桂枝茯苓膠囊內(nèi)容物正丁醇和醋酸乙酯萃取部位的化學(xué)成分研究

鄭睿伶

(溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院 浙江溫州 325035)

為了進(jìn)一步闡明桂枝茯苓膠囊復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究運(yùn)用現(xiàn)代中藥化學(xué)方法分離純化了其中的化學(xué)成分并鑒定了其結(jié)構(gòu)，以期將其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及藥物配伍后新的化學(xué)成分產(chǎn)生情況探索出來。在前期研究基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了桂枝茯苓膠囊的化學(xué)成分，從該方的醋酸乙酯層分離將2個(gè)單體化合物獲取過來，分別鑒定為白芍苷R1、paeonidanin B；從正丁醇層中分離將2個(gè)化合物獲取過來，分別鑒定為isomaltopaeoniflorin、羥基芍藥苷。白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin首次從該復(fù)方中分離獲取，現(xiàn)報(bào)道如下。

一、方法

用95%乙醇對15.0kg桂枝茯苓膠囊內(nèi)容物進(jìn)行4次回流提取，每次2h，減壓濃縮提取液到浸膏，將水混懸液制作出來后先用石油醚進(jìn)行4次萃取，然后用氯仿進(jìn)行4次萃取，之后用醋酸乙酯進(jìn)行4次萃取，最后用正丁醇進(jìn)行4次萃取，將萃取液合并后蒸干備用。將300g醋酸乙酯萃取部位浸膏提取出來，經(jīng)硅膠柱色譜后對其進(jìn)行梯度洗脫，梯度洗脫過程中用二氯甲烷-甲醇，將9個(gè)瘤份Fr.A1-A9獲取過來。經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜處理Fr.A3，對其進(jìn)行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經(jīng)制備型HPLC，將流動(dòng)相設(shè)定為32%乙腈，將化合物1獲取過來，為40mg。經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜處理Fr.A4，對其進(jìn)行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經(jīng)制備型HPLC分離，之后對其進(jìn)行反復(fù)純化，純化過程中用27%乙腈，將化合物2獲取過來，為110mg。將100g正丁醇萃取部位浸膏取出來，經(jīng)硅膠柱色譜，然后對其進(jìn)行梯度洗脫，梯度洗脫過程中用醋酸乙酯-甲醇，將6個(gè)瘤份Fr.B1-B6獲取過來，其中經(jīng)Sephadex LH-20對Fr.B3進(jìn)行洗脫，洗脫過程中用1:1二氯甲烷-甲醇，然后經(jīng)制備型HPLC進(jìn)行等度洗脫，等度洗脫過程中將流動(dòng)相設(shè)定為13%乙腈-水，將30mg化合物3獲取過來；經(jīng)Sephadex LH-20色譜處理Fr.B2，對其進(jìn)行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經(jīng)制備HPLC進(jìn)行0-1h的梯度洗脫，洗脫過程中用10%-20%乙腈，將化合物4獲取過來，為120mg[1]。

二、結(jié)構(gòu)鑒定

三、討論

桂枝茯苓膠囊的組成成分為5味中藥，即桂枝、涪陵、赤芍、牡丹皮、桃仁，主要功效為活血化瘀等，在卵巢囊腫、痛經(jīng)、子宮內(nèi)膜異位等婦科疾病的治療中得到了極為廣泛的應(yīng)用[2][3]。表1中化合物1、2、3、4數(shù)據(jù)均和相關(guān)醫(yī)學(xué)學(xué)者研究結(jié)果一致，因此，分別鑒定為白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin及羥基芍藥苷。從本研究中我們可以看出，白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin首次從該復(fù)方中分離獲取，白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin及羥基芍藥苷屬于芍藥苷類化合物，值得臨床充分重視。

表1 化合物1、2、3、4的狀態(tài)、mp、ESI-MSm/z情況