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      酶聯(lián)免疫吸附試驗與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中的應用

      2021-01-10 16:31:56韋清青
      中國藥學藥品知識倉庫 2021年16期
      關(guān)鍵詞:免疫吸附螺旋體苯胺

      韋清青

      摘要:目的 對比分析甲苯胺紅不加熱血清試驗(tolulized red unheated serum test,TRUST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)在梅毒檢驗中的價值。方法 將2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者給予TRUST與梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(treponema pallidum particle assay,TPPA)檢驗,并與2020年1月至12月233例實施ELISA+TPPA+TRUST檢驗結(jié)果對比。結(jié)果 TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA12.44%,存在差異(P<0.05)。結(jié)論 TRUST+TPPA+ELISA檢驗方式在梅毒中檢出率更高,值得臨床廣泛推廣應用。

      關(guān)鍵詞:梅毒螺旋體感染;甲苯胺紅不加熱血清試驗;梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗;梅毒;酶聯(lián)免疫吸附試驗

      【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306(2021)16-01

      近年來,隨著人們生活方式與理念的改變,梅毒感染人群越來越多。梅毒由梅毒螺旋體(treponema palludim,TP)感染所致,具有較大危害性、傳染性,常見傳播方式為性行為傳播、血液傳播、胎盤垂直傳播等[1-2]。另外,該病臨床癥狀較復雜,早期多于生殖器官上出現(xiàn)硬下疳,且隨臨床分期加重,病原體隨血液循環(huán)向全身擴散,逐漸侵襲體內(nèi)多器官,進而威脅到患者生命健康[3]。目前針對梅毒主要以早確診、早治療,血清學檢測是臨床診斷常用方式包含梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(treponema pallidum particle assay,TPPA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(tolulized red unheated serum test,TRUST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)等,TPPA雖臨床診斷準確性高,但其費用極高,存在一定局限性,難以作為常規(guī)篩查項目[4-5]。現(xiàn)就其他兩種檢測進行對比,分析其在梅毒檢測中的臨床價值。如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      將2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者給予TRUST與梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(treponema pallidum particle assay,TPPA)檢驗,其中,男性65例,女性168例,年齡20~70歲,平均(45.02±1.04)歲,與2020年1月至12月233例實施ELISA+TPPA+TRUST的患者中男性64例,女性169例,年齡20~70歲,平均(45.10±1.09)歲。納入兩組疑似梅毒患者一般資料對比無差異(P>0.05)。

      1.2 方法

      所有患者就診后給予TRUST、ELISA、TPPA進行TP陽性檢測。(1)TRUST:在加樣卡片圈中放置50ul血清樣本,均勻涂在整個卡片圈,輕搖勻抗原液,試劑盒由上海榮盛生物藥業(yè)有效公司所產(chǎn),試劑盒提供針頭加入抗原液1滴,之后將卡片放置到立體脫色搖床上,且以100r/min速度進行振蕩,搖勻8分鐘,在亮光下立即觀察結(jié)果。通常以圓圈內(nèi)出現(xiàn)紅色或粉色絮狀物為陽性。(2)ELISA(英科新創(chuàng)(廈門)科技有效公司):具體操作:分別在相應孔中加入100uL陰、陽性對照血清或待測樣本,覆上封板膜置37℃溫育60分鐘,用洗滌液充分洗滌5次,洗滌后扣干(每次應保持30-60秒的浸泡時間),并分別在每孔中加入酶標記抗原100uL,隨后再次覆上封板膜溫育30分鐘,洗滌5次,洗滌后扣干(每次應保持30-60秒的浸泡時間),之后每孔加底物A、B各50uL,輕拍混勻,暗置30分鐘后每孔加入終止液50uL,混勻。測定時用酶標儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(用單波長測定時,需用空白對照孔調(diào)零),并記錄結(jié)果。操作完畢將兩組檢驗結(jié)果進行觀察和對比。

      1.3統(tǒng)計學處理

      采用SPSS21.0統(tǒng)計分析軟件,符合正態(tài)分布的計量資料以()表示,兩組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料以率表示,兩組間比較采用X2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

      2 結(jié)果

      TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA 12.44%,存在差異(P<0.05),見表1:

      3 討論

      近些年來,我國梅毒感染患者持續(xù)增加,成為報告病例數(shù)最多的性病梅毒傳染性強、潛伏期長,潛伏期及Ⅱ期患者臨床癥狀不明顯,多表現(xiàn)為皮膚病,易被患者所忽略,而梅毒患者感染艾滋病是健康人群5倍以上,對此,加強對TP的檢測極為重要[6-7]。

      TPPA是敏感性、特異性高的檢測方式具有良好的診斷準確性,但其收試劑價格的限制,從而難以被臨床廣泛使用,因此,無法作為常規(guī)篩查的項目[8]。ELISA法是以已經(jīng)工程重組抗原研制的方式,可對血清中梅毒特異性抗體檢測,在梅毒診斷中具有極高敏感度,適于大規(guī)模數(shù)據(jù)篩查和疾病的診斷。TRUST是以非特異類脂質(zhì)抗原進行抗心磷脂抗體檢測,該類抗原多數(shù)和其他非特異行抗體出現(xiàn)交叉反應,故診斷性不高[9-10]。由本文研究結(jié)果呈現(xiàn),TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA 12.44%,存在差異(P<0.05)。并和周曉玲[11]學者研究結(jié)果相似。就其原因,ELISA法酶純度高、催化反應的轉(zhuǎn)化率高,具有較高專一性,并且性能穩(wěn)定,靈敏度顯著高于凝集反應,該方式可同時用于檢測血清中梅毒抗體IgM和IgG,因此,易檢出梅毒抗體弱陽性標本,結(jié)合酶化學反應的抗體與抗原反應的特異性和敏感性,故有效提高了該方式的減出率[12-13]。

      綜上所述,TRUST+TPPA+ELISA檢驗方式更具有價值,患者檢出率更高。

      參考文獻:

      [1] 何小霞,馮月平. 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗和梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗及梅毒螺旋體明膠顆粒凝集確證試驗在梅毒血清學檢測中的應用價值分析[J]. 中國現(xiàn)代藥物應用,2021,15(9):74-76.

      [2] 宋勝偉,曾茜茜. 酶聯(lián)免疫吸附試驗法與甲苯胺紅不加熱血清試驗法檢測梅毒螺旋體感染的臨床價值[J]. 醫(yī)療裝備,2020,33(11):66-67.

      [3] 李春樹. 酶聯(lián)免疫吸附試驗法與甲苯胺紅不加熱血清試驗法診斷梅毒螺旋體感染的臨床價值比較[J]. 中國民康醫(yī)學,2020,32(19):98-99.

      [4]張暢. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中應用價值的比較[J]. 臨床醫(yī)藥文獻電子雜志,2019,6(84):147-148.

      [5] 吳曉燕,藍蔚蔚,譚曉霞,等. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中的價值對比[J]. 中國地方病防治雜志,2019,34(5):577,579.

      [6] 吳昊. 酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中診斷價值的比較[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志,2017,38(23):3298-3299,3302.

      [7] 馬潔瓊,邢文革,蔣巖. 干血斑樣本用于梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法的初步評價及應用研究[J]. 中國艾滋病性病,2020,26(5):517-521.

      [8] 姜黎黎,張玉萍,尚愛民. 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗作為初篩方法的梅毒逆向篩查程序的可行性分析[J]. 中國性科學,2018,27(11):112-114.

      [9] 蔣剛健. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中對比分析[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學,2017,40(5):170-171.

      [10]梁服泉,朱秀蘭,彭健華. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中應用對比[J]. 中國實用醫(yī)藥,2016,11(13):20-21.

      [11] 周曉玲,駱佳柱. 酶聯(lián)免疫吸附試驗與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中的效果比較[J]. 中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥,2019,26(6):52-53.

      [12]李胡煥,潘寶龍. 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗和甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢測中的應用[J]. 醫(yī)療裝備,2016,29(17):60-62.

      [13]周占東. 酶聯(lián)免疫吸附試驗法和甲苯胺紅不加熱血清試驗法在各期梅毒螺旋體抗體檢測中的效果對比觀察[J]. 實用醫(yī)技雜志,2019,26(5):582-584.

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