黑骨藤的化學(xué)成分和藥效研究進(jìn)展

孫文娟，龍春芳，龍 毅*

（1.貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴州貴陽 550025；2.凱里學(xué)院，貴州凱里 556011）

黑骨藤是蘿藦科杠柳屬植物黑龍骨的干燥根或全株，別名鐵骨頭、黑骨頭、黑龍骨、飛仙藤等，已被收載于《全國中草藥匯編》、《中華本草苗藥卷》、《貴州省中藥材民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》等眾多書籍中［1-4］.通過大量的文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤中含有強(qiáng)心苷類、醌類、黃酮類、苯丙素類、三萜類、甾體類、揮發(fā)油類及神經(jīng)酰胺類等多種類別的化學(xué)成分，在治療關(guān)節(jié)、神經(jīng)、皮膚等系統(tǒng)疾病及腫瘤方面有一定的療效.本文對苗藥黑骨藤中主要的化學(xué)成分、疾病治療作用及治療機(jī)制等進(jìn)行了綜述，以期為今后深入研究及臨床開發(fā)應(yīng)用提供可靠的參考依據(jù).

1 化學(xué)成分研究

近年來，研究者們采用不同提取分離純化的方法從黑骨藤中分離出大量不同種類的單體化合物.如2010 年，周欣等［5］在黑骨藤的正丁醇提取部位，首次分離得到了苷元為醌類和黃酮類的6個(gè)新的苷類化合物；2011年，徐冉等［6］在黑骨藤的氯仿萃取部位，首次分離鑒定了5個(gè)單體化合物，分別為香豆素類、三萜類和酚酸類化合物；2013年，宋國斌等［7］從黑骨藤的石油醚提取部位分離鑒定了28種成分，其中酸類成分含量占總揮發(fā)油提取物的34.14%，棕櫚酸的含量最高，可達(dá)到22.94%；2014年，趙超等［8］在黑骨藤的三氯甲烷和正丁醇萃取部位首次分離鑒定出了2個(gè)神經(jīng)酰胺類化合物，即（2S，3S，4R，10E）-2-［（2R）-2-羥基二十四烷酰氨基］-10-十八烷-1，3，4 -三醇和1 -O -β -D -葡萄糖-（2S，3S，4R，10E）-2 -［（2R）-2 -羥基二十四烷酰氨基］-10-十八烷-3，4-二醇；趙珊等［9］和何燕玲等［10］分別在2017年和2019年在黑骨藤的水溶性提取部位共分離鑒定了33個(gè)單體化合物，且首次分離得到了12個(gè)咖啡?；鼘幩犷惢衔?

各項(xiàng)研究中分離的化合物主要集中在極性較大部位，尤以水提部位為多，這些化合物又通常具有細(xì)胞增殖抑制、抗氧化和抗腫瘤的活性.由此可以推測黑骨藤水溶性提取部位是抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的主要活性部位，這或許是民間和臨床治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病時(shí)通常會(huì)采用水煎煮的方式進(jìn)行服用的原因.

2 黑骨藤的治療作用及機(jī)制研究概述

2.1 治療關(guān)節(jié)系統(tǒng)疾病的作用

2.1.1抗炎、抗類風(fēng)濕作用

黨榮敏等［11］通過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、造模以及實(shí)驗(yàn)干預(yù)等方法研究大鼠的踝關(guān)節(jié)病理情況時(shí)發(fā)現(xiàn)，黑骨藤具備一定的抗炎作用.同時(shí)在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)過觀察發(fā)現(xiàn)，黑骨藤高劑量組滑膜細(xì)胞有增生，周圍軟組織的充血水腫不是特別明顯，與秋仙水堿組一樣只是少量的炎性細(xì)胞出現(xiàn)浸潤現(xiàn)象；黑骨藤中劑量組和低劑量組的滑膜細(xì)胞均出現(xiàn)了輕度的水腫情況，并且周圍軟組織也出現(xiàn)了充血水腫的情況，與此同時(shí)還可以看見少量炎性細(xì)胞的浸潤.因此，從黑骨藤不同劑量呈現(xiàn)的藥效作用來看，其抗炎作用與用藥劑量之間有著一定的量效關(guān)系.

黃明進(jìn)等［12］采用黑骨藤60%乙醇提取物進(jìn)行了藥理實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)黑骨藤可以有效地降低患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠體內(nèi)的血清及大鼠組織液中腫瘤壞死因子α、白介素-6和大鼠白介素-1β的含量水平，從而實(shí)現(xiàn)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的目的.李慧敏等［13］研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤中總黃酮和總皂苷是抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的有效成分，它們的含量高低與抗炎效果的強(qiáng)弱成正比，總黃酮的抗炎作用可能小于總皂苷.

宋國斌等［14］發(fā)現(xiàn)黑骨藤中含有的揮發(fā)油通過降低血清中NO、丙二醛的含量和抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)，產(chǎn)生抗炎作用.還有研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤乙醇提取物是通過減少iNOS和COX-2 表達(dá)以及TNF-α、IL-6、NO 和PGE2 等炎癥因子的產(chǎn)生來發(fā)揮抗炎作用的［15］.Liu 等［16］對黑骨藤皂苷及其活性化合物杠柳苷進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤皂苷可改善關(guān)節(jié)的腫脹，抑制關(guān)節(jié)骨質(zhì)侵蝕，杠柳苷能抑制促炎癥因子水平和抑制LPS 誘導(dǎo)的細(xì)胞因子從滑膜細(xì)胞分泌.以上研究都證明，黑骨藤有一定的抗炎、抗類風(fēng)濕的作用.

2.1.2鎮(zhèn)痛作用

劉明等［17］采用SPF 級(jí)昆明種小鼠，通過醋酸扭體法和熱板法對黑骨藤的鎮(zhèn)痛作用及發(fā)揮作用的有效部位進(jìn)行了研究.結(jié)果表明黑骨藤中石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、水的提取部位均有鎮(zhèn)痛作用，而其中正丁醇提取部位的鎮(zhèn)痛作用最為顯著，其作用能力與陽性對照鎮(zhèn)痛抗炎藥阿司匹林相當(dāng)，對疼痛的抑制率可達(dá)到80.2%.炎癥發(fā)作時(shí)，在炎癥部位總是會(huì)伴隨著劇烈的疼痛，而這種疼痛既可以在局部發(fā)生，也可以反映在全身.以往臨床應(yīng)用的很多藥物無法達(dá)到抗炎與鎮(zhèn)痛兼顧的治療效果，如中樞性和麻醉性的止痛藥只能起到止痛作用，糖皮質(zhì)激素類藥物只能起到一定的抗炎作用，而且這類藥物的副作用相對而言比較多，如腸胃反應(yīng)、肺損傷、成癮等，因此黑骨藤作為一種兼具抗炎與鎮(zhèn)痛作用的藥物，非常值得在臨床應(yīng)用上進(jìn)行深入研究.

2.2 治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的作用

Pristionchus pacificus線蟲可以通過熱刺激的方法導(dǎo)致其神經(jīng)損傷，這種神經(jīng)損傷與人類神經(jīng)損傷的情形非常接近，因此人們通常會(huì)采用這種方法進(jìn)行神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究.張貴源等［18］研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤具有修復(fù)神經(jīng)損傷線蟲的功效，這一發(fā)現(xiàn)為黑骨藤在治療神經(jīng)損傷方面的疾病提供了有價(jià)值的參考.大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（PC12）已被廣泛地用于神經(jīng)保護(hù)作用的藥物篩選與研究當(dāng)中.通過研究被H2O2氧化損傷的PC12細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)黑骨藤的乙醇提取物可以提高PC12細(xì)胞的存活率，由此可以證明，黑骨藤具有一定的抗氧化損傷作用［19］.王恒等［20］通過建立SNI（坐骨神經(jīng)損傷）模型的方法，對黑骨藤的乙醇提取物作用于大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾的損傷進(jìn)行了研究.結(jié)果表明，黑骨藤乙醇提取物對SNI 模型大鼠的坐骨神經(jīng)功能具有改善功能，對SNI 模型大鼠坐骨神經(jīng)的功能修復(fù)有明顯的治療作用.

2.3 治療皮膚系統(tǒng)疾病的作用

通過使用二硝基氯苯所誘發(fā)的小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)了黑骨藤的醇沉部位的小鼠灌胃給藥對于抑制二硝基氯苯誘發(fā)的超敏反應(yīng)具有明顯的抑制作用.研究數(shù)據(jù)表明，黑骨藤醇沉部位的劑量在50 mg/kg 的時(shí)候抑制二硝基氯苯誘發(fā)的超敏反應(yīng)作用非常明顯，且劑量在50 mg/kg 和100 mg/kg 的黑骨藤醇沉部位還能明顯地抑制增強(qiáng)脾細(xì)胞增殖反應(yīng).由此可知，黑骨藤醇沉部位具有一定的免疫抑制活性，并且可考慮將其應(yīng)用于過敏性疾病治療當(dāng)中［21］.

特應(yīng)性皮炎作為一種人體免疫調(diào)節(jié)作用異常的瘙癢疾病而存在.針對該病癥，鮑春梅等［22］通過研究黑骨藤皂苷對特應(yīng)性皮炎小鼠的治療作用，發(fā)現(xiàn)黑骨藤皂苷可以治療特應(yīng)性皮炎.目前雖然黑骨藤皂苷治療特應(yīng)性皮炎的免疫調(diào)節(jié)機(jī)理還沒完全清楚，但為深入研究治療特應(yīng)性皮炎提供了一定的理論依據(jù).

2.4 治療腫瘤的作用

研究發(fā)現(xiàn)，杠柳苷元具有一定的抗腫瘤作用，但因其含量較低，且具有一定的不良反應(yīng)，致使其進(jìn)一步的開發(fā)應(yīng)用有待研究［23］.張引娟等［24］通過研究杠柳苷對人乳腺癌細(xì)胞柱BT-549 的抑制作用，發(fā)現(xiàn)杠柳苷具有顯著的抗腫瘤作用.王瑾等［25］采用細(xì)胞毒活性篩選的方法，對從黑骨藤中分離得到的4個(gè)化合物進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其中3個(gè)強(qiáng)心苷類化合物對前列腺腫瘤（PC-3，DU-145）、黑色素瘤（UACC-62）及血液系統(tǒng)腫瘤（HL-60，CCRT-CEM）等細(xì)胞系的細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞毒活性.梁勇等［26］利用MTT 法對黑骨藤進(jìn)行抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黑骨藤提取物中乙酸乙酯部位的抗腫瘤活性非常顯著，同時(shí)確定了杠柳苷和一種酚酸類化合物是乙酸乙酯部位抗腫瘤活性的主要成分.

張鷹等［27］采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法，研究了西南地區(qū)各省份黑骨藤防治肺癌的分子機(jī)制，發(fā)現(xiàn)黑骨藤中強(qiáng)心苷類成分對肺癌及多種腫瘤細(xì)胞具有較好的抑制作用.黃秀蘭等［28］研究發(fā)現(xiàn)黑骨藤可能是通過PI3K-AKT（細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一，發(fā)揮抑制凋亡、促進(jìn)增值的關(guān)鍵作用）和NAKB（真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，可致細(xì)胞增殖失控）兩條信號(hào)通路發(fā)揮抗肺癌的作用.雖然結(jié)論存疑，但也為黑骨藤臨床應(yīng)用于基因干預(yù)方法治療肺癌提供了新的研究思路和方向.

2.5 其他作用

目前，關(guān)于黑骨藤心臟活性的研究報(bào)道極少.楊婉珠等［29］通過離體蛙心心臟灌流實(shí)驗(yàn)，初步探討了黑骨藤醇提物乙酸乙酯部位對離體蛙心心率和心肌收縮力的影響，發(fā)現(xiàn)黑骨藤乙酸乙酯提取部位可以對離體蛙心的收縮活動(dòng)起到有效的抑制作用.其作用機(jī)制，一方面可能與在心肌組織中的Ca2+-Mg2+-ATP 酶活性升高，同時(shí)抑制Ca2+內(nèi)流，從而減少細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度有關(guān)；另一方面，可能與其通過抑制AChE 活性，從而使M 受體興奮，β 受體被阻斷的作用有關(guān).但由于黑骨藤中化學(xué)成分復(fù)雜多樣，且本研究仍處于離體實(shí)驗(yàn)研究階段，其具體的作用機(jī)制需進(jìn)行體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或?qū)诠翘俅继嵛镆宜嵋阴ゲ课贿M(jìn)行純化后進(jìn)一步研究，此研究結(jié)果為黑骨藤在治療心血管系統(tǒng)疾病中發(fā)揮作用奠定了理論基礎(chǔ).Liang 等［30］通過體外抑制透明質(zhì)酸酶實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用聚酰胺純化的黑骨藤中提取的黃酮類物質(zhì)，有良好的抗透明質(zhì)酸酶能力.

3 臨床應(yīng)用

由于苗藥黑骨藤對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有著良好的療效，因此被制作成了中藥制劑，以方便患者使用.其中黑骨藤追風(fēng)活絡(luò)膠囊便于2002年作為OTC 甲類醫(yī)保工傷用藥問世.此藥物的出現(xiàn)，在為醫(yī)療工作做出貢獻(xiàn)的同時(shí)，也引起了大批實(shí)驗(yàn)人員的注意，為此展開了一系列的科學(xué)研究.王可博等［31］發(fā)現(xiàn)治療風(fēng)寒濕痹型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，熱補(bǔ)針法與黑骨藤追風(fēng)活絡(luò)膠囊一起使用有著較好的療效，今后在臨床上可以將這種方法進(jìn)行更為深入的推廣應(yīng)用.古金華等［32］也研究發(fā)現(xiàn)黑骨藤追風(fēng)活絡(luò)膠囊對患者的軟骨修復(fù)有很好的促進(jìn)作用，可顯著緩解風(fēng)濕痹型膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛及功能障礙，且作用于多種細(xì)胞因子.

采用聯(lián)合用藥的方法可以使類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎得到更為有效的治療，甲氨蝶呤作為臨床常用的抗風(fēng)濕類藥物被用于此種方法當(dāng)中.甲氨蝶呤改善類風(fēng)濕病患者臨床癥狀的主要方式是抑制二氫葉酸還原酶以及輔酶F的形成，進(jìn)而阻止了嘌呤和胸腺嘧啶的合成，在此基礎(chǔ)上有效地起到破壞炎性細(xì)胞的增殖、減少炎性因子的釋放和減輕炎癥反應(yīng)的作用.但類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者普遍都身體比較虛弱，而甲氨蝶呤不良反應(yīng)較多，譬如長期使用后導(dǎo)致的消化系統(tǒng)損害、神經(jīng)系統(tǒng)損害、黏膜損害、生殖系統(tǒng)損害等，所以在治療時(shí)間過長時(shí)，長期使用的不良反應(yīng)較多從而限制了其臨床應(yīng)用［33］.董元鳳等［34］應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法研究發(fā)現(xiàn)，黑骨藤追風(fēng)活絡(luò)膠囊可以在一定比例的給藥用量的情況下緩解甲氨蝶呤的副作用，兩者對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療產(chǎn)生了相輔相成的作用，從而治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎采用黑骨藤追風(fēng)活絡(luò)膠囊與甲氨蝶呤聯(lián)合用藥的方法是安全有效的.

4 結(jié)語與展望

黑骨藤作為貴州的十大苗藥之一，被廣泛地應(yīng)用于人們?nèi)粘５募膊≈委煯?dāng)中，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，其傳統(tǒng)功效通過現(xiàn)代藥理學(xué)的方法逐漸得到了相應(yīng)的驗(yàn)證.天然藥物有效成分普遍存在著成分復(fù)雜，研究困難的問題，黑骨藤也不例外.但正是因?yàn)楹诠翘俪煞址彪s，不僅使其具有抗炎、鎮(zhèn)痛、神經(jīng)保護(hù)、防治腫瘤、抑菌等作用，還使其具有很多待開發(fā)的藥用價(jià)值.目前對黑骨藤的藥理學(xué)研究大多都停留在有效部位上，而對其單一的化學(xué)成分的藥效研究相對較少，因此在今后的研究中，可以對其具體化學(xué)成分的藥效進(jìn)行更多的研究.臨床研究方面，對黑骨藤的副作用或毒性試驗(yàn)的研究也相對較少，研究報(bào)道主要集中在其功效主治方面，為達(dá)到更為安全有效的用藥目的，在今后的臨床研究中要對其進(jìn)行更為全面的研究.