丁威凌霞石潔董杰吳亞玲祝宏

1浙江省血液中心，浙江省血液安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，杭州310052；2浙江省血液中心檢驗(yàn)科，杭州310052

患者在臨床輸血治療過(guò)程中存在感染輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)，因此自2016年起，我國(guó)規(guī)定必須對(duì)獻(xiàn)血者血液進(jìn)行HBV、HCV和HIV核酸檢測(cè)，在檢測(cè)過(guò)程發(fā)現(xiàn)了部分血清學(xué)檢測(cè)的窗口期樣本，有效提升了血液安全[1-3]。為了解血液核酸檢測(cè)實(shí)施后，杭州市無(wú)償獻(xiàn)血人群HIV感染者的特性，本文回顧性分析了2015—2020年獻(xiàn)血人群HIV感染者的檢測(cè)情況，現(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

將2015—2020年浙江省血液中心獻(xiàn)血登記地為杭州市的無(wú)償獻(xiàn)血者納入本次研究，收集HIV感染者的性別、年齡、文化程度、獻(xiàn)血次數(shù)、性行為特征等信息。所有獻(xiàn)血者樣本的留取和檢測(cè)均遵循知情同意的原則。

二、主要儀器設(shè)備

血清學(xué)檢測(cè)主要設(shè)備是瑞士哈曼頓公司的自動(dòng)加樣儀（型號(hào)STAR 8CH）和自動(dòng)酶聯(lián)免疫處理系統(tǒng) （型號(hào)FAME 24/30）。核酸檢測(cè)設(shè)備為西班牙Grifols公司的Panther平臺(tái)或者羅氏診斷產(chǎn)品有限公司的Cobas s201系統(tǒng)。

三、HIV抗體、HIV RNA檢測(cè)

采用ELISA方法檢測(cè)獻(xiàn)血者樣本的HIV抗體，每個(gè)樣本使用2個(gè)不同廠家試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司、美國(guó)Bio-Rad公司），所用試劑均經(jīng)過(guò)國(guó)家藥品管理局的批檢許可，操作嚴(yán)格按照設(shè)備和試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。每個(gè)試劑第1次檢測(cè)HIV抗體反應(yīng)性的樣本，均采用原試劑再次檢測(cè)2孔。按照試劑說(shuō)明書(shū)設(shè)置并計(jì)算樣本檢測(cè)吸光度值與cut off的比值（COI值）。0.85≤COI值<1.00設(shè)置為檢測(cè)“灰區(qū)”。

采用西班牙Grifols公司的Procleix Ultrio Elite血液核酸聯(lián)合檢測(cè)試劑或者羅氏診斷產(chǎn)品有限公司的TaqScreen MPX v2.0核酸聯(lián)合檢測(cè)試劑。每例樣本只采用1種核酸試劑檢測(cè)1次HIV RNA。

四、HIV抗體、HIV RNA的確認(rèn)

單一試劑第一孔反應(yīng)性再次檢測(cè)，若雙孔復(fù)測(cè)均無(wú)反應(yīng)性，則樣本在該試劑判定為陰性；雙孔反應(yīng)性或者有一孔反應(yīng)性，則樣本在該試劑為反應(yīng)性。兩個(gè)不同廠家檢測(cè)均呈現(xiàn)反應(yīng)性或者一個(gè)廠家試劑檢測(cè)呈現(xiàn)反應(yīng)性，判定樣本反應(yīng)性。兩個(gè)不同廠家檢測(cè)均無(wú)反應(yīng)性，判定樣本陰性。

核酸試劑檢測(cè)無(wú)反應(yīng)性，則樣本判定為陰性；有反應(yīng)性，則樣本判定為HIV RNA陽(yáng)性。

HIV抗體檢測(cè)、核酸檢測(cè)有反應(yīng)性樣本按照有關(guān)規(guī)定送杭州市疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行確認(rèn)，方法按照中國(guó)疾病預(yù)防控制中心頒布的《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范（2020年修訂版）》的有關(guān)規(guī)定。確認(rèn)為HIV抗體陽(yáng)性或者核酸檢測(cè)有反應(yīng)性，則樣本為HIV檢測(cè)陽(yáng)性，判定獻(xiàn)血者感染HIV。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，考慮到獻(xiàn)血者在單一年度存在多次獻(xiàn)血的現(xiàn)象，統(tǒng)計(jì)分析中調(diào)整為人數(shù)進(jìn)行計(jì)算（即一個(gè)獻(xiàn)血者在單一年度多次獻(xiàn)血計(jì)算為一個(gè)人）。計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)和率表示，年度感染率比較采用趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、獻(xiàn)血人群HIV感染率

2015—2020年共檢測(cè)來(lái)自901 586名獻(xiàn)血者的1 063 980份血液樣本，各年度檢測(cè)樣本、人數(shù)分布見(jiàn)表1。共檢測(cè)出HIV陽(yáng)性138例，陽(yáng)性率為1.53/萬(wàn)。各年度獻(xiàn)血人群中HIV陽(yáng)性率見(jiàn)表1，其中2016年的陽(yáng)性率最高為2.28/萬(wàn)，2019年最低為0.88/萬(wàn)，2015—2020年的年度HIV陽(yáng)性率呈下降趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2趨勢(shì)=11.457，P＜0.05）。

表1 2015—2020年杭州市獻(xiàn)血人群HIV檢出情況

二、HIV感染者的一般特性

138例HIV感染者中男性129例 （93.48%），大多數(shù)為首次獻(xiàn)血者（92例，66.67%）、年齡分布中以25～34周歲最高（55例，39.86%）、教育程度以大學(xué)學(xué)歷最高（50例，36.23%）。詳見(jiàn)表2。129例男性HIV感染者，流行病學(xué)調(diào)查顯示存在性傳播特征的共117例，其中男男性行為感染占53.85%（63例），異性性行為感染占46.15%（54例）。

表2 2015—2020年浙江省血液中心獻(xiàn)血人群中138例HIV感染者的一般特性

三、樣本HIV抗體檢測(cè)COI值分布情況

138例HIV感染者的樣本經(jīng)2個(gè)試劑檢測(cè)，COI值分布見(jiàn)圖1。試劑1主要分布在COI值＞13.0區(qū)域 （86份，62.32%），而試劑2主要分布在10.1～11.0 （78份，56.52%），試劑2檢測(cè)的COI更為集中。2個(gè)試劑能檢出135例陽(yáng)性，但每個(gè)試劑均有4份樣本COI值＜1.0（該試劑HIV抗體檢測(cè)判定為陰性），其中3份樣本2個(gè)試劑COI值均＜1.0，2份樣本只有單一試劑COI值＜1.0。

圖1 HIV感染者樣本HIV抗體檢測(cè)COI值分布情況

四、HIV窗口期樣本結(jié)果

138份HIV感染者的樣本經(jīng)HIV RNA檢測(cè)均為陽(yáng)性，其中3份樣本血清學(xué)檢測(cè)為陰性，可判定為血清學(xué)檢測(cè)窗口期樣本。進(jìn)一步追蹤這3份樣本的獻(xiàn)血者，在2～4周后均顯示HIV抗體陽(yáng)性。

討 論

據(jù)報(bào)道，一般情況下獻(xiàn)血人群病原體感染性標(biāo)志物陽(yáng)性率遠(yuǎn)低于普通人群[4-5]。本文結(jié)果顯示，獻(xiàn)血人群HIV感染率為1.53/萬(wàn)，明顯低于2002年陳衛(wèi)永等[6]報(bào)道的杭州市區(qū)高危人群的調(diào)查結(jié)果（0.27%），這可能是獻(xiàn)血人群經(jīng)過(guò)了宣傳教育、健康征詢(xún)和自我排除等過(guò)程的篩選，淘汰了部分感染者。此外部分合格的獻(xiàn)血者多次參與重復(fù)獻(xiàn)血，因此整體上其HIV感染率較低，這有利于保證血液安全[7]。

本文回顧性分析獻(xiàn)血人群HIV感染者情況，結(jié)果表明HIV感染者絕大多數(shù)為男性，根據(jù)杭州市疾病預(yù)防控制中心對(duì)這些HIV感染者的流行病學(xué)調(diào)查資料，其感染途徑多為男男同性性行為。盡管多數(shù)HIV感染者為首次獻(xiàn)血，但是仍有一定比例的感染者既往有獻(xiàn)血史，最多的1例獻(xiàn)血次數(shù)為59次，特別是個(gè)別單采獻(xiàn)血者發(fā)現(xiàn)HIV感染的時(shí)間與上一次獻(xiàn)血間隔時(shí)間并不長(zhǎng)（最短為1個(gè)月），提示有必要加強(qiáng)獻(xiàn)血人群的宣傳教育。前期研究顯示本中心獻(xiàn)血人群中18～24周歲占比例最高，這與高校學(xué)生積極參與獻(xiàn)血有關(guān)[4]。本研究中HIV感染者的年齡分布中以25～34周歲比例最高，這與既往報(bào)道一致[8-9]，但應(yīng)注意到部分HIV感染者為高校學(xué)生，需要在高校中采取合適的宣傳教育和干預(yù)措施。

本次研究在采用2種不同廠家試劑檢測(cè)獻(xiàn)血者血液HIV抗體的基礎(chǔ)上，從2010年開(kāi)始對(duì)獻(xiàn)血者血液樣本進(jìn)行HIV核酸檢測(cè)。分析獻(xiàn)血人群HIV感染者ELISA方法檢測(cè)的COI值分布情況，發(fā)現(xiàn)2份樣本只有單一試劑陽(yáng)性，提示另外一個(gè)試劑漏檢該樣本。分析兩個(gè)血清學(xué)試劑檢測(cè)的COI值，大多數(shù)樣本的COI值大于8.0，提示HIV感染者通常情況為強(qiáng)陽(yáng)性，但應(yīng)注意到部分樣本COI值1.0～2.0間，這在檢測(cè)中應(yīng)加以關(guān)注。此外，本研究中發(fā)現(xiàn)3份HIV血清學(xué)窗口期樣本，提示血液核酸檢測(cè)具有較好的檢測(cè)能力，可有效提升血液安全[10-11]。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突