非洲豬瘟研究進(jìn)展摘譯

非洲豬瘟病毒pE66L 蛋白可通過(guò)PKR/EIF2 途徑抑制宿主翻譯

非洲豬瘟病毒（ASFV）是對(duì)豬最具傳染性和致命性的病毒之一，已在許多國(guó)家造成流行，近幾年傳播到中國(guó)，但目前尚未獲得許可的疫苗或治療方法。盡管科學(xué)家已進(jìn)行了廣泛研究，但ASFV編碼的蛋白質(zhì)如何抑制宿主翻譯這一問(wèn)題仍然未知。本文探討了ASFV 干擾宿主翻譯并優(yōu)化自身基因表達(dá)的分子機(jī)制。

經(jīng)研究，有14種ASFV蛋白對(duì)海腎熒光素酶（Rluc）活性的抑制作用超過(guò)5倍，其中抑制作用最強(qiáng)的是pE66L蛋白。結(jié)合生物信息學(xué)分析和生化試驗(yàn)結(jié)果，確定了pE66L的跨膜（TM）結(jié)構(gòu)域（氨基酸13-34）在抑制宿主基因表達(dá)中的關(guān)鍵作用。另外，通過(guò)構(gòu)建重組質(zhì)粒，使TM結(jié)構(gòu)域與增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）相連，進(jìn)一步證明該結(jié)構(gòu)域可廣泛抑制蛋白質(zhì)合成；共聚焦試驗(yàn)和生化分析表明，TM結(jié)構(gòu)域可幫助蛋白質(zhì)定位到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER），之后激活PKR/eIF2α途徑抑制宿主翻譯。刪除pE66L基因?qū)Σ《驹诰奘杉?xì)胞中復(fù)制幾乎沒(méi)有影響，但能顯著恢復(fù)宿主基因的表達(dá)。

綜上所述，ASFV 的pE66L 蛋白可通過(guò)激活PKR/eIF2 α通路誘導(dǎo)宿主翻譯關(guān)閉。

某商品豬場(chǎng)非洲豬瘟暴發(fā)調(diào)查及傳染源鑒定方法

非洲豬瘟（ASF）是一種由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的家豬和野豬傳染病。近年來(lái)，這種疾病在全球廣泛蔓延，給豬肉生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本研究描述了在中國(guó)一個(gè)大型商業(yè)養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生的非洲豬瘟疫情。

疫情始于2018 年，在集約化養(yǎng)豬場(chǎng)中呈時(shí)空傳播。靠近出口的豬舍感染風(fēng)險(xiǎn)更高（優(yōu)勢(shì)比=14.4，95% CI：1.5-140）。據(jù)推測(cè)，疫病的傳入是由于運(yùn)輸車輛被ASFV污染（該車輛曾用于銷售生產(chǎn)率較低的生豬）。本項(xiàng)調(diào)查顯示了ASFV 感染和在假定有足夠生物安全措施環(huán)境中的傳播過(guò)程，將有助于大型養(yǎng)豬場(chǎng)控制ASF。

基于P30單克隆抗體的非洲豬瘟病毒膠體金試紙條的制備

由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的非洲豬瘟（ASF）于1921 年在肯尼亞首次報(bào)道，但目前仍沒(méi)有有效的疫苗或抗病毒藥物?？焖俸陀行У脑\斷是處理ASF 疫情的關(guān)鍵。本研究制備了兩株針對(duì)ASFV磷蛋白P30的單克隆抗體（MAbs），分別命名為3H7A7和6H9A10。

表位分析顯示MAb 3H7A7 和6H9A10 分別識(shí)別P30的aa 144-154和aa 12-18?；谶@2株單克隆抗體，科研人員開發(fā)了用于快速檢測(cè)ASFV 的膠體金試紙條。靈敏度和特異性分析表明，該條帶的檢出限為2.16 ng P30，且該試紙條僅與ASFV 反應(yīng)，與其他常見豬病毒無(wú)交叉反應(yīng)。通過(guò)檢測(cè)153份臨床現(xiàn)場(chǎng)樣本（包括血清、血漿、組織和抗凝血處理過(guò)的血液），本試紙條與Real-time PCR 的一致性為95.42%。

凍干粉實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)中國(guó)家豬血液樣本中非洲豬瘟病毒的新方法

非洲豬瘟（ASF）是一種嚴(yán)重的豬傳染病，給中國(guó)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，迫切需要開發(fā)一種快速、特異、靈敏的診斷方法檢測(cè)非洲豬瘟病毒（ASFV）。本研究建立了一種新型的實(shí)時(shí)定量PCR 方法，該方法利用凍干粉末試劑（LPR），以主要結(jié)構(gòu)蛋白P72為靶點(diǎn)，可用于ASFV的快速檢測(cè)。

經(jīng)試驗(yàn)，該方法對(duì)ASFV 質(zhì)粒模板的靈敏度為100拷貝/ul，比OIE 推薦的qPCR 方法靈敏度高10 倍；特異性分析表明，針對(duì)ASFV 的qPCR-LPR 與其他重要的豬病原體沒(méi)有交叉反應(yīng)；在我國(guó)218 份家豬血液樣本的臨床診斷中，本試驗(yàn)建立的qPCR-LPR 方法和商用qPCR 試劑盒檢測(cè)ASFV 的陽(yáng)性率分別為80.73%（176/218）和76.61%（167/218），經(jīng)SPSS 分析，兩種方法的符合率為92.20%（201/218），kappa 值為0.768（p＜0.0001），兩種檢測(cè)方法的總體一致性為95.87%（209/218），進(jìn)一步的Pearson 相關(guān)和線性回歸分析顯示兩種方法之間有顯著的相關(guān)性，R2值為0.9438。本研究建立的qPCR-LPR 方法，可在2 h 內(nèi)完成從樣本處理到結(jié)果報(bào)告的整個(gè)過(guò)程。

以上結(jié)果表明，qPCR-LPR檢測(cè)是一種很好的實(shí)驗(yàn)室診斷工具，可以靈敏有效地檢測(cè)ASFV。

2019-2020 年越南流行的非洲豬瘟病毒（ASFV）的分子特征

非洲豬瘟（ASF）是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的一種高度傳染性動(dòng)物疫病。為了確定在越南傳播的ASFV菌株之間的遺傳變異關(guān)系，對(duì)2019-2020 年從越南北部、中部和南部23個(gè)不同省份采集的家豬器官和血液樣本中的26株ASFV分離株進(jìn)行了遺傳特征分析。

對(duì)部分B646L（p72）和EP402R（CD2v）基因序列以及全長(zhǎng)E183L（p54）基因序列的分析表明，所有26 株ASFV分離株均屬于基因型II和血清型VIII，這與Georgia/2007/1和中國(guó)所有測(cè)序菌株一致。I73R 和I329L 基因之間的TRS 包含10 個(gè)核苷酸的插入，這與2018 年從家豬分離的中國(guó)ASFV株CN201801一致，但在Georgia/2007/1和中國(guó)/吉林/2018株中未觀察到?！?/p>