徐 凱，黃大鵬

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，黑龍江大慶 163319）

仔豬斷奶體重對保育期及后期生長發(fā)育有極大影響。何余湧等[1]和嚴(yán)鴻林[2]指出，結(jié)合仔豬器官發(fā)育和生長性能得到最大程度發(fā)揮，仔豬適宜的斷奶重為6.60～7.60 kg；因此，如何提高斷奶仔豬（尤其是低斷奶重仔豬）生長性能對現(xiàn)場生產(chǎn)有重要意義。有學(xué)者研究表明，斷奶前后仔豬飼糧中添加維生素E[3]、中藥發(fā)酵副產(chǎn)物[4]、復(fù)合微生態(tài)制劑[5]等營養(yǎng)活性物質(zhì)對豬的生長性能、消化酶活力均具有積極影響；國外早在20 世紀(jì)90 年代便開始將高、低2 種營養(yǎng)水平的飼糧混合配制成營養(yǎng)水平逐漸降低的飼料并以周為階段飼喂，提高豬的日增重、飼料轉(zhuǎn)化效率[6]。在國內(nèi)，大多豬場在仔豬斷奶后使用教槽料過渡3～5 d，然后采用兩階段營養(yǎng)供給模式飼喂高營養(yǎng)水平飼糧，雖然保持了仔豬較高的生長速度，但增加了飼料成本。前人對階段化營養(yǎng)模式在斷奶仔豬生產(chǎn)中應(yīng)用效果的研究大多停留在生長性能方面，缺乏系統(tǒng)、全面的理論數(shù)據(jù)依據(jù)。本試驗參考前人[1-2]研究提出的適宜斷奶重范圍和本批次仔豬體重分布規(guī)律，設(shè)置低于6.0 kg 為低斷奶重仔豬，7.0～7.5 kg 為正常斷奶重仔豬；將仔豬保育期劃分三階段（過渡階段1～7 d、保育一階段8～28 d、保育二階段29～45 d），并與二階段營養(yǎng)供給模式（過渡階段1～7 d、保育階段8～45 d）對比，以此實現(xiàn)斷奶仔豬飼糧中整體營養(yǎng)水平更加精細(xì)化供給，以期提高仔豬（特別是低斷奶重仔豬）消化器官發(fā)育，提高仔豬對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，并為養(yǎng)豬生產(chǎn)中推廣三階段營養(yǎng)供給模式提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 本試驗采用2×2 兩因素析因試驗設(shè)計。選取96 頭23～25 日齡斷奶的三元（杜×長×大）仔豬，公、母各半，按體重分為低斷奶體重組[（5.59±0.47）kg]、正常斷奶重體組[（7.14±0.22）kg]；分別接受兩階段（1～7、8～45 d）、三階段（1～7、8～28、29～45 d）營養(yǎng)供給模式處理；共計4 個處理組即低斷奶重二階段營養(yǎng)組[K1 組，體重（5.62±0.39）kg）]、低斷奶重三階段營養(yǎng)組[K2 組，體重（5.57±0.40）kg）]、正常斷奶重二階段營養(yǎng)組[K3 組，體重（7.22±0.35）kg]和正常斷奶重三階段營養(yǎng)組[K4 組，體重（7.04±0.42 kg）]，每組6 個重復(fù)，每個重復(fù)4 頭仔豬。試驗從斷奶開始至保育期結(jié)束共計45 d。

1.2 試驗飼糧 參考ΝRC（2012）豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)中5～7、7～11、11～25 kg 階段營養(yǎng)水平分別配制3 種營養(yǎng)水平逐漸降低的飼糧（H、Ν、L）；參考7～11 kg 和11～25 kg階段仔豬營養(yǎng)需要量平均數(shù)配制飼糧（ΝL），并保持4種日糧的賴氨酸含量大于營養(yǎng)需要量的98.5%。委托飼料公司生產(chǎn)成全價顆粒料。飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 飼糧組成和營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 保育舍進(jìn)豬前徹底清洗、消毒、干燥。試驗豬采用高床網(wǎng)上飼養(yǎng)，每個重復(fù)一小欄，豬只采用自動食槽飼喂，保證自由采食；豬舍通風(fēng)良好，保證舍內(nèi)溫度滿足仔豬需求。試驗期間按豬場常規(guī)程序進(jìn)行消毒、疫苗接種、保健、驅(qū)蟲等工作。各處理組仔豬斷奶后飼喂程序：1～7 d 4 組均飼喂H 飼糧，K1 組、K3 組8～45 d 飼喂ΝL 飼糧，K2 組、K4 組8～28 d 飼喂Ν 飼糧，K2 組、K4 組29～45 d 飼喂L 飼糧。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能指標(biāo) 于本批次仔豬斷奶當(dāng)天、試驗結(jié)束日清晨飼喂前對每個重復(fù)內(nèi)的每頭仔豬空腹稱重，計算日增重（ADG）；記錄每天的喂料量，計算日均采食量（ADFΙ）和耗料增重比（F/G）。每天觀察仔豬糞便形態(tài)。糞便呈稠狀、液狀或不成形，糞水不分離時認(rèn)為仔豬發(fā)生腹瀉。每頭仔豬每天為1 個腹瀉頭次，腹瀉率計算公式：

1.4.2 小腸消化酶活力 于斷奶后第1、46 天豬空腹稱重、采血后，仔豬麻醉屠宰，無菌采集十二指腸、空腸各前、中、后3 段各2 cm 區(qū)域內(nèi)容物樣品混合均勻，分別取十二指腸、空腸各內(nèi)容物樣品1 g 左右，并加入9 倍體積生理鹽水稀釋，分裝于1.5 mL 凍存管中，液氮速凍，-80℃保存，待測十二指腸中胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力和空腸中蔗糖酶、乳糖酶、蛋白酶活力，以樣品處理后的總蛋白含量為參照計算各消化酶活力，均采用專用試劑盒結(jié)合分光光度計測定。以上均按照試劑盒說明書正確操作，試劑盒購自江蘇雨桐生物科技有限公司。

1.4.3 小腸絨毛高度、隱窩深度 仔豬麻醉屠宰，無菌采集十二指腸、空腸中段各5 cm 腸段樣品，生理鹽水清洗干凈后，用4%多聚甲醛固定24 h，采用常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，HE 染色，將切片封藏于中性樹膠中，具體操作步驟參考曲長慶等[7]的試驗步驟，先進(jìn)行預(yù)試驗，觀察切片制作質(zhì)量，并對試驗步驟進(jìn)行優(yōu)化。使用尼康正置顯微鏡，應(yīng)用ΝΙS-elements F 4.00.00 照相處理軟件拍照，采用Photo shop CC 軟件測量小腸3 部分樣品的絨毛長度、隱窩深度及計算絨隱比（V/C）。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2013 進(jìn)行初步統(tǒng)計處理，然后利用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件中GLM 進(jìn)行兩因素方差分析并用Duncan′s 法進(jìn)行多重比較，P＜0.01 為差異極顯著，P＜0.05 為差異顯著，結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 營養(yǎng)模式對低斷奶重仔豬生長性能的影響 由表2可知，低斷奶重兩組間、正常斷奶重兩組間初始體重均差異不顯著，4 個處理組間末重差異顯著；三階段營養(yǎng)模式仔豬的末重、ADG 及F/G 均優(yōu)于二階段營養(yǎng)模式仔豬（P＜0.05），ADG 提高了13.09%，F(xiàn)/G 降低了9.64%，腹瀉率減少（P＜0.05）；低斷奶重仔豬的末重、ADG、ADFΙ 分別低于正常斷奶重仔豬20.99%、21.50%、29.38%（P＜0.05），而F/G 高于后者3.90%（P＞0.05）；斷奶重與營養(yǎng)模式互作效應(yīng)對仔豬末重、ADG、ADFΙ、F/G 均具有極顯著影響，但對腹瀉率無互作效應(yīng)。

表2 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬生長性能的影響

2.2 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸消化酶活力的影響由表3 可知，剛斷奶時，低斷奶重仔豬的胰蛋白酶、蔗糖酶、乳糖酶活力（P＜0.01）及脂肪酶活力（P＜0.05）高于正常斷奶重仔豬；正常斷奶重仔豬的淀粉酶活力（P＜0.01）及蛋白酶活力（P＜0.05）高于低斷奶重仔豬。試驗結(jié)束時，二階段營養(yǎng)模式仔豬的胰蛋白酶、淀粉酶活力均高于三階段營養(yǎng)模式仔豬（P＜0.05），三階段營養(yǎng)模式仔豬的脂肪酶、乳糖酶和蛋白酶活力均高于二階段營養(yǎng)模式仔豬（P＜0.05）。正常斷奶重仔豬的胰蛋白酶、脂肪酶、蔗糖酶活力均高于低斷奶重仔豬（P＜0.05），低斷奶重仔豬的淀粉酶、乳糖酶、蛋白酶均高于正常斷奶重仔豬（P＜0.05）。營養(yǎng)模式、斷奶重及其互作對仔豬的胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、乳糖酶和蛋白酶活力均有極顯著影響；營養(yǎng)模式對仔豬的蔗糖酶活力無顯著影響。

表3 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸消化酶活力的影響 U/g

2.3 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸形態(tài)的影響 由表4 可知，剛斷奶時的低斷奶重仔豬十二指腸、空腸的絨毛高度、V/C 均低于正常斷奶重仔豬（P＜0.0.5），低斷奶重仔豬空腸隱窩深度與正常斷奶重仔豬差異不顯著。試驗結(jié)束時，二階段營養(yǎng)模式仔豬十二指腸、空腸的絨毛高度、V/C 均低于三階段營養(yǎng)模式仔豬（P＜0.05）。低斷奶重仔豬的十二指腸、空腸的絨毛高度、V/C 均低于正常斷奶重仔豬（P＜0.05），十二指腸隱窩深度高于正常斷奶重仔豬（P＜0.05）；營養(yǎng)模式、斷奶重及其互作對十二指腸的絨毛高度、隱窩深度和空腸的V/C 有顯著影響，對空腸隱窩深度無顯著影響。

表4 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸形態(tài)的影響

3 討論

3.1 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬生長性能的影響 三階段營養(yǎng)模式為仔豬提供了更加精細(xì)化的營養(yǎng)供給，對仔豬生長發(fā)育具有積極意義。有研究指出，不同斷奶重仔豬在育肥結(jié)束時的屠宰性能沒有顯著差異[8]。Brewer等[9]試驗指出，采用階段化氨基酸營養(yǎng)模式能提高幼齡動物的生長性能和消化道菌群的飼糧消化率。曹丹等[10]配制3 種（A1、A2、A3）營養(yǎng)水平逐漸降低的飼料，對28 日齡斷奶仔豬分別實行二階段營養(yǎng)模式（56 日齡前A2，57～70 日齡A3）、三階段營養(yǎng)模式（35 日齡前A1，36～56 日齡A2，57～70 日齡A3），結(jié)果顯示三階段營養(yǎng)模式的F/G 顯著低于二階段營養(yǎng)模式；在57～70日齡階段，三階段營養(yǎng)模式比二階段營養(yǎng)模式仔豬有更好的生長性能。本試驗三階段營養(yǎng)模式下的仔豬ADG顯著高于兩階段營養(yǎng)模式，F(xiàn)/G 顯著降低，且腹瀉率也顯著降低，F(xiàn)/G 結(jié)果與曹丹等[10]的研究基本一致；一方面，K2 組較K1 組仔豬的末重更大，且K2 與K3 組仔豬間的體重差距比K1 與K3 組間的差距更小，這提示在更加精細(xì)化營養(yǎng)供給的三階段營養(yǎng)模式下，低斷奶重仔豬能發(fā)生部分補(bǔ)償生長效應(yīng)，縮小與正常斷奶重仔豬的體重差距；另一方面，K4 組仔豬末重較K3 組更大，說明三階段營養(yǎng)模式能顯著提高仔豬的生長潛力。試驗仔豬腹瀉主要發(fā)生在更換飼料后，試驗開始幾天腹瀉率較低與試驗中第一階段飼料的營養(yǎng)水平及原料組成與哺乳期飼料一致有關(guān)；同時，斷奶后飼料的原料組成及營養(yǎng)水平不變也減少了營養(yǎng)因素造成的斷奶應(yīng)激腹瀉。在仔豬斷奶初期應(yīng)繼續(xù)飼喂一段時間的哺乳期飼料，可避免因飼料改變加重斷奶應(yīng)激現(xiàn)象，并且進(jìn)行階段化營養(yǎng)供給有利于更加充分發(fā)揮仔豬的生長潛力。

3.2 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸消化酶活力的影響小腸作為消化的主要場所，不僅有結(jié)構(gòu)上的優(yōu)勢，還需要消化酶的催化過程，消化酶是化學(xué)消化過程的主力軍，消化酶活力是反映動物消化能力強(qiáng)弱重要指標(biāo)[11]。十二指腸中的消化酶主要是胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶，空腸中主要是蔗糖酶、乳糖酶、蛋白酶；在豬的消化道不同部位，小腸消化酶對飼糧中的營養(yǎng)物質(zhì)消化率具有顯著影響[12]。有研究指出，日糧蛋白質(zhì)水平及限制性氨基酸配比會影響消化酶的合成、分泌及活力[13]，因此，動物生長的各個階段應(yīng)注重營養(yǎng)搭配的充足和平衡，單一的飼料配方會造成后期營養(yǎng)不平衡，進(jìn)而會限制動物的消化過程；合理的原料及營養(yǎng)配比會提高消化酶活力，并提高飼料的消化率；斷奶不僅會影響仔豬的腸黏膜形態(tài)，還會造成腸黏膜損傷，影響腸黏膜的分泌功能和消化酶活性[14]。本試驗結(jié)果顯示，斷奶會降低低斷奶重仔豬的空腸消化酶活力，而正常斷奶重仔豬的空腸消化酶活力較高，可能與食糜流通速率較慢有關(guān)，采樣時發(fā)現(xiàn)十二指腸食糜呈液態(tài)，而空腸食糜呈固液混合的糊狀，因此流通速率較慢，消化時間長，所需消化酶多；三階段營養(yǎng)模式則顯著提高了低斷奶重仔豬胰蛋白酶、脂肪酶、乳糖酶及蛋白酶活力，同時提高了食糜在十二指腸和空腸2 個部位的消化速率。

3.3 營養(yǎng)模式對不同斷奶重仔豬小腸形態(tài)的影響 小腸擔(dān)負(fù)著動物消化吸收的重要功能，有其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點。小腸絨毛是腸黏膜的上皮、固有層為擴(kuò)大黏膜表面積而向腸腔內(nèi)隆起形成的指狀突起，含有助于消化、吸收的酶和微粒，腸絨毛形態(tài)完整、高度越高，參與消化吸收的黏膜表面積越大，消化吸收能力越強(qiáng)[15]；腸隱窩又稱小腸腺，是由上皮向固有層凹陷形成，具有分泌調(diào)節(jié)胃腸活動、腺體分泌的作用，其深度越深會影響小腸腺液分泌到腸腔內(nèi)的量，從而對腸道功能產(chǎn)生負(fù)面影響，也能間接影響其他器官的功能活動[16]；V/C 與消化吸收功能呈正相關(guān)[17-18]。研究指出，斷奶時，仔豬的消化道發(fā)育不完全，受斷奶應(yīng)激影響，會出現(xiàn)不同程度的腸黏膜形態(tài)損傷，具體表現(xiàn)為絨毛高度下降、隱窩加深，直到斷奶1 周后才能開始在形態(tài)學(xué)上重建，逐漸恢復(fù)正常消化吸收功能[19]。本試驗結(jié)果顯示，剛斷奶時，低斷奶重仔豬的小腸各部分絨毛高度、V/C 均在不同程度上低于正常斷奶重仔豬；經(jīng)接受不同營養(yǎng)模式處理后，K4、K2 組仔豬絨毛高度、V/C 均分別不同程度高于K3、K1 組仔豬，隱窩深度均分別低于K3、K1 組仔豬，這表明,三階段營養(yǎng)模式更加精細(xì)化的營養(yǎng)供給有利于促進(jìn)仔豬的腸黏膜形態(tài)的恢復(fù)和發(fā)育，并提高仔豬腸部的消化功能。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，三階段營養(yǎng)供給模式可提高正常斷奶重仔豬和低斷奶重仔豬的生長性能，提高低斷奶重仔豬小腸各部的絨毛高度和V/C，擴(kuò)大了消化道與食糜的接觸面積，同時可提高低斷奶重仔豬胰蛋白酶、脂肪酶、乳糖酶及蛋白酶活力，有利于提高食糜消化速率，從而改善仔豬營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收過程。