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      微生物法提取黃精多糖及體外降脂功能評價

      2021-06-01 03:45:40
      關(guān)鍵詞:膽酸黃精菌種

      (東北林業(yè)大學(xué) 林學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150040)

      脂代謝紊亂是一種或多種脂蛋白濃度或組成發(fā)生異常,包括總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平升高,或高密度脂蛋白水平不足[1]。長期脂質(zhì)積累會引發(fā)代謝綜合征[2]、非酒精性脂肪肝[3]、肥胖[4]、2型糖尿病[5]等全身性疾病。膽汁酸是由肝細(xì)胞中膽固醇合成的兩親性類固醇物質(zhì),膽汁酸的衍生物膽酸鹽具有極強的乳化性質(zhì),有助于脂類物質(zhì)在小腸內(nèi)的消化吸收,膽固醇和膽酸鹽直接或間接地參與機體脂類代謝[6]。降低膽固醇和膽酸鹽水平可有效緩解血脂水平,降低此類疾病的發(fā)病率。通過評價樣品膽固醇與膽酸鹽的結(jié)合能力可以預(yù)測樣品是否具有降脂潛力。臨床實驗中發(fā)現(xiàn)許多傳統(tǒng)西藥可用于血脂異常的治療中,但普遍具有嚴(yán)重的副作用,例如橫紋肌溶解、肌病和肝酶異常等[8]。目前迫切需要開發(fā)一種藥物或營養(yǎng)保健食品來預(yù)防或治療此類疾病。天然來源的植物化合物因其療效佳和安全性高而成為治療血脂異常的新策略,至今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多植物多糖具有藥物治療作用。

      黃精為百合科黃精屬多年生草本植物,又名老虎姜、雞頭參,在我國已有兩千多年的栽培歷史。根據(jù)原植物差異,黃精可分為姜形黃精、雞頭黃精和大黃精。中醫(yī)黃精常用于治療陰虛肺燥、干咳久咳、內(nèi)熱消渴及脾胃虛弱等癥。李時珍在《本草綱目》中也曾記載黃精有“補諸虛、填精髓、平補氣血而潤”的作用[9]。黃精多糖是黃精中主要且含量最多的活性成分,研究顯示其含量最高可達(dá)22%[10]。黃精多糖具有降血糖、降血脂、增強免疫功能等多種功效[11-12]。目前,各種提取方式,例如熱水浸提[10]、堿提[13]、酶法提取[14-15]和超聲提取[16]等,被廣泛應(yīng)用在植物多糖組分的提取中。而微生物發(fā)酵技術(shù)作為一種新興的提取技術(shù),近年來一直備受關(guān)注。微生物發(fā)酵技術(shù)借助發(fā)酵菌種對樣品進行發(fā)酵處理,通??商岣咧参镉行С煞值奶崛『炕蜻_(dá)到生物轉(zhuǎn)化的效果[17]。劉平平等[18]研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)微生物發(fā)酵處理后不但可提高三七多糖的提取率,還增強了其抗炎功效。劉玉輝等[19]利用微生物發(fā)酵技術(shù)提取的玉米芯多糖率比未發(fā)酵提高了20.16%,同時也提高了玉米心的益生功能。

      因此,本實驗采用微生物發(fā)酵技術(shù)對黃精多糖的提取工藝進行優(yōu)化,選擇一種既能使提取含量最大化又保證了其活性功能的提取方法,為開發(fā)新型降脂藥物提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材 料

      黃精于2018年12月采自貴州省印江縣(經(jīng)貴州省中藥材產(chǎn)業(yè)黃精專家組專家龍昌順鑒定為百合科植物多花黃精的干燥根莖)。將黃精除雜烘干,粉碎,過60目篩后,將其浸泡于95%乙醇溶液12 h脫脂,置于通風(fēng)處蒸干溶劑后得到脫脂原料,儲存在干燥器中備用;植物乳桿菌,由東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院食品微生物實驗室提供。

      1.2 試驗方法

      1.2.1 試劑與設(shè)備

      試劑:葡萄糖、膽固醇、?;悄懰徕c,上海源葉生物科技有限公司;胃蛋白酶、胰蛋白酶,Biotopped公司;所有試劑均為分析純,無需處理,可直接使用。

      設(shè)備:SW-CJ-IFD超凈工作臺,北京思博晟達(dá)科技有限公司;HY-200標(biāo)準(zhǔn)篩(60 目),北京祥宇偉業(yè)儀器設(shè)備有限公司;JA2003分析天平,上海良平儀器儀表有限公司;DK-8D電熱恒溫水槽,上海森信實驗儀器有限公司;RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生化儀器公司;IS-RSDS型臺式恒溫振蕩器,上海捷呈實驗儀器有限公司;TGL-16G臺式離心機,上海安亭科學(xué)儀器廠;722s型紫外分光光度計,上海第三分析儀器廠。

      1.2.2 菌種活化

      將植物乳桿菌接入MRS培養(yǎng)基中,在37℃培養(yǎng)16~18 h,如此傳代2次,得到活化菌種(菌落數(shù)達(dá)到1×109cfu/mL以上),備用。

      1.2.3 微生物發(fā)酵法提取黃精多糖工藝的優(yōu)化

      1)培養(yǎng)基條件(原料添加量、葡萄糖添加量和接種量)對黃精多糖提取含量的影響

      向裝有等量蒸餾水的錐形瓶中添加一定質(zhì)量分?jǐn)?shù)的脫脂黃精粉(1%、3%、5%、7%、9%)和葡萄糖(0%、0.25%、0.5%、0.75%、1%)制備發(fā)酵培養(yǎng)基,經(jīng)115℃滅菌20 min后,再以不同的接種量(v/v)(1%、3%、5%、7%、9%)接種于室溫冷卻后的發(fā)酵培養(yǎng)基中,在37℃條件下靜置培養(yǎng)24 h后4 000 r/min離心20 min,得上清液即待測液,通過數(shù)據(jù)分析篩選出最佳的原料添加量、葡萄糖添加量和接種量。

      2)發(fā)酵條件(溫度和時間)對黃精多糖提取含量的影響

      在上述篩選得到的最佳原料添加量、葡萄糖添加量和接種量條件下,分別在一定溫度條件(31、34、37、40、43℃)和發(fā)酵時間(12、24、36、48、60 h)下對菌種進行培養(yǎng),然后4 000 r/min離心20 min,得上清液即待測液,通過數(shù)據(jù)分析篩選出最佳的發(fā)酵溫度和發(fā)酵時間。

      1.2.4 響應(yīng)面試驗優(yōu)化提取工藝

      綜合單因素實驗結(jié)果,選取單因素參數(shù)范圍內(nèi)黃精多糖提取含量變化范圍較大的因素進行響應(yīng)面優(yōu)化。因此,以發(fā)酵時間(A)、原料添加量(B)、葡萄糖添加量(C)、接種量(D)4個因素進行考察,以多糖提取含量為響應(yīng)值,采用Design Expert 8.0.6軟件Box-Behnken的中心組合設(shè)計原理建立四因素三水平的試驗[20],進行二次多項回歸方程擬合及其優(yōu)化分析。因素水平如表1所示。

      表1 響應(yīng)面條件優(yōu)化試驗因素水平Table 1 Factors and levels of response surface optimization test

      1.3 不同提取方法的比較

      分別用熱水浸提法、超聲輔助提取法和微生物法提取黃精多糖,取3種待測液用于測定多糖提取含量;將待測液濃縮至原來體積的1/3,緩慢加入4倍于濃縮液體積的95%乙醇進行醇沉,邊加邊攪動,在4℃條件下靜置過夜,離心棄去上清液,所得沉淀經(jīng)真空干燥后用于測定膽固醇和膽酸鹽的結(jié)合量。

      熱水浸提法采用韓春楊等[21]的提取方法并根據(jù)實際情況略作修改,具體方法如下:準(zhǔn)確稱取1.1中的脫脂原料,在料液比19∶1、提取時間3.5 h、提取溫度73℃條件下對脫脂原料進行提取。

      超聲輔助提取法采用駱文燦等[22]的提取方法并根據(jù)實際情況略作改動,具體方法如下:準(zhǔn)確稱取1.1中的脫脂原料,在料液比18∶1、超聲處理時間60 min、浸提溫度73℃、超聲功率153 W條件下對脫脂原料進行提取。

      微生物法采用1.2.4中的最佳優(yōu)化工藝。

      1.4 多糖含量的測定

      總糖含量的測定采用苯酚-硫酸法[23]并稍作修改,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算回歸方程為y=0.013 1x-0.037 0,R2=0.999,線性范圍為10~50 μg/mL,線性關(guān)系良好。還原糖含量的測定采用DNS法[24]并稍作修改,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算回歸方程為y=1.115 7x-0.032 3,R2=0.999 7,線性范圍為0.15~0.45 mg/mL,線性關(guān)系良好。其中總糖含量和還原糖含量均為提取液離心后得到的待測液中測得。公式如下:

      式中:P為多糖含量,%;m1為總糖含量,g;m2為還原糖含量,g;M為原料質(zhì)量,g。

      1.5 膽固醇結(jié)合試驗

      1.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      參考金秋[25]的研究方法并稍作修改,配制并移取不同梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)膽固醇溶液(0.05、0.075、0.100、0.125、0.150 mg/mL)0.4 mL于具塞試管中,后加入0.2 mL鄰苯二甲醛溶液和混酸(V濃硫酸∶V冰乙酸=1∶1)4 mL,37℃水浴10 min,在OD550nm處測定吸光值。以膽固醇濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=3.688 0x-0.005 9,R2=0.999 0。

      1.5.2 膽固醇結(jié)合量的測定

      采用鄰苯二甲醛法測定膽固醇含量[26]。取50 mL10 mg/mL多糖樣品與100 mL 1 mg/mL膽固醇溶液混合,分別調(diào)節(jié)pH值為2和7(為模擬腸胃環(huán)境),在轉(zhuǎn)速80 r/min、37℃恒溫振蕩2 h,取0.4 mL待測溶液加入0.2 mL鄰苯二甲醛溶液和混酸(V濃硫酸∶V冰乙酸=1∶1)4 mL,37℃水浴10 min,在4 000 r/min下離心20 min,取上清液進行膽固醇的測定。計算公式如下:

      C=C1-C2。

      式中:C為膽固醇結(jié)合量,mg/g;C1為膽固醇加入量,mg/g;C2為膽固醇剩余量,mg/g。

      1.6 膽酸鹽結(jié)合試驗

      1.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      參考劉爽爽等[27]的方法并稍作修改,配制并移取不同梯度質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)?;悄懰徕c溶液(0.025 0、0.050 0、0.062 5、0.075 0、0.100 0 mg/mL)2 mL于具塞試管中,加入6 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)60%的H2SO4溶液,在70℃水浴20 min,取出后流水冷卻至室溫,在OD387nm處測定吸光值。以膽酸鹽濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=5.272 4x+0.102 5,R2=0.990 9。

      1.6.2 ?;悄懰徕c結(jié)合量的測定

      取1 mL 2 mg/mL樣品溶液,為模擬腸胃環(huán)境,加入1 mL HCl (0.01 mol)37℃恒溫振蕩1 h后,0.1 mol NaOH調(diào)pH值為6.3,隨后加入4 mL 10 mg/mL胰酶(以pH值6.3的0.1 mol/L磷酸緩沖液配制)37℃恒溫振蕩1 h,再加入4 mL 2 mg/mL牛磺膽酸鈉溶液(以pH值6.3的0.1 mol/L磷酸緩沖液配制),繼續(xù)37℃振蕩1 h。在4 000 r/min下離心20 min,取上清液進行膽酸鹽的測定。計算公式如下:

      D=d1-d2。

      式中:D為?;悄懰徕c結(jié)合量,mg/g;d1為?;悄懰徕c初始量,mg/g;d2為牛磺膽酸鈉剩余量,mg/g。

      1.7 統(tǒng)計學(xué)分析

      實驗中的數(shù)據(jù)均平行測定3次,以x±s表示,基礎(chǔ)數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用Excel軟件,作圖采用Origin8.5軟件,顯著性分析采用SPSS19.0軟件完成。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 單因素實驗結(jié)果

      綜合單因素試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),發(fā)酵時間、原料添加量、接種量和葡萄糖添加量對多糖提取含量影響較大,唯獨發(fā)酵溫度對其影響相對較小。由圖1可知,隨著發(fā)酵時間的延長,多糖含量不斷提高,這是因為在發(fā)酵過程中菌種代謝產(chǎn)生強大酶系破壞植物細(xì)胞結(jié)構(gòu),提高黃精多糖溶出率。發(fā)酵24 h時,多糖含量達(dá)29.73%。繼續(xù)延長發(fā)酵時間,植物多糖類化合物也可作為微生物的能源物質(zhì)使多糖提取含量下降[28]。因此,確定提取黃精多糖的時間為24 h。隨著原料添加量的增加,微生物發(fā)酵作用也隨之增強,使多糖含量增加,當(dāng)原料添加量過高時多糖含量反而降低,因為黃精作為一種藥食兩用中藥植物,未經(jīng)炮制前具有一定的刺激性和毒性[29],抑制菌種生長,造成多糖含量下降。故原料最佳添加量為3%。接種量過高或過低都會影響菌種進入對數(shù)生長期的速度,發(fā)酵初期菌種的菌齡影響整個發(fā)酵過程,因此選擇合適的接種量使其在多糖提取中發(fā)揮最大作用十分重要。接種量為5%時可很好地保持菌種高度活性,此時測得多糖含量最大,故而最佳接種量為5%。發(fā)酵初期適當(dāng)添加葡萄糖可縮短菌種進入穩(wěn)定期的時間,有效地減少發(fā)酵時間,降低成本。但葡萄糖添加量過大時,其代謝產(chǎn)生的大量葡萄糖苷酶反而會造成發(fā)酵液中多糖含量大幅下降,導(dǎo)致不必要的浪費,故選擇0.25%為葡萄糖最優(yōu)添加量。發(fā)酵過程中溫度升高,菌體胞內(nèi)酶的活性增強,菌群保持較強活力[30],進而影響黃精多糖的提取含量。溫度過高或過低都會抑制菌種的生長代謝,發(fā)酵不充分,降低多糖含量,故而選擇37℃作為最佳溫度。

      圖1 單因素實驗結(jié)果Fig.1 The results of complete randomalized design

      2.2 響應(yīng)面優(yōu)化試驗

      在單因素的基礎(chǔ)上,以發(fā)酵液中多糖含量(Y)為響應(yīng)值,根據(jù)Box-Behnken中心組合試驗設(shè)計原理,通過Design Expert 8.0.6軟件設(shè)計響應(yīng)面法試驗,考察發(fā)酵時間(A)、原料添加量(B)、接種量(C)、葡萄糖添加量(D)4個因素對黃精發(fā)酵液中多糖含量的影響,優(yōu)化方案及結(jié)果見表2。

      表2 中心組合試驗設(shè)計方案及結(jié)果Table 2 Central composite design matrix and experimental results

      2.2.1 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果

      各因素經(jīng)回歸擬合后,解得回歸方程為:

      由表3可知,該回歸模型的回歸效果極顯著(P<0.000 1),線性關(guān)系較好(R2=0.910 7)。失擬項P=0.145 2>0.05不顯著,說明未知因素對試驗結(jié)果的干擾較小,該試驗?zāi)P统浞謹(jǐn)M合試驗數(shù)據(jù),可以用于確定提取黃精多糖的最佳工藝。由表3中F值可判斷各因素對響應(yīng)值的影響,結(jié)果顯示:4個因素對響應(yīng)值的影響大小順序為C>D>B>A,即葡萄糖添加量>接種量>原料添加量>發(fā)酵時間。B、C、D、AD、BC、BD、A2、B2、C2、D2的P值均<0.05,其中B、D、AD、BD對黃精多糖提取含量的影響顯著(P<0.05),C、BC、A2、B2、C2、D2對黃精多糖提取含量的影響高度顯著(P<0.01)。

      表3顯示,PCD>PAC>PAB>PAD>PBD>PBC,比較P值可知接種量與葡萄糖添加量的交互作用對黃精多糖提取含量干擾最小,而葡萄糖與原料添加量的交互作用對黃精多糖提取含量干擾最大。根據(jù)發(fā)酵時間、原料添加量、接種量和葡萄糖添加量四個因素交互作用與響應(yīng)值的關(guān)系得出三維響應(yīng)面和等高線,結(jié)果見圖2。響應(yīng)面坡度越陡且等高線越接近橢圓,代表兩兩因素交互作用越顯著[31]。由圖2可知,BC曲面拱形明顯更陡峭且等高線為橢圓形,其次是AD和BD,這說明葡萄糖與原料添加量交互作用最為顯著(P<0.01),然后是接種量與發(fā)酵時間、接種量與原料添加量(P<0.05)。而AB、AC、CD曲面拱形不明顯,等高線形狀較圓潤,說明發(fā)酵時間和原料添加量、葡萄糖添加量與發(fā)酵時間、接種量和葡萄糖添加量兩兩之間的交互作用不顯著(P>0.05),與方差分析結(jié)果一致。

      表3 回歸模型的方差分析?Table 3 Results of variance analysis of regression model

      圖2 不同因素對黃精多糖提取含量的影響Fig.2 Response surface and contour for interactive effects of different factors on extraction content of PSP

      續(xù)圖2Continuation of Fig.2

      2.2.2 最佳工藝參數(shù)及驗證

      通過Design Expert 8.0.6軟件分析,確定微生物發(fā)酵提取黃精多糖最佳工藝條件為:發(fā)酵時間26 h,原料添加量4%,葡萄糖添加量0.38%,接種量7%,在此優(yōu)化條件下發(fā)酵液中多糖含量可達(dá)33.92%。結(jié)合實際,將工藝條件修改為:發(fā)酵時間26 h,原料添加量4%,葡萄糖添加量0.4%,接種量7%。在此優(yōu)化條件下做3次平行驗證試驗,黃精多糖提取率實際值為33.11%,與預(yù)測值相差不大,說明響應(yīng)面分析法優(yōu)化得到的模型參數(shù)具有可靠性。

      2.3 不同提取方法黃精多糖的提取率、膽固醇及膽酸鹽結(jié)合能力的測定

      人體肝臟中膽固醇分解成膽汁酸,而膽汁酸的衍生物膽汁鹽具有很強的乳化脂肪的能力,可促進脂肪的消化吸收,牛磺膽酸鹽是膽酸鹽的主要成分之一[32-33]。許多植物多糖由于其可結(jié)合膽酸鹽阻斷機體對膽酸鹽的重吸收作用或可將他們移除,所以具有一定的降脂作用[34]。因此,此實驗對比3種提取方法的黃精多糖對?;悄懰徕c和膽固醇的吸附能力。由表4可知,基于提取原理的差異,不同提取方法的多糖含量呈現(xiàn)顯著差異(P<0.05)。微生物發(fā)酵技術(shù)提取的黃精多糖含量最高,可達(dá)(33.11±1.23)%;其次是超聲波輔助提取法和熱水浸提法,多糖含量分別為(29.72±0.84)%、(27.51±0.77)%。微生物發(fā)酵技術(shù)利用微生物代謝產(chǎn)生活性酶可破壞植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性,有助于活性物質(zhì)溶出,與此同時也常常伴有生物轉(zhuǎn)化發(fā)生,對活性成分有一定的修飾和轉(zhuǎn)化作用[35]。超聲輔助提取技術(shù)則是利用超聲波空化效應(yīng)破壞植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)的方式使更多目標(biāo)物質(zhì)溶出[16,22],這兩種方法最終均達(dá)到了提高多糖含量的目的。另外推測微生物發(fā)酵技術(shù)中發(fā)酵菌種自身代謝產(chǎn)生的胞外多糖也有助于此實驗中多糖含量的升高[36]。由表4還可看出,微生物發(fā)酵技術(shù)提取的黃精多糖膽固醇(pH值7)及膽酸鹽結(jié)合能力顯著高于其他兩種方法(P<0.05),分別為96.58±0.48、297.10±0.71 mg/g;而熱水浸提法提取的黃精多糖膽固醇(pH值7,pH值2)及膽酸鹽結(jié)合能力顯著高于超聲輔助提取技術(shù)(P<0.05)。雖然超聲輔助提取技術(shù)增大了黃精多糖的提取含量,但由于超聲過程會引起大分子多糖發(fā)生降解,破壞了多糖結(jié)構(gòu),因此對黃精多糖的活性功能有所影響[37]。熱水浸提法因其在提取過程中對樣品進行長時間加熱,最終造成黃精多糖提取含量損失及結(jié)構(gòu)的破壞,這與其膽固醇、膽酸鹽結(jié)合能力降低密切相關(guān)。因此,可推測微生物發(fā)酵技術(shù)提取條件較溫和,不僅提高了黃精多糖的提取含量,還最大程度地保護了多糖結(jié)構(gòu),避免其因為高溫失去活性而降低其膽固醇、膽酸鹽的結(jié)合能力。

      表4 不同提取方法的結(jié)果及比較?Table 4 The results of different extraction methods and comparison

      3 結(jié)論與討論

      首先,此次實驗以黃精多糖的提取含量為指標(biāo),通過單因素響應(yīng)面試驗對微生物法提取黃精多糖的提取工藝進行優(yōu)化,優(yōu)化后的最佳工藝條件為:發(fā)酵時間26 h,原料添加量4%,葡萄糖添加量0.4%,接種量7%,在此工藝條件下黃精多糖的提取含量為33.11%。然后,對比熱水浸提法、超聲波輔助提取技術(shù)及微生物法在黃精多糖提取含量、膽固醇及膽酸鹽體外結(jié)合能力三方面的差異。與其他兩種提取技術(shù)相比,微生物發(fā)酵技術(shù)不僅成本低廉、提取含量高,同時還能保證黃精多糖類化合物的高藥理活性,使其具有明顯的降脂效果。

      由于微生物生長代謝促進活性成分分離,從而產(chǎn)生新功效,增強藥用價值,微生物發(fā)酵技術(shù)開始廣泛應(yīng)用于植物功能性成分的開發(fā)中。植物中的有效成分大多儲存在結(jié)構(gòu)致密的細(xì)胞壁中,在進行植物有效成分提取時,有效成分必須穿過細(xì)胞壁和細(xì)胞間質(zhì)雙重阻礙,而微生物在生長、繁殖、代謝過程會分泌大量酶系,包括纖維素酶、蛋白酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶等胞外酶,可破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),進而提高植物中有效成分的溶出率,使植物中的目標(biāo)組分被充分提取并利用[38]。由此可合理推測本研究利用植物乳桿菌自身生長代謝過程中產(chǎn)生的纖維素酶、半纖維素酶等破壞了黃精植物細(xì)胞壁的完整性,使得多糖物質(zhì)大量溶出,進而提高了黃精多糖的提取含量。焦方文等[39]研究發(fā)現(xiàn)益生菌發(fā)酵后的炒麥芽多糖含量比發(fā)酵前增加了38.64%,此結(jié)果與本實驗結(jié)果相似。有研究認(rèn)為發(fā)酵后植物中的某種有效成分活性增強是因為微生物的生長代謝具有強大的分解轉(zhuǎn)化能力,將許多不能被機體直接利用的大分子活性物質(zhì)降解成更具活性的小分子物質(zhì)[40],如有文獻(xiàn)表明經(jīng)益生菌發(fā)酵后鐵皮石斛多糖的抗炎活性卻有所增強,研究者推測其原因為微生物對多糖的降解作用,使其甘露糖比例顯著升高引起的[41]。還有研究表明植物乳桿菌代謝產(chǎn)生的胞外多糖具有很強的膽固醇吸附能力[42],因此,這也可作為微生物法提取黃精多糖具有較強的膽固醇吸附能力的原因。由此可見,微生物發(fā)酵技術(shù)在天然植物化合物的提取及開發(fā)中具有良好的應(yīng)用前景。

      另外,本次實驗僅研究了微生物發(fā)酵對黃精多糖提取率及體外降脂能力的判斷,而微生物發(fā)酵技術(shù)對黃精多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)包括單糖組成、分子量、構(gòu)象等方面的影響還沒有系統(tǒng)的研究,以及多糖分子結(jié)構(gòu)與其降脂活性的關(guān)系和相關(guān)機制還有待深入探討與分析。

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