顯微鏡觀察血涂片之實驗改進

王 潔 閆 潔

（石河子大學生命科學學院 新疆石河子 832030）

血涂片標本的觀察是生物學七年級下冊“流動的組織——血液”的實驗內容。因為人血不易獲得，且經過瑞氏染液染色后顯微鏡視野下紅細胞數量約占血細胞數量98%，所以認識血細胞的形態(tài)結構以及不同種類的血細胞在血液中的含量的難度增加，消磨了學生的耐心和興趣，影響教學效果。因此，教師在進行“流動的組織——血液”的教學時，往往會安排學生用顯微鏡觀察人血的永久涂片或者采用iPad移動終端等現代信息技術向學生展示血細胞的結構。這種教學模式雖然大大提高了教學效率，但不利于培養(yǎng)學生的實驗操作和探究能力，與新課標倡導的核心素養(yǎng)背道而馳。因此，為了契合倡導的教育理念，筆者對該實驗材料和實驗操作進行了改進，顯著縮短了實驗教學的時間，使實驗更易觀察和實施。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

（1）試劑：羊血、生理鹽水（質量分數為0.9%的NaCl溶液）、瑞氏染液。

（3）器材：載玻片、蓋玻片、普通光學顯微鏡。

1.2 實驗方法

（1）試劑配制（教師準備）：采集羊血血樣放于有抗凝劑（肝素）的試管內；配制瑞氏染液。

（2）血涂片的制作（學生操作）：用吸管吸取羊血血樣，滴取直徑約3 mm的血液分別于2片潔凈的載玻片上；將血膜均勻推開并自然晾干；一片載玻片滴加瑞氏染液使其能夠覆蓋血膜，蓋上蓋玻片觀察紅細胞形態(tài)；一片載玻片先滴加生理鹽水使其能充分覆蓋血膜；進而滴加適量瑞氏染液。使生理鹽水與瑞氏染液混合均勻，靜置10～15 min。用蒸餾水沖去染液，吸水紙吸干后鏡檢。

2 實驗操作注意事項

為了使血膜薄且連續(xù)，操作者在推片時可以先使蓋玻片與血滴有一定的距離，并使推片與載玻片呈約45°，進而漸漸地靠近血滴，輕輕觸及血滴并勻速推進，使血液沿載玻片端展開。

滴加生理鹽水后，靜止幾秒后就可以滴加瑞氏染液。若時間過長載玻片上的血膜容易脫落。此外，生理鹽水也可以由蒸餾水替代，但是實驗效果沒有滴加生理鹽水的效果好。

用蒸餾水沖洗染液時要注意沖洗的水流不能太大、太迅速，否則會將血膜破壞或沖洗干凈。

3 實驗結果及分析

3.1 實驗結果

因為NaCl溶液覆蓋血膜后，在血膜外形成了一層液態(tài)膜。所以瑞氏染液與紅細胞被液態(tài)膜阻隔，避免了紅細胞與瑞氏染液的直接接觸，而帶相對較多電荷的白細胞受影響較小。因此，未經染色的紅細胞顏色非常淺，呈現草綠色或淡黃色，只能隱約看見其輪廓。經過染色之后紅細胞呈兩面凹的橘紅色圓盤狀。嗜酸性白細胞胞質常被染成粉紅色，細胞核被染成紫紅色；嗜堿性白細胞胞質常被染成蘭紫色；嗜中性白細胞細胞質被染成淡紅色，細胞核為藍紫色；淋巴細胞核大圓形，染成紫藍色；單核細胞的顏色比淋巴細胞淡；血小板為不規(guī)則碎塊，有細小的紫蘭色顆粒。

3.2 實驗改進后的優(yōu)勢

對于學生來說，實驗現象更易觀察，不必再花大量的時間和精力尋找顯微鏡視野下不同類型的血細胞，而是一目了然。這樣不僅縮短了實驗教學的時間，而且強化了學生實驗操作的耐心和實驗觀察探究的興趣。

對于教師來說，改進后的實驗材料——羊血更容易獲得，提高了實驗的可行性，也更易開展實驗教學培養(yǎng)學生的實驗探究能力。

3 總結

新方法在顯微鏡下觀察血涂片時，紅細胞顏色非常淺，呈現草綠色或淡黃色，紅細胞幾乎看不見，只能隱約看見其輪廓。而鋪在載玻片上的白細胞則染色比較好，與直接滴加瑞氏染液時沒有明顯的區(qū)別。因此，學生能夠快速找到不同類型的血細胞并對血細胞進行形態(tài)結構的觀察。該操作方法明顯降低了血細胞的分類時間，增強了學生實驗探究的興趣，提高了實驗教學的效率和可行性。