闞曉麗，張茜，曹磊，單言昊

（江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，江蘇南京 210007）

異丙甲草胺，化學(xué)名稱2-乙基-6-甲基-N-(1’-甲基-2’-甲氧乙基)氯代乙酰基苯胺，屬于酰胺類選擇性除草劑[1]。異噁草松，化學(xué)名稱2-(2-氯芐基)-4,4-二甲基異惡唑-3-酮，是有機(jī)雜環(huán)類選擇性苗前除草劑，適用于防除大豆、花生、玉米等作物田的一年生禾本科雜草和闊葉雜草[1-2]。2,4-滴異辛酯，化學(xué)名稱2,4-二氯苯氧乙酸異辛酯，是一種激素類選擇性苗后莖葉處理觸殺型除草劑，替代常用的2,4-滴丁酯，安全性好，可減少對(duì)周邊敏感作物漂移藥害[3-4]。該復(fù)配產(chǎn)品比單劑產(chǎn)品防除效果更優(yōu)。本文旨在建立氣相色譜法，測(cè)定70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油產(chǎn)品中有效成分的含量，對(duì)企業(yè)自身的質(zhì)量把關(guān)提供依據(jù)，便于進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

Agilent 7890 A型氣相色譜儀，具有氫火焰離子化檢測(cè)器，美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)； XS105DU型電子分析天平，METTLE TOLEDO；KQ-300E超聲清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司。

鄰苯二甲酸二正戊酯，分析純，國(guó)藥化試；三氯甲烷，分析純，國(guó)藥化試；2,4-滴異辛酯標(biāo)樣（純度95.3%）、異噁草松標(biāo)樣（純度97.3%）、異丙甲草胺標(biāo)樣（純度97.0%），國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（沈陽）；70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油由江蘇長(zhǎng)青生物科技有限公司提供。

1.2 色譜條件

色譜柱：HP-5，30 m×0.32 mm×0.25 μm毛細(xì)管柱；溫度：柱溫200 ℃（運(yùn)行15min）、氣化室290 ℃、檢測(cè)室300 ℃；氣體流速：載氣（N2）2.0 mL/min、氫氣（H2）40 mL/min、空氣 400 mL/min；保留時(shí)間：內(nèi)標(biāo)物鄰苯二甲酸二正戊酯約8.6 min，異噁草松約3.2 min，異丙甲草胺約5.5 min，2,4-滴異辛酯約10.0 min。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 內(nèi)標(biāo)物溶液的配制

稱取鄰苯二甲酸二正戊酯約2.5 g（精確至0.000 2 g）置于250 mL容量瓶中，用三氯甲烷溶解、定容、搖勻。

1.3.2 標(biāo)樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取異丙甲草胺標(biāo)樣0.101 0 g（精確至0.000 2 g）、異噁草松標(biāo)樣0.035 6 （g精確至0.000 2 g）、2,4-滴異辛酯標(biāo)樣0.049 2 g（精確至0.000 2 g），置于25 mL容量瓶中，移取10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，超聲溶解，搖勻，靜置備用。（異丙甲草胺標(biāo)樣濃度為9.7mg/mL、異噁草松標(biāo)樣為3.46 mg/mL、2,4-滴異辛酯標(biāo)樣濃度為4.69 mg/mL）

1.3.3 樣品溶液的配制

稱取0.25 g試樣（精確至0.000 2 g）置于25 mL容量瓶中，加入10 mL內(nèi)標(biāo)物溶液，搖勻備用。

1.3.4 測(cè)定

在“1.2”操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入兩針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，待相鄰兩針的相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.0%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定，按照此順序，可以減少系統(tǒng)誤差。

1.3.5 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中異丙甲草胺（異噁草松、2,4-滴異辛酯）的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比分別進(jìn)行平均，其各自的質(zhì)量分ω1（%）按公式（1）計(jì)算[2]。

式（1）中，r1為標(biāo)樣溶液中，異丙甲草胺（異噁草松、2,4-滴異辛酯）與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；r2為試樣溶液中，異丙甲草胺（異噁草松、2,4-滴異辛酯）與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；m1為異丙甲草胺（異噁草松、2,4-滴異辛酯）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；ω為標(biāo)樣中異丙甲草胺（異噁草松、2,4-滴異辛酯）質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

1.4 方法學(xué)驗(yàn)證

1.4.1 線性關(guān)系

采用已知含量的異丙甲草胺、異噁草松和2,4 滴異辛酯標(biāo)樣分別配制成5個(gè)已知濃度的梯度混合標(biāo)樣溶液（濃度見表1），以異丙甲草胺、異噁草松和2,4-滴異辛酯與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，以異丙甲草胺、異噁草松和2,4-滴異辛酯與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制異丙甲草胺、異噁草松和2,4-滴異辛酯含量測(cè)定線性關(guān)系圖，并進(jìn)行線性回歸獲取線性方程和相關(guān)系數(shù)。

表1 混合標(biāo)樣濃度表

1.4.2 精密度

對(duì)同一70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油試樣，按照上述分析方法，連續(xù)進(jìn)行5次平行測(cè)定，分別計(jì)算有效成分含量、平均值及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.4.3 回收率

按照配方比例要求，將除原藥以外的所有助劑按制劑同樣比例混勻，作為制劑空白。在一定量的制劑空白中添加異丙甲草胺標(biāo)樣、異噁草松標(biāo)樣和2,4-滴異辛酯標(biāo)樣，合成5個(gè)組成與70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油相似的模擬試樣，作為準(zhǔn)確度試驗(yàn)樣品溶液，再按照上述分析方法進(jìn)行測(cè)定，通過準(zhǔn)確度試驗(yàn)溶液中各有效成分的測(cè)得值和實(shí)際添加值計(jì)算回收率[5-6]。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系

線性關(guān)系結(jié)果如圖1～3所示，異丙甲草胺線性方程為y=0.887x+0.000 1，線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r為0.999 9；異噁草松線性方程為y=0.822 6x-0.001 7，線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r為0.999；2,4-滴異辛酯線性方程為y=0.830 4x+0.000 5，線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r為1，均大于0.99，表明該分析方法線性關(guān)系良好。

圖1 異丙甲草胺含量測(cè)定線性關(guān)系圖

圖2 異噁草松含量測(cè)定線性關(guān)系圖

圖3 2,4-滴異辛酯含量測(cè)定線性關(guān)系圖

2.2 精密度

精密度試驗(yàn)結(jié)果列于表2，結(jié)果表明3種有效成分色譜定量分析方法精密度均能滿足定量分析要求。

表2 精密度測(cè)試結(jié)果

2.3 回收率

該檢測(cè)方法加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。結(jié)果表明，在添加設(shè)計(jì)的五個(gè)濃度模擬溶液中，回收率均在98%～101%，滿足NY/T2887-2016農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認(rèn)指南中制劑有效成分分析的回收率要求，表明該分析方法準(zhǔn)確度良好[5-6]。

表3 加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果

2.4 樣品測(cè)定結(jié)果

對(duì)70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油供試樣品按照本文所述試驗(yàn)方法對(duì)其有效成分進(jìn)行檢測(cè)，標(biāo)樣及樣品的氣相圖譜如圖4所示。測(cè)得數(shù)值及計(jì)算結(jié)果見表4（峰面積及稱樣量表，表中數(shù)字1為異噁草松標(biāo)樣，含量為97.3%；2為異丙甲草胺標(biāo)樣，含量為97.0%；3為2,4-滴異辛酯，含量為95.3%）和表5（含量測(cè)定結(jié)果表），結(jié)果表明，該檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)便及快速準(zhǔn)確的特點(diǎn)。

表4 峰面積及稱樣量表

表5 含量測(cè)定結(jié)果表

圖4 標(biāo)樣及樣品氣相色譜圖

3 結(jié)論

本文通過實(shí)驗(yàn)研究建立了70%異丙甲草胺·異噁草松·2,4-滴異辛酯乳油含量的氣相色譜檢測(cè)方法，并據(jù)此對(duì)樣品進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明該方法完全適用于該產(chǎn)品有效成分的含量測(cè)定，對(duì)于嚴(yán)格控制該產(chǎn)品質(zhì)量具有積極意義。