碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌的臨床分布與耐藥性分析 *

薛 杰, 樊淑珍, 張粉娥

(1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科,內(nèi)蒙古呼和浩特010050; 2.呼和浩特市疾病預(yù)防控制中心)

腸桿菌科的一部分細(xì)菌在臨床感染中是最常見的重要病原菌,它們能夠引起的感染包括有泌尿生殖道感染、呼吸道感染、血液感染、腦脊髓膜個人以及醫(yī)院院內(nèi)感染等[1,2]。在臨床上常見到的有大腸埃希菌、陰溝腸桿菌、肺炎克雷伯菌等。近年來碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)在全球各地都呈現(xiàn)上升的趨勢[3,4],這給臨床的抗感染治療帶來了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)[5,6]。此次研究是通過對我院2年多來對耐碳青霉烯類抗菌藥物藥腸桿菌科的細(xì)菌分布以及它們的耐藥情況進(jìn)行了回顧性的分析,以便幫助臨床更加合理有效地去使用抗菌藥物,促使臨床規(guī)范合理地使用碳青霉烯類藥物,為臨床提供可靠參考數(shù)據(jù)依據(jù)。同時也為醫(yī)院院內(nèi)感染的監(jiān)測提供有效的幫助。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

收集了本院2017-01～2019-09各個臨床科室所有感染性標(biāo)本如上呼吸道感染的痰液、泌尿系感染的中段尿、全身感染的靜脈血、膿液以及分泌物等標(biāo)本。經(jīng)過分離培養(yǎng),篩選出耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細(xì)菌共計230株,由法國梅里埃公司制造的VITEK 2 Compact全自動微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng),對所收集到的全部菌株進(jìn)行鑒定以及藥敏試驗分析,使用紙片擴(kuò)散法(K-B)對亞胺培南的耐藥結(jié)果給與復(fù)核,用改良Hodge試驗對耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)的產(chǎn)酶情況進(jìn)行確認(rèn)。

1.2 方法

1.2.1耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細(xì)菌(CRE)的檢測 只要對亞胺培南和或美羅培南中的任何一種耐藥的腸桿菌科細(xì)菌及即視為CRE[7,8]。

1.2.2改良Hodge試驗方法[3]使用大腸埃希菌ATCC25922做指示菌株,用生理鹽水把標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC25922配制成為0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?再用生理鹽水稀釋10倍,均勻地涂抹在直徑9cm的MH瓊脂平皿上,待干3～10min后,再將美羅培南紙片貼在MH瓊脂平皿中心,然后按照離心方向,劃線接種待測菌株和質(zhì)控菌株,長度約為20至25毫米,35℃進(jìn)行培養(yǎng)18至24h。如果陽性對照菌株、待測菌株同時與大腸埃希菌ATCC25922抑菌環(huán)的交匯處,在抑菌圈內(nèi)出現(xiàn)一個矢狀生長,則待測菌株為陽性菌株。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用了WHONET5.6軟件對本次研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計處理。藥物敏感結(jié)果的判讀是參照2019版美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)的折點標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細(xì)菌(CRE)菌株的分布情況

共收集CRE230株,主要包括肺炎克雷伯菌(198株)、大腸埃希菌(15株)、陰溝腸桿菌(13株)和粘質(zhì)沙雷菌(4株)(見表1)。

2.2 耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)

菌株的標(biāo)本來源分布,來自呼吸道的痰液標(biāo)本的占50.00%,來自于膿液的占10.00%,來自于尿液標(biāo)本的占24.35%,其他占9.13%(見表2)。

2.3 耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)的菌株來源各科室分布狀況

58.69%的菌株來自在重癥監(jiān)護(hù)病房,其次是老干部保健病房約占13.48%,再次是腫瘤科病房占12.61%(見表3)。

表1 菌株分布及構(gòu)成比(n,%)

表2 標(biāo)本分布及構(gòu)成比(n,%)

表3 科室分布及構(gòu)成比(n,%)

耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),在臨床常見的抗菌藥物中表現(xiàn)為非常高的耐藥性，具體分析結(jié)果(見表4)。

表4 230株CRE耐藥率分析(%)

3 討論

耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細(xì)菌(CRE)之流行已經(jīng)成為全球性問題,在亞洲、歐洲、美洲甚至非洲等國家都有不同程度的流行[9]。

我國近十幾年來,從臨床感染病人標(biāo)本中分離到的耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),表現(xiàn)為逐年上升的趨勢。世界各地也針對耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌的流行區(qū)域也非常重視[9,10]。對我院近2年多來,耐碳青霉烯類抗菌藥物藥的腸桿菌科細(xì)菌耐藥狀況進(jìn)行一個回顧性的分析,在這次分析的耐藥菌株里以肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為主,這次收集到230株耐碳青霉烯類藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),其中排在首位的是肺炎克雷伯菌,其次是大腸埃希菌。肺炎克雷伯菌(198株,占86.10%)、大腸埃希菌(15例,占6.52%)、陰溝腸桿菌(13株,占5.65%),與國內(nèi)相關(guān)報道數(shù)據(jù)比較一致[11,12]。其中痰標(biāo)本115株(50%)是耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)標(biāo)本主要來源,其次是尿液檢出56株(24.35%),其他如血液、膿液等部位分別有檢出耐碳青霉烯類藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)?？剖曳植际?135株來自各個重癥監(jiān)護(hù)病房(58.69%),31株來分離自老干部保健病房(13.48%),29株來自腫瘤科病房(12.61%),22株來自血液科病房(9.57%)等。此次研究中,耐碳青霉烯類藥物的肺炎克雷伯菌株數(shù)遠(yuǎn)大于大腸埃希菌和的陰溝腸桿菌株數(shù),分析其原因如下:一方面是臨床送檢標(biāo)本中以呼吸道來源的標(biāo)本居多,并且從呼吸道的分離到的病原菌中主要是肺炎克雷伯菌;另一方面是這些耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),大多數(shù)來源于各重癥監(jiān)護(hù)病房和老干部保健病房,這些病人的共同特點是感染比較嚴(yán)重,使用碳青霉烯類抗菌藥物機(jī)會多而且周期長。

本次研究分析的230株耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),對臨床中常見的抗菌藥物表現(xiàn)為高度耐藥,其中,對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林,頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南,頭孢替坦等,表現(xiàn)為100%的耐藥。對于丁胺卡那霉素、慶大霉素的耐藥率也均大于80%。對于四環(huán)素和復(fù)方新諾明也大于90%。對于左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的耐藥率為100%。這與不規(guī)范臨床長期不合理使用碳青霉烯類抗菌藥物有很大的相關(guān)性。耐碳青霉烯類藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE),主要的耐藥機(jī)制有:產(chǎn)生碳青霉烯酶,碳青霉烯酶屬于β-內(nèi)酰胺酶,能夠水解碳青霉烯類抗菌藥物,是CRE 最常見的耐藥機(jī)制。外膜蛋白改變,當(dāng)某種膜孔蛋白缺失或表達(dá)降低,相應(yīng)的抗菌藥物不能通過擴(kuò)散穿過細(xì)菌細(xì)胞膜進(jìn)入菌體,從而導(dǎo)致細(xì)菌對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥。外排泵高表達(dá)存在于細(xì)菌的細(xì)胞膜上,細(xì)菌外排泵,可將細(xì)胞內(nèi)的抗菌藥物主動泵出,細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的抗菌藥物濃度會下降,從而不能有效地抑制細(xì)菌而產(chǎn)生耐藥[13]。

耐碳青霉烯類藥物的腸桿菌科細(xì)菌(CRE)主要在重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)和腫瘤科病區(qū)容易形成感染,在醫(yī)院院內(nèi)感染的控制工作中,應(yīng)該加強(qiáng)督導(dǎo)合理使用抗菌藥物,尤其是碳青霉烯類抗菌藥物,對于減少耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌在醫(yī)院感染的發(fā)生,以及病人的預(yù)后有著積極保護(hù)的作用。