(jìn)行PCA，結(jié)果見圖3。PC1解釋了總變量的45.24%，PC2解釋了總變量的28.87%。在圖3B中，花色苷和黃烷醇主要集中在PC1正端，黃酮醇主要集中在PC2正端。由圖3A可以看出，PC1能將CK與C2很好地區(qū)分開，PC2能將CK與C1很好地區(qū)分開，說(shuō)明CK與C2在與PC1相關(guān)的物質(zhì)上差異較大，隨著疏穗量的增加，與不疏穗果實(shí)花色苷和黃烷醇物質(zhì)的差異越大。

圖3 不同疏穗處理與葡萄果實(shí)品質(zhì)相關(guān)物質(zhì)的PCAFig. 3 Principal component analysis of substances related to grape quality under different levels of cluster thinning

3 結(jié)論與討論

疏穗是一種能有效提高葡萄果實(shí)品質(zhì)的栽培技術(shù)手段。有研究指出，疏穗處理后葡萄果實(shí)的外觀特性和生理指標(biāo)發(fā)生顯著變化，包括果粒質(zhì)量提高、還原糖含量增加和總酸含量降低等[28-29]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與前人的研究一致，C1和C2疏穗處理均提高了葡萄果實(shí)的果粒質(zhì)量和橫徑，增加了果實(shí)中還原糖含量，降低了總酸含量。

類黃酮物質(zhì)是葡萄和葡萄酒重要的質(zhì)量參數(shù)之一，不僅影響葡萄酒的顏色、風(fēng)味、收斂性和生化穩(wěn)定性，還影響了葡萄酒的生理活性功能[2,9]?；ㄉ帐瞧咸压麑?shí)和葡萄酒中主要的呈色物質(zhì)，在本實(shí)驗(yàn)中，C1、C2果皮中單體花色苷的含量均顯著高于CK，且?；ㄉ盏暮亢退急壤S著疏穗量的增加而升高，說(shuō)明疏穗處理對(duì)果皮中花色苷有積極影響，與Bogicevic等[30]的研究結(jié)果一致。研究者認(rèn)為這可能是由于疏穗處理有效改善了葡萄植株的葉果比和庫(kù)源關(guān)系以及剩余果實(shí)生長(zhǎng)的微環(huán)境，有利于花色苷的合成和積累[31]。Xi Xiaojun等[21]發(fā)現(xiàn)疏穗處理后，夏黑葡萄中編碼查耳酮合酶、查耳酮異構(gòu)酶、類黃酮3’,5’-羥化酶、O-甲基轉(zhuǎn)移酶和類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶等花色苷合成和轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)鍵酶基因表達(dá)量顯著上調(diào)。黃烷醇的變化趨勢(shì)與花色苷相似，隨著疏穗量的增加，其含量在C2中達(dá)到最大值。果皮中黃酮醇含量隨疏穗量的增加先升高后降低，處理C2和CK黃酮醇含量均顯著低于C1，說(shuō)明疏穗量過(guò)大反而不利于黃酮醇的積累。劉迪迪等[32]也得出相似的結(jié)論，這可能是由于疏穗量過(guò)大導(dǎo)致植株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)旺盛，消耗了大量的養(yǎng)分或者葉幕郁閉，不利于果實(shí)品質(zhì)的提高[33]。

本研究表明，27%和54%疏穗處理均可以提高果粒質(zhì)量和還原糖含量，降低總酸含量，有利于葡萄果皮類黃酮物質(zhì)的積累。綜合各處理類黃酮物質(zhì)含量和成本因素，建議山西省鄉(xiāng)寧地區(qū)疏除27%果穗為宜。