藏綿羊卵巢組織學(xué)及卵泡超微形態(tài)的觀察

郭亞軍，柳苗苗，付德海，冉興榮，王欣榮

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州 730070)

哺乳動物發(fā)情周期按卵泡發(fā)育、排卵和黃體形成的規(guī)律可分為卵泡期和黃體期，兩者交替進(jìn)行，主要受下丘腦-垂體-卵巢軸所分泌的激素調(diào)控[1]。黃體和卵泡的發(fā)育對于維持雌性動物正常的生殖至關(guān)重要。卵巢經(jīng)歷卵泡發(fā)育和黃體形成與退化等一系列動態(tài)變化過程，也是主要性激素和生長因子產(chǎn)生的場所。研究顯示，卵巢能分泌雌激素、孕激素、雄激素、催產(chǎn)素、卵泡抑素、激活素及生長因子等物質(zhì)[2]。卵泡和黃體的生理活動受神經(jīng)激素的調(diào)節(jié)和外界環(huán)境條件的交互影響,而卵泡發(fā)育主要以卵泡波的方式出現(xiàn)，依次經(jīng)歷原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡、三級卵泡和成熟卵泡等階段[3-4]。在卵泡的生長發(fā)育過程中，絕大多數(shù)的卵泡會發(fā)生閉鎖和退化, 最終，只有少數(shù)卵泡能發(fā)育成熟至排卵[1, 3]。卵母細(xì)胞的發(fā)育狀況與卵泡發(fā)育過程的命運密切相關(guān)，受內(nèi)分泌激素的調(diào)節(jié)和卵巢內(nèi)細(xì)胞因子生理作用的影響[5-6]。

藏綿羊長期在高寒低氧環(huán)境下繁衍生息，其繁殖率低下，產(chǎn)羔率只有105%[7]。目前認(rèn)為，藏綿羊發(fā)情率和排卵率不高是造成其產(chǎn)羔率低的主要原因，另外也是環(huán)境及遺傳因素交互影響的結(jié)果。目前，對于藏綿羊在卵巢發(fā)育過程中特別是卵泡及黃體的組織學(xué)變化，相關(guān)研究尚不多見。本研究采用解剖學(xué)和組織學(xué)方法，對藏綿羊的卵巢形態(tài)、卵泡和黃體的組織構(gòu)造以及卵泡的超微形態(tài)進(jìn)行觀察，探討組織學(xué)特征與其生理功能的關(guān)系，以揭示藏綿羊在發(fā)情期卵巢的組織學(xué)變化，為今后生產(chǎn)實踐中采取合適的繁殖調(diào)控措施、提高產(chǎn)羔率提供理論依據(jù)，也可為高原家畜卵巢生理學(xué)研究提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2019年9月在甘肅省夏河縣(海拔3 200 m)采集12只成年(2～3歲)、平均體重為38.3～46.4 kg的健康藏綿羊雙側(cè)卵巢，根據(jù)表面特征將樣本分為卵泡期和黃體期卵巢，各12枚。卵泡期卵巢表面光滑、形狀扁圓、顏色呈半透明、觸感較軟、富有彈性和波動感，表面有類似黃豆大小的紅色斑塊；黃體期卵巢表面粗糙且觸感較硬，可見紅色扁平狀或錐形的突起，形狀呈不規(guī)則的三角形，其大小占據(jù)卵巢體積的2/3。

1.2 主要儀器設(shè)備及試劑

石蠟切片機(jī)(上海徠卡儀器有限公司 RM2016)；正置光學(xué)顯微鏡(日本尼康)；游標(biāo)卡尺(上海恒量量具有限公司，0～150 mm)；自動脫水機(jī)、包埋機(jī)和凍臺(武漢俊杰電子有限公司 JJ-12 J、JB-P5、JB-L5)；組織攤片機(jī)(浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司 KD-P)；波切片機(jī)(Leica UC7)；透射電子顯微鏡(HITACHI HT770)；烤箱(天津市萊玻瑞科儀器設(shè)備有限公司 GFL-230)；顯微鏡(Olympusdp-71)。蘇木精染液(武漢谷歌生物科技有限公司)；無水乙醇、二甲苯、鹽酸和中性樹膠(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；電鏡固定液(Servicebio)；812包埋劑(SPI)。

1.3 試驗方法

1.3.1 卵巢物理參數(shù)的測量和組織切片制作 分別測量左、右兩側(cè)卵巢的長、寬、厚并稱重，取3 cm3新鮮組織，置于4%甲醛固定液中固定，經(jīng)脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、粘片和烤片，脫蠟至水后將切片用蘇木素染色，鹽酸分化，氨水反藍(lán)，水洗后依次投入梯度酒精中脫水，再入伊紅染色，無水乙醇、二甲苯中透明，然后用中性樹膠封片，鏡檢和采集圖像。

1.3.2 透射電鏡制片步驟 取新鮮卵巢皮質(zhì)部組織塊，進(jìn)行修塊，體積為1 mm3，迅速投入4 ℃電鏡固定液中固定4 h。先用0.1 mol·L-1磷酸緩沖液漂洗3次，15 min·次-1，再用1%餓酸和0.1 mol·L-1磷酸緩沖液室溫固定2 h，最后，再用0.1 mol·L-1磷酸緩沖液漂洗3次，15 min·次-1。將組織依次從50%、70%、80%、90%、95%、100%的酒精、100%的丙酮中各脫水15 min。置于丙酮和包埋劑等體積混合稀釋滲透2 h，丙酮和包埋劑按2∶1稀釋滲透過夜，而在純包埋劑中滲透7 h后置于包埋板中37 ℃ 過夜，60 ℃聚合48 h后,用超薄切片機(jī)超薄切片，厚度為60～80 nm，進(jìn)行鈾鉛雙染色后(2%醋酸鈾飽和酒精溶液，枸櫞酸鉛，各染色15 min)，置于透射電子顯微鏡下進(jìn)行圖像采集與分析。

1.4 數(shù)據(jù)采集與分析

組織切片制作完成后置于顯微鏡下觀察并對重復(fù)3個以上的視野進(jìn)行拍照，采集其整體或局部照片，運用Image pro plus 6.0軟件測量卵泡的物理參數(shù)。用游標(biāo)卡尺測定卵巢的長、寬、厚等指標(biāo)。數(shù)值用SPSS 19.0進(jìn)行T檢驗，分析差異顯著性，其結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 藏綿羊卵巢的物理特征和組織形態(tài)

卵巢發(fā)育階段主要以卵泡和黃體的特征為劃分依據(jù)，卵泡期卵巢主要由處在不同發(fā)育時期、大小不等的卵泡組成，大多數(shù)卵泡靠近卵巢表面呈石榴籽樣(圖1A)。黃體期的卵巢呈橢圓狀，其邊緣有錐口形和火山口型的兩種黃體類型(圖1C)。測定顯示，卵泡期和黃體期卵巢的長度和重量無顯著差異(P>0.05)，而寬度和厚度差異顯著(P<0.05)。此外，卵巢皮質(zhì)和髓質(zhì)的面積分別占卵巢實質(zhì)的面積比例也不同，卵泡期卵巢的皮質(zhì)面積占比大于黃體期(表1)。解剖時根據(jù)卵泡直徑大小將其劃分為3類，分為大(直徑>5 mm)、中(3 mm<直徑<5 mm)、小(直徑<3 mm)卵泡(圖1A)。切片觀察顯示，卵巢皮質(zhì)有許多不同發(fā)育時期的卵泡，以及卵泡的副產(chǎn)物紅體和黃體；卵巢基質(zhì)中含有膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、平滑肌纖維及細(xì)小血管；中央髓質(zhì)范圍較小，主要由疏松結(jié)締組織和豐富的血管構(gòu)成(圖1E)；卵巢門系膜處有許多上皮樣細(xì)胞和靜脈血管以及輸卵管傘形成的大量小血管通過卵巢門進(jìn)入卵巢髓質(zhì)(圖1B、1D)。

表1 卵巢組織的物理學(xué)參數(shù)

A.卵泡期卵巢, 表面有大小不等的卵泡; B.卵巢門處的上皮樣細(xì)胞群和平滑肌; C.暗紅色的肉團(tuán)狀突起的黃體: CL.黃體; D.卵巢門處的輸卵管傘部特征; E.卵巢組織結(jié)構(gòu)橫切圖：F.卵泡; TA.白膜; CH.紅體; C.皮質(zhì); M.髓質(zhì); FA.卵泡腔; AF.閉鎖卵泡

2.2 藏綿羊黃體的組織學(xué)特征

觀察可見，卵泡內(nèi)膜和顆粒細(xì)胞發(fā)生黃體化時先形成紅體(圖2A)。卵泡內(nèi)膜的毛細(xì)血管逐漸伸入腔內(nèi)，顆粒細(xì)胞體積增大，卵泡液逐漸消失且卵泡腔出現(xiàn)許多黃體小梁(圖2B、D)。卵泡顆粒細(xì)胞黃體化后形成顆粒黃體細(xì)胞，卵泡內(nèi)膜細(xì)胞變圓，形成膜黃體細(xì)胞，并成團(tuán)聚集分布于皺褶處(圖2C)。隨著黃體進(jìn)一步發(fā)育成熟，結(jié)締組織和小梁消失，兩種細(xì)胞開始增生且結(jié)構(gòu)明顯，顆粒黃體細(xì)胞體積顯著增大呈橢圓形，直徑約為50 μm，胞質(zhì)呈深紅色，胞核大而圓，核仁染色淺且位于黃體中央。膜黃體細(xì)胞主要分布在黃體的周邊部，隨著結(jié)締組織深入，分散于顆粒黃體細(xì)胞之間，數(shù)量相對較少，胞質(zhì)和核染色深，胞體小呈紡錘狀，直徑約為22 μm。此時，黃體內(nèi)形成豐富的毛細(xì)血管且參差交替在其中，顆粒黃體細(xì)胞間也存在豐富的網(wǎng)狀纖維和血管，尤其是以血管為中心呈條帶狀和放射狀分布(圖2E、F)。

A.卵泡形成早期紅體; B.血管破裂形成紅體; C.紅體黃體化; D.紅體發(fā)生纖維化形成黃體小梁; E.黃體組織結(jié)構(gòu)特征; F.黃體的結(jié)構(gòu)特點: V.血管; GLC.顆粒黃體細(xì)胞; TLC.膜黃體細(xì)胞

2.3 藏綿羊卵泡的組織學(xué)特征

研究顯示，原始卵泡數(shù)量多且排列于皮質(zhì)淺層，體積較小，直徑為36.4～38.4 μm，面積為1 366.4～1 768.2 μm2，卵泡細(xì)胞與周圍的結(jié)締組織以薄層基膜相隔(圖3A)。原始卵泡中的初級卵母細(xì)胞染色質(zhì)細(xì)小且染色淺，核仁明顯呈扁圓形，直徑為8.3～10.2 μm。初級卵泡的直徑為60.3～70.2 μm，面積為4 202.2～4 313.9 μm2，卵母細(xì)胞的直徑為28.6～35.6 μm，初級卵泡中的卵泡細(xì)胞呈明、暗交替分布，明細(xì)胞數(shù)量占絕大數(shù)，胞核呈扁圓形或圓形，著色深，胞質(zhì)飽滿，暗細(xì)胞則相反(圖3B)。觀察發(fā)現(xiàn)，有些處在發(fā)育期的初級卵泡，其卵泡細(xì)胞層分布不均勻，一側(cè)為多層，另一側(cè)僅有一層，而卵母細(xì)胞多位于間隙密的一側(cè)(圖3C)。次級卵泡的周圍由兩層卵泡膜包裹，而卵泡外膜和內(nèi)膜內(nèi)部有毛細(xì)血管滲透于內(nèi)外之間，這一時期的卵泡直徑和面積分別為91.4～95.7 μm和5 382.7～8 277.2 μm2，當(dāng)卵泡細(xì)胞增殖到6～12層，卵泡細(xì)胞由扁平形變成立方形，此時，透明帶出現(xiàn)且厚度約3.5 μm(圖3D)。三級卵泡的顆粒細(xì)胞間出現(xiàn)一些含液體的不規(guī)則腔隙且呈月牙形，隨著卵泡發(fā)育，一側(cè)的小腔逐漸融合成較大的半月形腔，腔內(nèi)充滿大量卵泡液，此時，卵泡直徑為95.7～221.5 μm，透明帶厚度為4 μm，卵泡腔增大促使卵母細(xì)胞及周圍的顆粒細(xì)胞被擠壓于一側(cè)形成卵丘結(jié)構(gòu)，其余的顆粒細(xì)胞被擠壓則緊貼腔面周圍，形成壁層顆粒細(xì)胞(圖3E)。成熟卵泡體積達(dá)到最大，其直徑為4.4～5.6 mm、面積可達(dá)1.5～2.3 mm2，但數(shù)量極少,此時，卵泡液占據(jù)整個卵泡腔，使顆粒細(xì)胞層變薄而細(xì)胞間隙增大，放射冠與周圍顆粒細(xì)胞之間聯(lián)系松弛，卵泡內(nèi)外膜分層更為明顯，卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物靠近卵泡腔一側(cè)且緊貼卵泡內(nèi)膜(圖3F)。

A.原始卵泡; B、C.初級卵泡; D.次級卵泡; E.三級卵泡; F.成熟卵泡。PO.初級卵母細(xì)胞; FC.卵泡細(xì)胞; CT.結(jié)締組織; ZP.透明帶; TFI.卵泡內(nèi)膜; TFE.卵泡外膜; TF.卵泡膜; SG.顆粒層; FA.卵泡腔; CR.放射冠

2.4 藏綿羊不同類型卵泡閉鎖的狀況

結(jié)果顯示，在初級卵泡和次級卵泡的閉鎖過程中，卵母細(xì)胞會退化或消失，而卵泡壁細(xì)胞也發(fā)生退化(圖4A)。生長卵泡的閉鎖存在兩種不同形態(tài)，分別是實心卵泡和囊狀卵泡。實心卵泡的顆粒層和卵泡膜都向內(nèi)收縮、增生且向內(nèi)伸展而占據(jù)整個卵泡腔(圖4D、E)。囊狀卵泡首先是顆粒層和卵泡膜萎縮，或僅是顆粒細(xì)胞發(fā)生萎縮而卵泡膜黃體化、透明化或纖維化，卵泡腔內(nèi)維持原狀(圖4B、C)。觀察發(fā)現(xiàn)，卵泡壁細(xì)胞在閉鎖過程中的明顯特征是核固縮和細(xì)胞質(zhì)擴(kuò)散，顆粒層的基膜即卵泡內(nèi)膜發(fā)生皺褶、加厚，還會發(fā)生透明化和纖維化，另外，顆粒細(xì)胞在卵泡腔有明顯的殘余(圖4F)。

A.卵泡內(nèi)膜纖維化; 其中有顆粒細(xì)胞的殘余(a); B.卵泡膜內(nèi)膜(b)發(fā)生纖維化; C.囊狀卵泡的閉鎖,其中顆粒細(xì)胞層發(fā)生肥大萎縮(b), 卵泡腔發(fā)生皺縮(a); D.實心卵泡閉鎖,卵泡膜致密化(c), 顆粒層萎縮內(nèi)折占據(jù)卵泡腔(b), 卵母細(xì)胞閉鎖(a); E.閉鎖早期的卵泡,顆粒細(xì)胞固縮或萎縮(a), 顆粒層和卵泡膜纖維化; F.顆粒細(xì)胞發(fā)生固縮(a), 卵泡內(nèi)膜發(fā)生肥大(b), 卵泡膜外膜發(fā)生透明化(c)

2.5 藏綿羊卵泡的超微形態(tài)

通過透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，卵泡主要由大量卵泡細(xì)胞呈環(huán)繞狀排列在周圍，可見明、暗類型的細(xì)胞交替存在，其明細(xì)胞的數(shù)量明顯高于暗細(xì)胞，卵泡細(xì)胞為單層扁平細(xì)胞，卵泡細(xì)胞及其核均呈扁圓形，核質(zhì)染色深且大，與長管狀的膜細(xì)胞通過縫隙相連(圖5A、C)。隨著卵泡的發(fā)育，細(xì)胞器數(shù)量也逐漸增加，核左側(cè)的分布多于右側(cè)。胞質(zhì)中可見成束的微絲，早期卵泡的線粒體為圓形且數(shù)量較少，而到達(dá)生長卵泡時，線粒體呈長扁形且數(shù)量較多,與周圍的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)緊密相連，還見少量的溶酶體、高爾基體和核糖體分布于此(圖5D、5E)。細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)一些體積較小的多腔空泡，也可見從細(xì)胞核分泌的分泌物進(jìn)入胞質(zhì)(圖5F)。顆粒細(xì)胞增生多層時，細(xì)胞呈多邊形或立方形，胞質(zhì)中細(xì)胞器豐富，細(xì)胞核染色較深。觀察發(fā)現(xiàn)，早期線粒體呈圓形，后期直徑變小，形狀呈啞鈴型，含大量的嵴，有時與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體相連接。觀察發(fā)現(xiàn)，不同階段卵泡細(xì)胞中高爾基體和核糖體的數(shù)量較少(圖5E)。胞質(zhì)中可見脂滴，染色較淺，有時可見卵泡細(xì)胞之間通過細(xì)胞膜突觸連接，其內(nèi)靠近卵母細(xì)胞的卵泡細(xì)胞通過微絨毛可深入穿越于透明帶，與其卵母細(xì)胞通過橋粒和縫管連接，卵母細(xì)胞和卵泡細(xì)胞接觸區(qū)域存在吞飲小泡(圖5B)。

A.卵泡細(xì)胞; B.初級卵泡的一部分; C.卵泡細(xì)胞和卵泡膜; D.早期卵泡中的線粒體; E.初級卵母細(xì)胞的一部分; F.初級卵母細(xì)胞核及分泌顆粒。FC.卵泡細(xì)胞; LY.溶酶體; D.橋粒; CG.皮質(zhì)顆粒; Mv.微絨毛; M.線粒體; SER.滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng); MB.多泡體; N.細(xì)胞核; TC.膜細(xì)胞; Mf.微絲; LD.脂滴; RER.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng); M.線粒體; G.高爾基體

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)，藏綿羊卵巢組織學(xué)特征和卵泡超微結(jié)構(gòu)與其他哺乳動物基本相似，但藏綿羊卵巢卵泡和卵母細(xì)胞的直徑與其他山羊存在差異[8]，分析可能是不同飼養(yǎng)方式和品種的遺傳特性與環(huán)境互作的結(jié)果。藏綿羊原始卵泡和初級卵泡隨著發(fā)育程度的提高，其位置越靠近卵巢內(nèi)部，而次級卵泡位于皮質(zhì)和髓質(zhì)交界區(qū)域，卵泡膜血管豐富，這與其他對低海拔山羊的報道相似[9]。有學(xué)者研究人胚胎卵巢發(fā)現(xiàn)，一旦第一個卵泡形成，則意味著卵泡的發(fā)育開始[10]，還有學(xué)者認(rèn)為，原始卵泡發(fā)育過程中有任何改變,將會對雌性生育和健康產(chǎn)生重要影響[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，藏綿羊原始卵泡數(shù)量多且呈動態(tài)變化，大多會發(fā)生閉鎖；有些則會出現(xiàn)兩個細(xì)胞核，而只有少數(shù)卵泡會進(jìn)一步發(fā)育成初級卵泡。另外，在藏綿羊初級卵泡中發(fā)現(xiàn),有明、暗兩種卵泡細(xì)胞類型，該現(xiàn)象也出現(xiàn)在水貂[12]、金色倉鼠[13]及人[3]的卵巢中，推測可能是一種卵泡的退化現(xiàn)象。

相關(guān)研究證實，卵泡閉鎖受多種因素的綜合調(diào)節(jié)，其中顆粒細(xì)胞的凋亡是卵泡閉鎖的重要原因[14-15]，本研究發(fā)現(xiàn)，不同階段卵泡中都存在卵泡閉鎖。產(chǎn)羔數(shù)較少的綿羊最終發(fā)育到成熟階段的卵泡相對卵泡總數(shù)而言,數(shù)量很少，而藏綿羊卵泡發(fā)育過程中能夠發(fā)育成熟的卵泡數(shù)量更少，這可能與優(yōu)勢卵泡的形成機(jī)制有關(guān)。另外，有學(xué)者觀察到，山羊透明帶自生長卵泡初期開始形成，隨著卵泡發(fā)育而逐漸增厚，這與藏綿羊透明帶的出現(xiàn)時間和厚度變化的研究結(jié)論相似[8]。而在牛、人以及其他哺乳動物中，卵泡透明帶出現(xiàn)的時期迥異[3，16]，這可能反映了種間差異及環(huán)境互作的不同。有研究認(rèn)為，藏綿羊卵巢微血管在卵巢門處螺旋程度更高，包裹更緊密，該特征可調(diào)節(jié)卵巢內(nèi)的血流速度，被認(rèn)為是藏綿羊適應(yīng)高原低氧環(huán)境的一個重要形態(tài)學(xué)特點[17]。本研究也發(fā)現(xiàn)，在藏綿羊的卵巢門處，有大量小血管進(jìn)入卵巢髓質(zhì)，之后，呈小分枝放射狀進(jìn)入皮質(zhì)部，然后，分生出許多毛細(xì)血管以供給卵巢的養(yǎng)分需要。

研究表明，家畜黃體細(xì)胞分泌的孕酮能夠抑制垂體所分泌的促卵泡素，對母畜發(fā)情起負(fù)反饋作用[18-19]。牛、綿羊、豬、大鼠、兔、猴和人均在形態(tài)和生化上有明顯不同的合成類固醇激素的黃體細(xì)胞[3-4]。本研究顯示，藏綿羊黃體由顆粒黃體細(xì)胞和膜黃體細(xì)胞構(gòu)成，其形態(tài)特征明顯，直徑大小顯著，其組織學(xué)特征與其他羊的基本相似[20]。另有研究表明，東北梅花鹿、東北細(xì)毛羊卵泡細(xì)胞中的細(xì)胞器主要位于細(xì)胞核兩側(cè)的胞質(zhì)中，這與本研究中藏綿羊卵泡胞質(zhì)中細(xì)胞器的分布特征一致[21-22]。藏綿羊卵泡膜位于外周胞質(zhì)中可見游離的線粒體、核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)聚集在核的兩側(cè)。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),在豚鼠胚胎的卵泡細(xì)胞之間可觀察到縫隙連接,但卵泡細(xì)胞與卵母細(xì)胞之間沒有發(fā)現(xiàn)[23]，這與本研究的結(jié)果類似，即在藏綿羊的卵泡細(xì)胞之間也存在縫隙連接，而卵泡細(xì)胞與卵母細(xì)胞之間是通過橋粒相連。因此推測，這種結(jié)構(gòu)可能是兩者進(jìn)行物質(zhì)交換和信息交流的樞紐。另外本研究發(fā)現(xiàn)，隨著卵泡的發(fā)育，細(xì)胞核逐漸靠近質(zhì)膜，其核仁是合成、加工核糖體亞單位的裝配場所[24-25]，本研究觀察到，胞質(zhì)中有分泌的皮質(zhì)顆粒，這也進(jìn)一步證實了核仁具有重要生理功能。相關(guān)研究顯示，在山羊和豬的卵巢中，隨著卵泡的發(fā)育,胞質(zhì)基質(zhì)的電子致密度逐步增大，線粒體、核糖體和粗面內(nèi)網(wǎng)等的致密度也顯著增加，說明卵母細(xì)胞的生長發(fā)育與周圍的卵泡細(xì)胞密切相關(guān)[22, 26]，這與本研究的結(jié)果相似，隨著卵泡的發(fā)育，藏綿羊卵母細(xì)胞胞質(zhì)中的線粒體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)也發(fā)生相應(yīng)變化，其致密化程度增強。但藏綿羊作為低氧適應(yīng)家畜，雖然其卵泡發(fā)育過程中的細(xì)胞學(xué)變化與其他動物基本一致，但其適應(yīng)高原低氧環(huán)境、維持卵泡發(fā)生與排卵的細(xì)胞學(xué)機(jī)理仍不明朗，有待繼續(xù)深入研究。

4 結(jié) 論

本研究顯示，藏綿羊的卵巢形態(tài)與組織學(xué)特征、卵泡的超微形態(tài)與綿、山羊的類似，但隨著血管的增生,藏綿羊的卵泡發(fā)育和黃體形成較快，卵泡閉鎖在各個時期均有發(fā)生；本研究發(fā)現(xiàn)，在藏綿羊初級卵泡中有明、暗兩種卵泡細(xì)胞類型，卵巢門處有大量的微血管供血方式；隨著卵泡的發(fā)育，胞質(zhì)中細(xì)胞器形態(tài)發(fā)生改變且致密化程度增加。本研究表明，藏綿羊的卵泡系統(tǒng)、黃體組織學(xué)特點及卵泡的超微形態(tài)能夠保障卵巢在高原低氧環(huán)境中機(jī)能的正常發(fā)揮。