虞為，李欣，林黑著，黃小林，楊育凱，黃忠，李濤

（1.中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗基地，廣東 深圳 518121；2.中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點實驗室，廣東 廣州 510300；3.廣州大學生命科學學院，廣東 廣州 510006）

2018 年我國凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei養(yǎng)殖總量達108 萬t，占對蝦養(yǎng)殖總量的80.6%[1]。我國凡納濱對蝦主要以單養(yǎng)為主，近年來面臨著嚴重的危機[2]，對高產(chǎn)量的追求，密度和投餌量不斷增加，殘餌和代謝產(chǎn)物大量積累，養(yǎng)殖水環(huán)境污染和傳染性疾病大規(guī)模爆發(fā)[3,4]。為解決凡納濱對蝦單養(yǎng)所面臨的問題，開展了凡納濱對蝦混養(yǎng)模式的研究，以提高飼料利用率，優(yōu)化養(yǎng)殖水體環(huán)境，減少疾病發(fā)生。

對蝦池塘混養(yǎng)草食和雜食性魚類，如羅非魚Oreochromis niloticus、草魚Ctenopharyngodon idella、褐籃子魚Siganus fuscessens 和鯽Carassius auratus等，能改善養(yǎng)殖水質、降低水體的弧菌數(shù)量、提高飼料利用率和對蝦存活率及養(yǎng)殖的生態(tài)效益和經(jīng)濟效益[3,5-8]。對蝦池塘混養(yǎng)肉食性魚類，如點帶石斑魚Epinephelus malabaricus、鱸Lateolabrax japonicus、河鲀Fugn rubripes、革胡子鯰Clarias fuscus 和真鯛Pagrosomus major 等魚類，可捕食死蝦、病蝦及體質較弱的蝦，切斷病害傳播途徑，提高對蝦養(yǎng)殖的成活率[9-13]。

卵形鯧鲹Trachinotus ovatus 俗稱金鯧，經(jīng)濟價值高，生長速度快，當年可達到上市規(guī)格，已成為我國南方沿海養(yǎng)殖的首選魚類，其養(yǎng)殖方式主要以魚排網(wǎng)箱和抗風浪深水網(wǎng)箱為主[14,15]。經(jīng)數(shù)年的高速發(fā)展之后，由于布局不合理，養(yǎng)殖密度過高，已造成了養(yǎng)殖水環(huán)境和生態(tài)環(huán)境的惡化，導致卵形鯧鲹病害日漸嚴重，產(chǎn)品質量和養(yǎng)殖效益下降[16,17]。卵形鯧鲹能適應對蝦養(yǎng)殖池塘的生長環(huán)境，與對蝦用水體空間上具有互補性，是對蝦池塘很好的混養(yǎng)對象。因此，在凡納濱對蝦池塘中混養(yǎng)卵形鯧鲹，可以促進凡納濱對蝦和卵形鯧鲹養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)結構調整，解決目前凡納濱對蝦單品種養(yǎng)殖和深水網(wǎng)箱高密度卵形鯧鲹養(yǎng)殖所遇到的問題。但是，迄今有關凡納濱對蝦與卵形鯧鲹混養(yǎng)的研究報道較少。為此，本文進行了凡納濱對蝦單養(yǎng)和凡納濱對蝦-卵形鯧鲹混養(yǎng)的對比試驗，研究卵形鯧鲹混養(yǎng)對主要水環(huán)境因子和養(yǎng)殖效果的影響，可為建立凡納濱對蝦-卵形鯧鲹混養(yǎng)模式提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用凡納濱對蝦（下稱對蝦）購于深圳市海源生物科技有限公司，平均體質量3.4 g；卵形鯧鲹購于深圳市龍岐莊實業(yè)發(fā)展有限公司。水環(huán)境調控劑購自廣州市欣海利生生物科技有限公司。對蝦飼料購自越群海洋生物科技有限公司。

2019 年7～9 月，試驗在中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗基地一口面積為0.2 hm2的池塘中設置3 排圍隔進行，每排7 個，各圍隔之間沒有水體交換。圍隔以竹樁及竹竿為支架，以聚乙烯隔水編織布包圍并固定在支架上，面積為24 m2（4 m×6 m），水深1.5 m。每個圍隔中均勻布置16個增氧氣石，由一臺功率為3.2 kW 的羅茨鼓風機充氣增氧。養(yǎng)殖用水直接從海區(qū)抽取，進、排水口分別位于池塘角落和中央。

1.2 方法

1.2.1 確定混養(yǎng)卵形鯧鲹合適規(guī)格的預實驗

混養(yǎng)實驗開始前，先進行了確定卵形鯧鲹適宜混養(yǎng)規(guī)格的預實驗。在2 m3水體的水泥池中開展體質量3.4 g 對蝦和體質量25 g、45 g、65 g、85 g 和100 g 的卵形鯧鲹混養(yǎng)的預實驗。結果表明：體質量25 g、45 g 和65 g 的卵形鯧鲹不能捕食對蝦，而85 g和100 g 的卵形鯧鲹則不同程度地捕食對蝦。然后，給體質量25 g、45 g 和65 g 的卵形鯧鲹投喂體質量3.4 g 的死蝦，發(fā)現(xiàn)體質量65 g 的卵形鯧鲹能快速攝食死蝦，而體質量25 g 和45 g 的卵形鯧鲹口徑較小，不能攝食死蝦。因此確定混養(yǎng)卵形鯧鲹的合適規(guī)格為65 g/尾。

1.2.2 試驗設計與管理

試驗設7 個處理，每個處理3 個平行，共21 個圍隔。2019 年7 月22，各圍隔中放養(yǎng)體質量3.4 g/尾的對蝦1 728 尾（即7.2 × 105 尾/hm2），放養(yǎng)體質量65 g 的卵形鯧鲹0 尾（C 組）、4 尾（F4 組）、8 尾（F8 組）、12 尾（F12 組）、16 尾（F16 組）、20 尾（F20組）和24 尾（F24 組），9 月19 日收獲，試驗持續(xù)60 d。

2019 年7 月7 日設置試驗圍隔的池塘進水，7月8 日使用36 kg 茶子餅毒塘，7 月10 日以0.5 ppm二氧化氯進行消毒，7 月15 日施用5 kg“單細胞藻類生長素”、5 kg“肥水王”和0.5 kg“利生菌王”等水環(huán)境調控劑。試驗期間，各圍隔不換水，24 h 連續(xù)充氣增氧；每天7:00、12:00 和16:00，投喂粗蛋白質質量分數(shù)為37%～40%的對蝦飼料，投喂量試驗前期為對蝦體質量的5%～8%，具體投喂量根據(jù)對蝦的攝食情況和天氣情況及時調整，并隨著對蝦的生長更換適當型號的飼料，以滿足對蝦對飼料粒徑的要求。試驗期間，不給卵形鯧鲹投喂飼料。

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 水樣的采集與測定

試驗期間，每天6:00～7:00 用多參數(shù)水質分析儀（美國維賽YSI Pro2030）測定溶解氧含量、水溫、鹽度和pH；每7 d 在圍隔四周及中央水面下0.5 m處各采集水樣1 份，充分混勻后，取500 mL 混合水樣帶回實驗室,參照《海洋監(jiān)測規(guī)范GB 17378.4-2007》立即測定氨氮（ammonia nitrogen）、亞硝態(tài)氮（nitrite nitrogen）和化學需氧量（COD）[18]。

1.3.2 弧菌樣品的采集與測定

試驗期間，每7 d 8:00～9:00 在圍隔四周及中央水面下0.5 m 處各采集水樣1 份，充分混勻后，取100 mL 混合水樣放入250 mL 無菌三角玻璃瓶中，低溫保存，迅速帶回實驗室進行處理。根據(jù)樣品檢測分析需要，水樣按10 倍稀釋法制成10-1、10-2、10-3稀釋水樣，用移液槍吸取0.1 mL 稀釋液進行平板涂布，每個梯度3 個重復，28℃培養(yǎng)24 h 后,用TCBS瓊脂平板計數(shù)法計數(shù)弧菌數(shù)。TCBS 瓊脂培養(yǎng)基由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.4 計算公式和數(shù)據(jù)處理

對蝦、卵形鯧鲹的增重率（Weight gain rate,WGR）、特定生長率（Specific growth rate,SGR）、存活率（Survival ratio,SR）和飼料系數(shù)（Food conversion ratio,FCR）分別按以下公式計算：

其中W2和W1表示蝦或魚終末體質量和起始體質量，T 為試驗天數(shù)，N2和N1為收獲和放養(yǎng)時蝦或魚的數(shù)量，C 為投喂飼料的重量，W2總和W1總分別為蝦和魚終末及起始體質量。

實驗所得數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示，用Excel 2013 作圖，通過SPSS 18.0 進行統(tǒng)計分析，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 試驗期間水質指標變化

2.1.1 水溫和鹽度

由圖1 可知，試驗期間圍隔水溫隨天氣狀況，變動在27.6～33.6℃間，在7 月31 日—8 月3 日（強降雨）和8 月24 日—8 月29 日（強降雨）期間水溫大幅度下降，形成兩個低溫時間段。試驗期間，圍隔早晨最低水溫為27.6℃，最高為32.0℃；下午最低水溫為28.4℃，最高為33.6℃。

圖1 試驗期間水溫的變化Fig.1 Fluctuation of water temperature during the experiment

圖2 試驗期間鹽度的變化Fig.2 Fluctuation of water salinity during the experiment

圖3 試驗期間pH 的變化Fig.3 Fluctuation of water pH during the experiment

由圖2 可知，試驗周期各圍隔水體的鹽度變化完全一致。養(yǎng)殖期間沒有進排水，水體鹽度總體呈下降趨勢，在兩次強降雨后各下降了1‰，其他時間保持平穩(wěn)。

2.1.2 pH 和溶氧

由圖3 可知，試驗期間圍隔水體pH 呈下降趨勢，前期下降較快，后期相對穩(wěn)定。單養(yǎng)組和混養(yǎng)組水體pH 波動范圍分別為7.2～8.6 和6.6～8.6，混養(yǎng)組中F20 組和F24 組的pH 較其他組低。由圖4可知，試驗期間圍隔水體溶氧量呈下降趨勢，前期單養(yǎng)組和混合組的差別不大，后期混養(yǎng)組中F20 組和F24 組的溶氧量較其他組低。單養(yǎng)組和混養(yǎng)組水體溶氧波動范圍分別為6.25～7.57 mg·L-1和5.48～7.62 mg·L-1。

2.1.3 氨氮和亞硝氮

圖4 試驗期間水體溶解氧含量的變化Fig.4 Fluctuation of water dissolved oxygen levels during the experiment

由圖5 可知，試驗期間各組水體氨氮濃度逐步上升。第7 d 和第14 d 各組水體氨氮濃度差異不大；在第21～49 d，F(xiàn)8 組、F12 組、F16 組、F20 組和F24 組的氨氮顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05），而F4 組和單養(yǎng)組差異不顯著（P＞0.05）；第49～60 d，混養(yǎng)各組的氨氮含量顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05）。各組水體亞硝氮濃度變化如圖6 所示。第7 d 各組水體亞硝氮濃度差異不大（P＞0.05）；第14 d 時，F(xiàn)12 組、F16組、F20 組和F24 組的亞硝氮濃度顯著低于單養(yǎng)組；第21～42 d，F(xiàn)8 組、F12 組、F16 組、F20 組和F24 組的亞硝氮濃度顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05）；第49～60 d，各組混養(yǎng)組亞硝氮濃度顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05）。

2.1.4 化學需氧量

圖5 試驗期間水體氨氮濃度的變化Fig.5 Fluctuation of water ammonia nitrogen concentrations during the experiment

圖6 試驗期間水體亞硝氮濃度的變化Fig.6 Fluctuation of water nitrite nitrogen concentrations during the experiment

圖7 試驗期間水體化學需氧量的變化Fig.7 Fluctuation of water COD during the experiment

圖8 試驗期間水體弧菌濃度的變化Fig.8 Changes in Vibrio concentration in water during the experiment

由圖7 可知，試驗期間各組水體COD 值逐漸上升，單養(yǎng)組和各混養(yǎng)組水體中COD 值波動范圍分別為3.3～8.64 mg·L-1和3.05～7.53 mg·L-1。第7 d 和第14 d 各組水體COD 值差異不顯著（P＞0.05）；第28 d 和第60 d 時，混養(yǎng)各組的COD 值均顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05）；其余時間，F(xiàn)8 組、F12組、F16 組、F20 組和F24 組的COD 值均顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05），而F4 組則和單養(yǎng)組差異不顯著（P＞0.05）。

2.1.5 弧菌

由圖8 可知，試驗前期各組水體弧菌濃度較穩(wěn)定，后期增加幅度較大。單養(yǎng)組和混養(yǎng)組水體中弧菌的數(shù)量分別維持在0.5×103～8.82×103CFU·mL-1和0.51×103～7.2×103CFU·mL-1。從第35 d 開始，F(xiàn)8 組、F12 組、F16 組、F20 組和F24 組水體弧菌濃度均顯著低于單養(yǎng)組（P＜0.05）。試驗后期，單養(yǎng)組、F4 組和F8 組水體弧菌濃度均顯著高于其他混養(yǎng)組（P＜0.05）。

2.2 凡納濱對蝦和卵形鯧鲹的生長

由表1 可知，混養(yǎng)組中F8 組和F12 組對蝦增重率和特定生長率均顯著大于單養(yǎng)組（P＜0.05），F(xiàn)4組和F16 組對蝦增重率和特定生長率與單養(yǎng)組差異不顯著（P＞0.05），而F20 組和F24 組對蝦增重率和特定生長率均顯著小于單養(yǎng)組（P＜0.05）。混養(yǎng)各組對蝦存活率均高于單養(yǎng)組，其中F12 組顯著高于單養(yǎng)組（P＜0.05）。F4 組、F8 組和F12 組對蝦產(chǎn)量顯著高于單養(yǎng)組（P＜0.05），而F24 組的產(chǎn)量顯著小于單養(yǎng)組（P＜0.05）。

圖9 試驗期間各試驗組凡納濱對蝦和卵形鯧鲹的飼料系數(shù)Fig.9 Food conversion ratio of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei and golden pompano Trachinotus ovatus in each group during experiment

表1 試驗期間凡納濱對蝦的生長情況Tab.1 The growth performance of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei during the experiment

表2 試驗期間卵形鯧鲹的生長情況Tab.2 The growth performance of golden pompano Trachinotus ovatus during the experiment

試驗期間，卵形鯧鲹的生長情況如表2 所示，魚的增重率和特定生長率隨著密度的增大而顯著增加（P＜0.05），當魚的密度超過F12 組時，魚的增重率和特定生長率隨密度的增大而顯著減?。≒＜0.05）；各組的存活率均為100%；魚的產(chǎn)量與放養(yǎng)密度呈正相關。

試驗期間，各組魚蝦的飼料系數(shù)（圖9），各混養(yǎng)組的飼料系數(shù)均小于單養(yǎng)組，其中F8 和F12 組顯著小于單養(yǎng)組（P＜0.05）。

3 討論

3.1 混養(yǎng)對水質指標的影響

主要受天氣情況影響,單養(yǎng)組和混養(yǎng)組水體的溫度和鹽度變化趨勢一致?；祓B(yǎng)組中F20 組和F24組的水體溶氧含量較單養(yǎng)組低，這可能是混養(yǎng)的卵形鯧鲹密度過大，更多地消耗了水體中的溶氧。對蝦養(yǎng)殖過程中水體氨氮和亞硝氮濃度隨養(yǎng)殖時間延長而升高[19,20]，這與本研究的結果一致。相關研究表明，對蝦池塘分別混養(yǎng)草魚、羅非魚和鰱Hypophthalmichthys molitrix、鳙Aristichthys nobilis 后，水體的氨氮和亞硝酸氮濃度一般低于或顯著低于單養(yǎng)組[5,21,22]。本研究結果與以上研究相似，混養(yǎng)組水體的氨氮和亞硝氮濃度均低于單養(yǎng)組，這是由于混養(yǎng)的卵形鯧鲹攝食水體底部的殘餌及病蝦，減少了底部有機物質的堆積和餌料溶失，降低水體氨氮和亞硝氮濃度[23]。

化學需氧量（COD）是反映水體中有機物含量的指標。養(yǎng)殖過程中，投餌及養(yǎng)殖動物排泄物積累等，水體中的有機物含量不斷升高，因而COD 常隨養(yǎng)殖進程而升高[3]。本研究中，養(yǎng)殖初期各組的COD 差異不大，養(yǎng)殖中后期混養(yǎng)組的COD 低于單養(yǎng)組，其中F12、F16、F20 和F24 組均顯著低于單養(yǎng)組，這可能是混養(yǎng)組中的卵形鯧鲹攝食了殘餌，使得水體中有機物含量較單養(yǎng)組低。

弧菌是對蝦養(yǎng)殖環(huán)境中常見的一類條件致病菌，當水體或底泥弧菌數(shù)量大于一定閾值時，對蝦極容易突發(fā)疾病[24]。研究表明：蝦池中混養(yǎng)羅非魚可以有效降低水體中弧菌的含量，一是因為魚類分泌的黏液和產(chǎn)生的其他代謝產(chǎn)物可能抑制弧菌[25]；二是與魚類有關的微生物群可能對弧菌有競爭作用[26]。本研究中，自從試驗開始第35 d 起F8 組、F12組、F16 組、F20 組和F24 組水體弧菌濃度均顯著低于單養(yǎng)組，這表明對蝦池混養(yǎng)卵形鯧鲹可以抑制水體中的弧菌數(shù)量，但其具體的抑制機制有待進一步研究。

3.2 混養(yǎng)對對蝦生長的影響

近年來，對蝦與不同魚類混養(yǎng)已有較為深入的研究。研究表明，對蝦池塘中混養(yǎng)不同密度的魚類可不同程度地影響對蝦的生長速度和存活率。張嘉晨等發(fā)現(xiàn)，混養(yǎng)0.2 尾·m-2的點帶石斑魚Epinephelus malabaricus 可以提高凡納濱對蝦的特定生長率和存活率，當混養(yǎng)點帶石斑魚密度超過0.4 尾·m-2時，凡納濱對蝦的特定生長率和存活率隨著混養(yǎng)魚密度的升高而下降[9]。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)，凡納濱對蝦特定生長率和存活率隨著羅非魚混養(yǎng)密度增大而呈現(xiàn)下降趨勢[3]。

本研究中，F(xiàn)12 組（混養(yǎng)卵形鯧鲹密度為5 000尾/hm2）中凡納濱對蝦的特定生長率最大，當混養(yǎng)卵形鯧鲹密度超過5 000 尾/hm2時，凡納濱對蝦的特定生長率隨著混養(yǎng)卵形鯧鲹密度增大而下降。其原因可能是混養(yǎng)過多的卵形鯧鲹加劇了魚蝦對食物、溶解氧和空間競爭，導致凡納濱對蝦攝食的飼料不足，降低了特定生長率[27]。因此以對蝦為主的養(yǎng)殖模式中，混養(yǎng)卵形鯧鲹的密度不宜過高。

各混養(yǎng)組對蝦存活率均高于單養(yǎng)組，其中F12組顯著高于單養(yǎng)組。卵形鯧鲹是肉食性魚類，可快速捕食死蝦和病蝦，切斷病害傳播途徑，提高對蝦的存活率[28-30]。許多魚類黏液具有抗菌、抗真菌和細胞毒（殺傷帶抗原的靶細胞）活性，與對蝦混養(yǎng)后可以降低水體致病菌的數(shù)量，有助于改善養(yǎng)殖環(huán)境，提高對蝦存活率[31,32]。先前的研究均表明：混養(yǎng)過多的魚會導致對蝦存活率比單養(yǎng)組低[3,5,9]，但本研究中混養(yǎng)組凡納濱對蝦的存活率均大于對蝦單養(yǎng)組，這是由于混養(yǎng)的卵形鯧鲹規(guī)格合適，其口徑小，不能捕食對蝦。

綜上所述，養(yǎng)殖1 個月的凡納濱對蝦（3.4 g/尾，放養(yǎng)密度為7.2×105尾/hm2）和卵形鯧鲹（65 g/尾，放養(yǎng)密度為5 000 尾/hm2）混養(yǎng)，可以改善池塘的水質，提高凡納濱對蝦的生長性能和產(chǎn)量。