劉貴洲
摘 ?要:目的 ?分析中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果。方法 ?選擇青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院于2020年1月~2020年5月所庫(kù)存的30味中藥材進(jìn)行調(diào)查研究,所有藥材均采用中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法進(jìn)行鑒別,鑒別后,對(duì)比中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率,以杜仲藥材為例,分析圖譜的建立以及重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果 ?鑒別后,中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率,數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。杜仲圖譜建立中,2號(hào)峰為綠原酸,4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷。其中2號(hào)峰峰形較好,前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾,分離完全,出峰時(shí)間居中,選其作為參考峰,重復(fù)性良好。結(jié)論 ?中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果顯著,能顯著提高對(duì)中藥材鑒別正確率,在一定程度上保證了中藥材的可靠性,以達(dá)到更好的中藥材使用率,具有專(zhuān)屬性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),可以有效鑒別和評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量,更有利于對(duì)疾病的治療,具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值,值得進(jìn)一步臨床應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:中藥特征圖譜技術(shù);中藥;鑒定;應(yīng)用效果
中圖分類(lèi)號(hào):R284.1 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ?文章編號(hào):1009-8011(2021)-4-0028-03
中醫(yī)是我國(guó)特有的治療方式,也是我國(guó)醫(yī)療行業(yè)中重要的一部分,具有悠久的歷史,長(zhǎng)達(dá)數(shù)千年,主要以研究人體生理、病理以及疾病診斷和防治為主[1],而中藥在中醫(yī)中是不可缺少的一部分,根據(jù)傳統(tǒng)的醫(yī)藥理論,經(jīng)過(guò)采集、煉制、提取、制成藥物,中藥不僅僅作為藥物,更是標(biāo)志著我國(guó)的文化傳承,享譽(yù)國(guó)內(nèi)國(guó)外。中藥對(duì)于中醫(yī)的治療來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,是治療疾病的關(guān)鍵手段。隨著現(xiàn)代醫(yī)療科技的發(fā)展,我國(guó)也在不斷加大對(duì)中醫(yī)方面的技術(shù)支持,對(duì)藥材質(zhì)量也越來(lái)越重視,良好的藥材質(zhì)量有利于提升藥物對(duì)治療疾病的有效程度。而在傳統(tǒng)的藥材鑒別中,往往通過(guò)聞、觸、嘗、視、水試以及火試等方式進(jìn)行辨別[2],但由于藥材傳統(tǒng)鑒別易受藥材的形態(tài)、數(shù)量以及部位所影響,從而無(wú)法保證藥材質(zhì)量,降低了臨床用藥的安全性[3]。因此,提高藥材的鑒別的準(zhǔn)確率對(duì)臨床合理用藥至關(guān)重要,基于此背景下,青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院對(duì)中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果進(jìn)行了相關(guān)研究與分析,具體論述如下。
1 ?資料與方法
1.1 ?一般資料
選擇青島市黃島區(qū)中醫(yī)醫(yī)院于2020年1月~2020年5月所庫(kù)存的30味中藥材進(jìn)行調(diào)查研究,所有藥材均采用中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法進(jìn)行鑒別,其中包括丹參、人參、西洋參、黃柏、黃連、白芍、白前、白薇、白芷、板藍(lán)根、半夏、柴胡、赤芍、川芎、當(dāng)歸、地黃、地榆、防風(fēng)、附子、甘草、何首烏、黃精、黃連、杜仲、紅花、女貞子、連翹、魚(yú)腥草、益母草、五倍子等。
1.2 ?方法
傳統(tǒng)鑒別方法:通過(guò)聞、觸、嘗、視、水試以及火試進(jìn)行中藥材鑒別,聞即通過(guò)嗅覺(jué)識(shí)別中藥材的氣味,如敗醬草具有特異之氣,新鮮時(shí)無(wú)異味,但曬干后則有臭醬氣味;檀香氣味芳香馥郁,燃燒時(shí)香氣更濃等。觸即通過(guò)手觸摸中藥材的重量、堅(jiān)實(shí)、老嫩以及松軟等,如豬苓質(zhì)感硬且較輕。嘗即通過(guò)品嘗中藥材味道,視即通過(guò)眼睛觀察中藥材的外形、紋理以及色澤等方面,水試或火試即通過(guò)水與火鑒別中藥材真假。鑒別人員由中藥鑒定委員會(huì)成員組成,名譽(yù)主委1名,男,57歲;委員會(huì)顧問(wèn)2名,男,48歲,男,50歲;副秘書(shū)長(zhǎng)2名,男45歲,男51歲;委員4名,男性3名,女性1名,年齡43~55歲;青年委員6名,男性3名,女性3名,年齡29~37歲。鑒別藥物的品種、藥性、真假,根據(jù)《中國(guó)藥典》監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)為標(biāo)準(zhǔn)。
中藥特征圖譜技術(shù):將所選藥材進(jìn)行生物特征圖譜與化學(xué)特征圖譜分析,鑒定其質(zhì)量。設(shè)備:色譜儀(國(guó)家:美國(guó),品牌:賽默飛,型號(hào):TRACE GC ULTRE);超純水機(jī):(生產(chǎn)企業(yè):南京培胤儀器有限公司,品牌:培胤,型號(hào):PY-LDS-50/80/100/120YY醫(yī)用超純水機(jī)),溶液制備:以杜仲藥材為樣品進(jìn)行圖譜分析,將杜仲研磨成粉狀,準(zhǔn)確稱(chēng)量1 g、2 g、3 g、分為5份,放入錐形瓶加入25 mL甲醇,超聲處理20分鐘,搖均,取續(xù)濾液為樣品溶液。取綠原酸150 μg、松脂醇二葡萄糖苷20 μg為對(duì)照品,加甲醇制成1 mL的混合溶液。色譜條件:色譜柱為4.6 mm×250 mm,5 μm,流動(dòng)相:以乙腈為流動(dòng)相A,以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B;采用梯度洗脫方式;柱溫:30 ℃;流速:1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):227 nm杜仲特征圖譜的建立和分析:將杜仲研磨成粉,按照上述方法制成試品溶液和對(duì)照品溶液,按照上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè),確定色譜圖中出峰時(shí)間基本一致峰面積較大的峰為共有特征色譜峰。重復(fù)性試驗(yàn),取同一批杜仲,按照上述方法制備5份試品溶液,按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定,以參照峰為準(zhǔn)進(jìn)行各個(gè)特色峰的相對(duì)保留時(shí)間。
1.3 ?觀察指標(biāo)
比較中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別的正確率。
1.4 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS21.0對(duì)數(shù)據(jù)處理,計(jì)數(shù)資料采用[n(%)]表示,使用χ2校檢;P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 ?結(jié)果
2.1 ?中藥特征圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率對(duì)比
鑒別后,中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率100%,顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率83.3%,數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。
2.2 ?杜仲圖譜建立和分析
2號(hào)峰為綠原酸,4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷1。其中2號(hào)峰峰形較好,前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾,分離完全,出峰時(shí)間居中,選其作為參考峰。見(jiàn)圖1。
圖1 ?杜仲HPLC特征圖譜(5個(gè)特征峰,2號(hào)峰為綠原酸對(duì)照峰)
2.3 ?杜仲圖譜重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
選擇同一批杜仲分為1~3 g為樣品進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,本方法保留時(shí)間的重復(fù)性良好。見(jiàn)表2。
3 ?討論
化學(xué)特征圖譜是一種建立在中藥成分研究基礎(chǔ)上的一種鑒別方法,通過(guò)軟件與化學(xué)手段分析中藥中的化學(xué)成分,達(dá)到鑒別藥材的效果[4-5],化學(xué)特征圖譜包括色譜法與光譜法,不僅能有效的鑒別藥材的真?zhèn)巍⑵贩N,同時(shí)也可以確定藥材的主要特征,如相似度、峰值面積以及比例等[6],從而更好得判斷藥材產(chǎn)地、優(yōu)劣等。
色譜法包括了高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法(TLC)、高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)以及氣相色譜法(GC)等[7],HPLC是目前最多用的中藥特征圖譜鑒別方法,具有較好的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性[8]。
經(jīng)過(guò)研究后發(fā)現(xiàn),鑒別后,中藥特征圖譜技術(shù)對(duì)中藥材鑒別正確率顯著高于傳統(tǒng)鑒別方法對(duì)中藥材鑒別正確率,數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。杜仲圖譜建立中,2號(hào)峰為綠原酸,4號(hào)峰為松脂醇二葡萄糖苷。其中2號(hào)峰峰形較好,前后無(wú)雜質(zhì)峰干擾,分離完全,出峰時(shí)間居中,選其作為參考峰,重復(fù)性良好。說(shuō)明了中藥特征圖譜對(duì)于中藥材的鑒別有重要的作用,提高鑒別藥物質(zhì)量效率。雖然中藥特征圖譜對(duì)于藥物的鑒定具有穩(wěn)定、真實(shí)、可靠等優(yōu)點(diǎn),但是我國(guó)對(duì)于重要特征圖譜技術(shù)的研究是近幾年才開(kāi)始,還未有較系統(tǒng)的方法體系和數(shù)據(jù)依據(jù),仍然處于研究探索階段,距離廣泛應(yīng)用還需要時(shí)間和推廣。首先應(yīng)加強(qiáng)中藥特征圖譜的系統(tǒng)構(gòu)建,選擇合理、簡(jiǎn)單、便于實(shí)施的鑒別體系,尋找和研究出可以記錄藥材特征、數(shù)據(jù)等中藥信息的軟件平臺(tái)。
綜上所述,中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用效果顯著,能顯著提高對(duì)中藥材鑒別正確率,在一定程度上保證了中藥材的可靠性,以達(dá)到更好的中藥材使用率,具有專(zhuān)屬性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),可以有效鑒別和評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量,更有利于對(duì)疾病的治療,具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值,值得進(jìn)一步臨床應(yīng)用。
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