李文芳，李春娜，林文珍，李克學(xué)，唐 苗，劉丹丹

（中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院1.臨床檢驗(yàn)科；2.感染科，廣東 珠海 519000）

慢性腎臟病（Chronic kidney disease，CKD）是一種慢性進(jìn)展性疾病，嚴(yán)重危害人類健康，早期臨床表現(xiàn)常由于缺乏明顯和特異性的癥狀和體征容易被漏診，研究顯示約30%的患者在首次就診時(shí)就已經(jīng)患有慢性腎臟疾病[1]，因此予以腎臟疾病患者早期而有效的診斷很有必要。目前尿液常規(guī)和沉渣檢查是目前檢查腎臟疾病的常用檢測(cè)方法，也是腎臟疾病治療的常用監(jiān)測(cè)指標(biāo)[2]；顯微鏡鏡檢結(jié)果較為準(zhǔn)確，但需大量的人力投入以及結(jié)果易受主觀因素影響，隨著尿沉渣檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化的推廣和普及，有許多尿液沉渣檢驗(yàn)專用儀器，無論是何種儀器法操作均簡(jiǎn)單及高效[3-4]；慢性腎臟疾病患者尿液中各種有形成分有多種形態(tài)學(xué)的變化，尤其紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化較為多樣性，因此針對(duì)慢性腎臟疾病患者是否可用儀器法完全替代人工鏡檢仍有待商榷。因此本文將運(yùn)用沉渣發(fā)針對(duì)腎臟疾病患者的尿液檢測(cè)，同時(shí)以人工顯微鏡鏡檢檢測(cè)作為標(biāo)準(zhǔn)，探討不同的尿沉渣儀器檢測(cè)法在腎臟疾病患者中的檢測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院在2020年8月收治的31例患者的尿液樣本和53例腎臟疾病患者作為研究對(duì)象，其中女性56例，男性27例，年齡17～87歲。通過比較數(shù)字顯微鏡成像檢查和染色流式細(xì)胞儀法在尿液有形成分如紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型計(jì)數(shù)的檢測(cè)結(jié)果的差異。

1.2 主要儀器與試劑

人工鏡檢法使用奧林巴斯顯微鏡進(jìn)行，而數(shù)字顯微鏡成像尿沉渣檢測(cè)使用Cobas u701有形成分分析儀和染色流式細(xì)胞儀法尿沉渣檢測(cè)用希森美康UF-5000i有形成分分析儀，以上兩臺(tái)設(shè)備均采用配套的試劑。

1.3 方法

同一份尿液標(biāo)本分別在Cobas u701有形成分分析儀和希森美康UF-5000i有形成分析儀上進(jìn)行尿液有形成分檢測(cè)。儀器檢測(cè)后，將剩余的尿液標(biāo)本以1500 rpm，離心5分鐘，棄上清，沉渣涂片人工鏡檢。尿液為均為清晨的中段尿，所有的檢查結(jié)果均在2h內(nèi)檢查完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本文中所有的數(shù)據(jù)分析均采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用x2檢驗(yàn)。若P＜0.05則表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異。

2 結(jié) 果

2.1 兩種方法一致性分析

為了檢測(cè)兩種不同的檢測(cè)方法在在常規(guī)患者的檢測(cè)中尿液檢測(cè)結(jié)果是否存在一致性，我們通過檢測(cè)31名隨機(jī)患者的尿液，結(jié)果顯示染色流式細(xì)胞儀法和數(shù)字顯微鏡成像檢查法在紅細(xì)胞和白細(xì)胞的計(jì)數(shù)均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（圖1A和B）；進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)在腎小球疾病患者中染色流式細(xì)胞儀法檢測(cè)的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)要明顯高于數(shù)字顯微鏡成像檢查法，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）（圖1C和D）。

2.2 兩種方法學(xué)在尿液紅細(xì)胞和白細(xì)胞、管型與顯微鏡鏡檢符合率的比較

人工鏡檢是尿液有形成分是臨床尿液常規(guī)檢查的金標(biāo)準(zhǔn)，本研究的尿液有幸成分的人工鏡檢有2名有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員對(duì)尿液標(biāo)本進(jìn)行人工鏡檢，對(duì)兩種方法學(xué)在紅細(xì)胞和白細(xì)胞與顯微鏡鏡檢符合率進(jìn)行評(píng)估比較，結(jié)果顯示染色流式細(xì)胞儀法實(shí)驗(yàn)組的紅細(xì)胞鏡檢陽性19例，陰性28例；白細(xì)胞鏡檢陽性28例，陰性21例，管型鏡檢陽性4例，陰性48例；數(shù)字顯微鏡成像檢查法實(shí)驗(yàn)組的紅細(xì)胞鏡檢陽性18例，陰性32例；白細(xì)胞鏡檢陽性28例，陰性20例，管型鏡檢陽性2例，陰性42例；染色流式細(xì)胞儀法的紅細(xì)胞和白細(xì)胞的符合率分別為91%和93%，數(shù)字顯微鏡成像檢查法的紅細(xì)胞和白細(xì)胞的符合率分別為85%和93%，顯然前者要略高于后者且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見表1）。

表1 兩種方法與人工鏡檢檢測(cè)（n）

3 討 論

機(jī)體在正常情況下尿液并不會(huì)出現(xiàn)大量的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型等有形成分，若在尿液標(biāo)本中檢測(cè)出紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型可提示患者的腎臟或者泌尿系統(tǒng)出現(xiàn)異常，尤其顯微鏡鏡下血尿和鏡下管型是提示腎性疾病的重要線索，也是明確腎性疾病類型的依據(jù)之一[5-6]，多項(xiàng)研究也證實(shí)于腎臟疾病患者采取尿沉渣化學(xué)方法檢測(cè)尿液的準(zhǔn)確性較高[7-8]，因此能夠早期和準(zhǔn)確的檢測(cè)尿液中各種細(xì)胞類型將有助于提高腎性疾病的診斷準(zhǔn)確率和監(jiān)測(cè)治療的有效性。目前在臨床檢驗(yàn)中對(duì)于尿液沉渣有形成分檢測(cè)原理主要有數(shù)字顯微鏡成像檢查和染色流式細(xì)胞儀法，其中染色流式細(xì)胞儀法主要是通過對(duì)尿液中各種有形成分進(jìn)行細(xì)胞膜和細(xì)胞核熒光染色，通過對(duì)各種有形成分所產(chǎn)生的散射光、熒光和電阻變化檢測(cè)計(jì)算出各種有形成分的含量；而數(shù)字顯微鏡成像尿沉渣檢測(cè)法主要是通過拍攝全景圖片并且提供與人眼在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞有形成分一致的圖像，最終通過神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析軟件對(duì)圖像內(nèi)的成分進(jìn)行識(shí)別和計(jì)數(shù)[9]。在本研究分析中發(fā)現(xiàn)，針對(duì)腎臟疾病患者，兩種方法學(xué)在紅細(xì)胞的檢出率中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并且染色流式細(xì)胞儀法與鏡檢符合率更明顯高于數(shù)字顯微鏡成像尿沉渣檢測(cè)法，究其原因可能是由于數(shù)字顯微鏡成像在檢測(cè)過程中對(duì)某些層別的細(xì)胞識(shí)別效率減低甚至無法識(shí)別，因此與鏡檢的符合率有所減少[10]；數(shù)據(jù)顯示，染色流式細(xì)胞法在檢測(cè)紅細(xì)胞時(shí)存在一定的假陽性，鏡檢發(fā)現(xiàn)這類假陽性標(biāo)本主要是由于含有細(xì)小的草酸鈣結(jié)晶，在形態(tài)上與小紅細(xì)胞形態(tài)類似，因此染色細(xì)胞流式法存在一定的假陽性[11]；另外我們認(rèn)為在數(shù)字顯微圖像法出現(xiàn)一定的假陽性可能是由于腎小球源性的紅細(xì)胞因受到腎臟系統(tǒng)中不同的酸堿環(huán)境和滲透壓的影響會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化[12]，因此可能運(yùn)用數(shù)字顯微鏡成像檢查法時(shí)對(duì)紅細(xì)胞的檢測(cè)可能存在漏診，本研究中數(shù)字顯微鏡成像檢查所漏診的患者尿液中的紅細(xì)胞陽性率要略高于色流式細(xì)胞儀法檢測(cè)法的結(jié)果也證實(shí)這一點(diǎn)。另外，尿液中出現(xiàn)管型成分提示患者的腎小球或者腎小管存在腎實(shí)質(zhì)性損害，針對(duì)腎小球疾病患者運(yùn)用數(shù)字顯微鏡成像檢查對(duì)于管型成分識(shí)別與鏡檢符合率要明顯低于染色流式細(xì)胞法，但是檢出的假陽性略高，這主要是由于前者常將尿液中的粘液絲和卷曲的上皮細(xì)胞誤判為病理性管型，以及管型由于在組成成分、形態(tài)和性質(zhì)管型具有多種類型，因此染色流式細(xì)胞法與鏡檢符合率上更優(yōu)于數(shù)字顯微鏡成像法。臨床工作發(fā)現(xiàn)顯微鏡鏡檢雖具有較高的臨床價(jià)值，但耗時(shí)耗力，尤其對(duì)檢驗(yàn)人員資質(zhì)要求高，但無論染色流式細(xì)胞法還是數(shù)字顯微鏡成像法的都具有高效率和速度快的特點(diǎn)，結(jié)合以上結(jié)果可以看出，無論是何種方法學(xué)的尿液沉渣檢測(cè)，都無法完全替代人工鏡檢法，因此在臨床檢驗(yàn)中，針對(duì)腎臟疾病患者都應(yīng)在儀器法檢測(cè)的基礎(chǔ)上及時(shí)進(jìn)行人工鏡檢確認(rèn)，這樣才能保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性、避免誤診漏診的事件發(fā)生。