帕金森病患者外周血中免疫炎性因子水平表達(dá)及作用機(jī)制研究

王 巍

寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，寧夏 銀川 750000

帕金森病(parkinson′s disease，PD)是多發(fā)于中老年人群的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病之一，又被稱為“震顫麻痹”，患者主要癥狀表現(xiàn)包括運(yùn)動遲緩、靜止性震顫、嗅覺減退、認(rèn)知功能障礙等[1-2]。近年來，PD發(fā)病率逐年攀升，已成為嚴(yán)重威脅中老年人群身心健康的重大疾病之一。目前，有關(guān)PD具體發(fā)病機(jī)制及病因尚未徹底闡明，可能與遺傳、免疫、環(huán)境以及細(xì)胞凋亡等多種因素密切相關(guān)。且國內(nèi)外均有研究表明，免疫炎癥反應(yīng)在PD的發(fā)病機(jī)制中起到不可忽視的作用[3-4]。本研究旨在探討PD患者外周血中白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-4、IL-8及IL-10水平的表達(dá)及作用機(jī)制?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2019年2月至2020年10月寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院收治的63例PD患者設(shè)為PD組，其中，男性37例，女性26例；年齡50～79歲，平均年齡(66.31±4.42)歲；文化程度：初中及初中以下28例，高中或中專24例，大專及以上11例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有受試者均與2015年運(yùn)動障礙協(xié)會所制定的PD相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)相符[5]；(2)年齡50～80歲；(3)依從性較好。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)入組前3個月發(fā)生感染或(和)接受過抗生素、免疫抑制劑治療者；(2)合并自身免疫性疾病或(和)惡性腫瘤者；(3)消化系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)以及內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生重大病變者；(4)存在家族聚集傾向者；(5)正參與其他研究者。另選取同期于我院接受體檢的健康志愿者60例設(shè)為健康組，其中，男性36例，女性24例；年齡51～78歲，平均年齡(66.22±4.38)歲；文化程度：初中及初中以下27例，高中或中專23例，大專及以上10例。兩組研究對象的一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)?；颊呔炇鹬橥鈺?。

1.2 研究方法 (1)外周血指標(biāo)檢測：采集受試者清晨空腹靜脈血6 ml，以8 cm為離心半徑，實(shí)施10 min的離心處理，獲取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測并比較兩組研究對象的IL-4、IL-8、IL-10水平。(2)采用蒙特利爾認(rèn)知評估量表(montreal cognitive assessment，MoCA)評估并比較兩組研究對象的認(rèn)知功能障礙程度[6]，該量表主要包括視空間與執(zhí)行力、命名、注意力、語言、抽象、延遲回憶、時空定向力7項內(nèi)容，總分30分，得分越高預(yù)示神經(jīng)功能障礙程度越低；若受試者受教育時間≤12年，則在最終計分時加1分。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-4、IL-8及IL-10水平比較 PD組血清IL-4水平為(1.88±0.45)pg/ml，低于健康組的(2.24±0.52)pg/ml，而IL-8及IL-10水平分別為(9.31±2.05)ng/ml、(3.74±1.01)pg/ml，均高于健康組的(5.84±1.24)ng/ml、(2.31±0.78)pg/ml，組間比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 兩組MoCA評分比較 PD組各項MoCA評分及總分均低于健康組，組間比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組MoCA評分比較評分/分)

2.3 PD患者外周血中IL-4、IL-8、IL-10水平與MoCA評分的相關(guān)性分析 Preason相關(guān)性分析結(jié)果顯示，PD患者外周血中IL-4水平與MoCA評分呈正相關(guān)(r=0.562，P<0.05)，而IL-8、IL-10水平與MoCA評分均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.615、-0.589，P<0.05)。

2.4 血清IL-4、IL-8及IL-10診斷PD效能的ROC曲線分析 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清IL-4、IL-8及IL-10三者聯(lián)合檢測診斷PD的ROC曲線下面積、靈敏度、特異度及約登指數(shù)均高于IL-4、IL-8及IL-10各項指標(biāo)單獨(dú)檢測(P<0.05)。見表2。

表2 血清IL-4、IL-8及IL-10診斷PD效能的ROC曲線分析

3 討論

PD是一種在中老年人群中發(fā)病率較高的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，其發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，可能與線粒體功能障礙、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡及泛素-蛋白酶體系統(tǒng)異常等有關(guān)[7-9]。有研究報道，中腦黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元的變性壞死是PD的主要病理變化，而免疫炎癥反應(yīng)與中樞神經(jīng)變性以及黑質(zhì)-紋狀體損傷均密切相關(guān)，可能介導(dǎo)了PD的發(fā)生、發(fā)展過程，已受到國內(nèi)外的廣泛關(guān)注[10-11]。IL-4、IL-8及IL-10均是目前臨床上應(yīng)用較廣泛的免疫炎性因子，三者的表達(dá)水平可在一定程度上反映機(jī)體的免疫炎癥狀態(tài)，在PD的研究中可能具有一定的價值。

IL-4屬于濾泡輔助性T細(xì)胞(follicular helper T cells，Tfh)的特征性細(xì)胞因子之一，也是一種抑炎因子，參與了機(jī)體的免疫炎癥過程。IL-8屬于促炎因子之一，其表達(dá)水平的升高往往反映了機(jī)體內(nèi)存在一定程度的炎癥反應(yīng)或免疫損傷，機(jī)體免疫反應(yīng)出現(xiàn)失衡，并從Th1細(xì)胞反應(yīng)向Th2細(xì)胞反應(yīng)轉(zhuǎn)變。IL-10主要是通過Th2細(xì)胞合成、分泌而來，對巨噬細(xì)胞抗原呈遞功能及Th1細(xì)胞應(yīng)答具有不同程度的抑制作用，同時，可刺激B細(xì)胞的增殖、分化，達(dá)到對NK細(xì)胞活性的間接抑制[12-13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PD患者外周血中存在IL-4水平的異常低表達(dá)，IL-8、IL-10水平的異常高表達(dá)，這提示了上述3項指標(biāo)均可能參與了PD的發(fā)生、發(fā)展過程。考慮原因可能為IL-4主要是由Tfh細(xì)胞分泌而來，可刺激B細(xì)胞分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，從而在體液免疫應(yīng)答過程中起著至關(guān)重要的作用。而PD患者存在不同程度的體液免疫反應(yīng)異常，同時存在持續(xù)的α-syn刺激，促使機(jī)體體液免疫長期處于活躍狀態(tài)，繼而導(dǎo)致外周血Tfh細(xì)胞持續(xù)高表達(dá)，最終引起IL-4含量的增加。IL-8及IL-10均是由濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分泌而來的細(xì)胞因子，后者主要作用是負(fù)反饋調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞，進(jìn)一步維持機(jī)體內(nèi)的免疫平衡，濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的下降會引起體液免疫反應(yīng)處于激活狀態(tài)，進(jìn)一步在PD的慢性進(jìn)行性病程中起著至關(guān)重要的作用。由此推測，IL-4、IL-8及IL-10在PD中的主要作用機(jī)制可能與調(diào)控機(jī)體免疫應(yīng)答有關(guān)。

本研究結(jié)果還顯示，PD組各項MoCA評分均低于健康組，與既往研究報道結(jié)果[14-15]相符，提示PD患者存在明顯的認(rèn)知功能異常。這可能是因?yàn)镻D患者的額葉皮質(zhì)-紋狀體-黑質(zhì)環(huán)路系統(tǒng)遭受一定的損害，繼而影響了患者的空間加工能力；而額葉執(zhí)行功能受損直接影響患者的工作記憶、注意力等；病理條件下，大量自由基的產(chǎn)生會導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)抗氧化物被消耗，繼而引發(fā)生物膜以及線粒體損害，從而引起神經(jīng)元代謝功能的異常變化。另外，本研究結(jié)果顯示，PD患者外周血中IL-4水平與MoCA評分呈正相關(guān)，而IL-8、IL-10水平與MoCA評分均呈負(fù)相關(guān)，主要原因可能是上述3項指標(biāo)水平的異常表達(dá)影響了PD患者的免疫狀態(tài)，促使患者長期處于病理狀態(tài)下，繼而加劇了對神經(jīng)功能的損害。

綜上所述，PD患者外周血IL-4水平呈明顯低表達(dá)，而IL-8、IL-10水平呈明顯高表達(dá)，三者可能參與了PD的發(fā)生、發(fā)展過程，其主要作用機(jī)制可能與調(diào)控機(jī)體免疫反應(yīng)有關(guān)。臨床實(shí)際工作中可能通過聯(lián)合檢測上述3項指標(biāo)表達(dá)情況，繼而實(shí)現(xiàn)對PD患者的輔助診斷，以及對認(rèn)知功能障礙程度的評估。