許杰妤，王廣成

(1.成都彩虹電器(集團)股份有限公司，四川 成都 610045；2.四川省農(nóng)藥檢定所，四川 成都 610041)

1 前言

吡蟲啉(Imidacloprid)是一種硝基亞甲基類內(nèi)吸殺蟲劑，屬氯化煙酰類殺蟲劑，又稱為新煙堿類殺蟲劑，化學(xué)式為C9H10ClN5O2，具有廣譜、高效、低毒、低殘留優(yōu)點，并有觸殺、胃毒和內(nèi)吸等多重作用[1]。害蟲接觸藥劑后，中樞神經(jīng)正常傳導(dǎo)受阻，使其麻痹死亡。產(chǎn)品速效性好，藥后1d即有較高的防效，殘留期長達25d左右。藥效和溫度呈正相關(guān)，溫度高，殺蟲效果好。主要用于防治刺吸式口器害蟲。吡蟲啉殺蟑餌劑是以吡蟲啉原藥為有效成分，添加引誘劑及適宜助劑配制而成的防治蜚蠊的衛(wèi)生殺蟲劑，其施用方式為投放。目前對蟑螂的防治有氣霧劑觸殺，殺蟑煙片熏殺等，餌劑在使用過程中不會產(chǎn)生氣味，煙霧，對環(huán)境更友好，并且能與上述殺蟑方式共同存在，綜合治理[2-4]。

市場上流通的殺蟑餌劑有效成分主要為吡蟲啉、氟蟲腈。吡蟲啉殺蟑餌劑最早由拜耳公司引進中國，在中國已持續(xù)銷售十幾年，目前尚未查得蟑螂對吡蟲啉的相關(guān)抗性情況報道。氟蟲腈現(xiàn)在屬于限制使用農(nóng)藥，吡蟲啉與之相比在安全性上更具有優(yōu)勢。

本文為研究吡蟲啉殺蟑餌劑生產(chǎn)控制過程中對產(chǎn)品質(zhì)量的控制，建立了高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法測定殺蟑餌劑中吡蟲啉含量。吡蟲啉含量的檢測方法一般為液相色譜外標(biāo)法，本文采用的液相色譜內(nèi)標(biāo)法較之液相色譜外標(biāo)法，測試結(jié)果更精準(zhǔn)，能更好的對產(chǎn)品質(zhì)量進行監(jiān)測。

2 試驗部分

2.1 儀器與試劑 水(新蒸二次蒸餾水)；溶劑：乙腈(分析純)；吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%)；對氯苯酚(分析純)。

高效液相色譜儀，具有紫外波長可變檢測器(Aglient 1260)；色譜柱：250mm×4.6mm不銹鋼柱，C18、5μm；微量注射器：10μL。

2.2 方法提要 試樣用乙腈溶解，用對氯苯酚為內(nèi)標(biāo)，以乙腈和水作流動相，使用以O(shè)DS-C18為填料的色譜柱和紫外可變波長檢測器，用內(nèi)標(biāo)法對試樣中的吡蟲啉進行分離和測定。

2.3 氣相色譜操作條件 柱溫：(30±2)℃，流速：1.0mL/min；檢測波長：220nm；進樣量：10μL。

吡蟲啉標(biāo)樣和吡蟲啉殺蟑餌劑樣品液相色譜圖(圖1-2)。

1-吡蟲啉; 2-對氯苯酚圖1 吡蟲啉標(biāo)樣和內(nèi)標(biāo)對氯苯酚高效液相色譜圖

1-吡蟲啉; 2-對氯苯酚圖2 吡蟲啉殺蟑餌劑和內(nèi)標(biāo)對氯苯酚高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 內(nèi)標(biāo)溶液配制 稱取對氯苯酚約0.6g(精確到0.000 2g)置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解，并稀釋到刻度、混勻。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 稱取吡蟲啉標(biāo)樣約0.05g(精確到0.000 2g)的試樣，置于50mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0mL，用乙腈溶解，并稀釋至刻度、搖勻。

2.4.3 試樣溶液的配制 稱取吡蟲啉殺蟑餌劑約2.3g(精確到0.000 2g)的試樣，置于錐形瓶中，準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0mL，乙腈45.0mL溶解，超聲波振蕩，搖勻后用0.45μm濾膜過濾，待用。

2.4.4 測定 在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)數(shù)針注入標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針吡蟲啉峰面積相對變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液順序進行測定。

2.4.5 計算 將測得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)準(zhǔn)溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比，分別進行平均。產(chǎn)品中吡蟲啉的含量x1(%)按式(1)進行計算：

(1)

式中：x1-殺蟑餌劑中吡蟲啉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；r1-標(biāo)樣溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值平均值；r2-試樣溶液中吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值平均值；m1-標(biāo)樣溶液中標(biāo)樣質(zhì)量，g；m2-樣品溶液中樣品質(zhì)量，g；p-標(biāo)樣純度，%。

3 試驗結(jié)果與討論

3.1 分析方法的特異性 采用HPLC-DAD對吡蟲啉、對氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品在210～400nm進行紫外掃描，結(jié)果(圖3)。吡蟲啉在269nm波長有較強的吸收，對氯苯酚的最大吸收波長225nm，2種物質(zhì)吸收曲線的交點為220nm。在220nm左右，吡蟲啉和對氯苯酚均有較好的吸收，而且雜質(zhì)吸收較小，主峰和雜質(zhì)峰分離效果較好，故確定220nm為吡蟲啉分析方法的檢測波長。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗 在一定質(zhì)量范圍內(nèi)，按照濃度遞增的順序配制數(shù)個吡蟲啉標(biāo)樣樣品。以吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，吡蟲啉與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。上述操作條件下，當(dāng)吡蟲啉/內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比在0.975 8～2.460 6之間，與相應(yīng)的吡蟲啉/內(nèi)標(biāo)物峰面積比有良好的線性關(guān)系，計算得回歸方程為y=0.438x+0.011，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 8。

圖3 吡蟲啉與對氯苯酚的紫外吸收光譜圖

表1 吡蟲啉線性關(guān)系實驗數(shù)據(jù)

3.3 分析方法的精密度試驗 對同一樣品中的吡蟲啉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進行5次平行測定，并進行標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)的統(tǒng)計運算。同時運用修改的Horwitz公式作為精密度是否合格的判定依據(jù)(表2)?？芍痉治龇椒ǖ淖儺愊禂?shù)

表2 吡蟲啉方法精密度實驗數(shù)據(jù)

3.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗 為驗證本方法的系統(tǒng)誤差，對方法的精確度進行了試驗，取經(jīng)分析已知有效成分準(zhǔn)確含量的樣品，加入已知含量吡蟲啉標(biāo)樣，測定吡蟲啉的回收率，其結(jié)果(表3)。對吡蟲啉的添加回收率在99.28%～100.88%之間，因此本方法可以滿足對產(chǎn)品中吡蟲啉的分離測定。

表3 吡蟲啉準(zhǔn)確度實驗數(shù)據(jù)

4 結(jié)論

綜上所述，本試驗建立了高效液相色譜法檢測吡蟲啉殺蟑餌劑中的吡蟲啉含量分析方法。試驗結(jié)果表明，采用本方法測定吡蟲啉含量具有較高的線性響應(yīng)，較高的準(zhǔn)確度和精密度。本方法具有操作簡單、高效的特點，是企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析檢測方法，提高了檢測效率。