韋 艷,祭仲石,朱海偉,王中清,宋麗芳
(上海市海豐水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司,江蘇 鹽城 224151)
(1)5 種消毒劑。分別為苯扎溴銨、濃戊二醛、泰蘭芬(復(fù)合過(guò)硫酸氫鉀粉)、菌速清I 型(二氧化氯)、復(fù)合碘,均購(gòu)自當(dāng)?shù)貪O藥市場(chǎng)。
(3)實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基。腦心浸出液培養(yǎng)基,pH 7.4±0.2,采購(gòu)自O(shè)XOID。
(1)細(xì)菌母液的制備。將分離得到且經(jīng)過(guò)純化后接種于斜面培養(yǎng)基的菌種,放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 小時(shí),然后用0.7%的生理鹽水洗下菌苔,制成細(xì)菌懸濁液為0.5 麥?zhǔn)蠁挝?,放?℃冰箱中保存供試驗(yàn)使用。
(2)消毒劑的制備。分別取不同的消毒劑0.01 克加蒸餾水溶解定容于100 毫升的容量瓶中,使各消毒劑母液濃度達(dá)到100毫克/升,混勻待用。
(3)實(shí)驗(yàn)操作。在無(wú)菌操作臺(tái)中,將細(xì)菌母液稀釋100 倍。取6 個(gè)經(jīng)滅過(guò)菌的20 毫升的離心管,編號(hào)1~6,分別加入上述菌液10毫升,在1~5號(hào)中分別添加各消毒劑1.1 毫升,使消毒劑含量達(dá)10 毫克/升,混合均勻,6 號(hào)不添加作為對(duì)照,然后將離心管放置于搖床中2小時(shí)和4小時(shí),分別從每個(gè)離心管中取100微升菌液涂布于腦心浸液培養(yǎng)基培養(yǎng)皿上,每個(gè)離心管設(shè)置3個(gè)重復(fù),然后將此培養(yǎng)皿置于30℃恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí)。
(4)數(shù)據(jù)處理。培養(yǎng)結(jié)束后,記錄每個(gè)培養(yǎng)皿上的菌落數(shù),統(tǒng)計(jì)各消毒劑對(duì)愛德華菌的抑制效果。抑菌率=(對(duì)照組菌落數(shù)-實(shí)驗(yàn)組菌落數(shù))/對(duì)照組菌落數(shù)×100%。
表1 2小時(shí)5種消毒劑對(duì)愛德華菌抑制效果
表1 2小時(shí)5種消毒劑對(duì)愛德華菌抑制效果
組別苯扎溴銨濃戊二醛泰蘭芬菌速清I型復(fù)合碘對(duì)照組菌落數(shù)(個(gè))1 102 140 159 103 172 336 23 98 150 145 102 155 358 80 145 139 93 160 342平均93.33 145.00 147.67 99.33 162.33 345.33抑菌率(%)73 58 57 71 53/
表2 4小時(shí)5種消毒劑對(duì)愛德華菌抑制效果
表2 4小時(shí)5種消毒劑對(duì)愛德華菌抑制效果
組別苯扎溴銨濃戊二醛泰蘭芬菌速清I型復(fù)合碘對(duì)照組菌落數(shù)(個(gè))1 81 130 141 86 166 350 23 76 152 130 80 140 362 78 146 125 92 159 370平均78.33 142.67 132.00 86.00 155.00 360.67抑菌率(%)78 60 63 76 57/