生產(chǎn)工藝變更對舒肝益脾顆粒質(zhì)量的影響

汪小康 王吉東 徐久春 田海 王旭超

摘 要：對舒肝益脾顆粒中五味子醇甲進行含量測定，對黃芪、山楂進行定性鑒別，并確認工藝變更對舒肝益脾顆粒質(zhì)量的影響.實驗結(jié)果表明，五味子醇甲含量為0.01～0.08 mg/mL，平均回收率為98.24%，RSD為0.92%，工藝變更對舒肝益脾顆粒質(zhì)量沒有影響.

關(guān)鍵詞：工藝變更;質(zhì)量對比;薄層鑒別;含量測定

[中圖分類號]R917 ? [文獻標志碼]A

Abstract：To determine the content of Schisandrin A ?and identify the Milkvetch Root and Crataegus pinnatifida Bunge in Shugan Yipi granules，to confirm the effect of technological changes on the quality of Shugan Yipi Granules.The contents of the Schisandrin A had a favourable linear correlation ranging 0.01～0.08mg/mL，the average recovery was 98.24%（RSD=0.92%）;Technological changes did not affect the quality of drugs.

Key words：process change;quality comparison;TLC identification;content determination

舒肝益脾顆粒為復(fù)方中成藥，由茵陳、蒲公英、五味子、茯苓、山楂和黃芪六味中藥材組成，臨床上主要用于治療濕熱阻滯而致的急慢性肝炎、膽囊炎等病癥.為了克服濕法制粒技術(shù)存在的設(shè)備占地面積較大，操作工體力消耗大且多憑經(jīng)驗等缺點，本實驗在不加輔料蔗糖的情況下，采用流化床造粒技術(shù)制備無糖型舒肝益脾顆粒，根據(jù)舒肝益脾顆粒質(zhì)量標準，對變更前后的樣品進行檢測，觀察變更生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量的影響.

1 儀器和藥品

日本島津高效液相色譜儀（N2000型，日本），分析天平（Sartorius BPZ110，上海），超聲波清洗儀（KQ2200，佛山），數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（GZX-9000，上海），電熱恒溫水浴鍋（DK-S26，上海），薄層色譜攝影儀（GoodSee-II，北京），紫外分光光度計（UV-2450;上海）.

茵陳、蒲公英、五味子飲片購于吉林敖東中藥飲片股份有限，山楂、黃芪甲苷、五味子醇甲均購自中國食品藥品檢定研究院.

2 方法與結(jié)果

2.1 生產(chǎn)工藝對比

原工藝 取處方量藥材，五味子按照滲漉法，用3倍量55%乙醇為溶劑進行滲漉，溶液濃縮至1.26～1.28（60 ℃）.茵陳等與五味子滲漉后的藥渣加8倍量水煎煮二次.第一次2 h，第二次1 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至1.28～1.30（60℃）.將滲漉稠膏與水煎稠膏混合，加適量蔗糖混勻，制粒，干燥，制成舒肝益脾顆粒.[1]

新工藝 取處方量藥材，五味子按照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法，以3倍量55%乙醇為溶劑進行滲漉，滲漉液濃縮成干膏;其余茵陳等五味與五味子滲漉后的藥渣加8倍量水煎煮二次，第一次2 h，第二次1 h，合并煎液，濾過[1]，濾液濃縮成干膏，與五味子提取物合并，粉碎過80目篩，藥粉采用流化床制粒法制粒，制成舒肝益脾顆粒.

2.2 質(zhì)量對比

取本品適量，平鋪于白色比色板上，在日光燈下觀察.[1]原工藝生產(chǎn)制劑為棕黃色，味甜、微澀;新工藝生產(chǎn)制劑為棕黃色至棕褐色，味酸、澀.

2.2.1 鑒別

黃芪 取黃芪甲苷對照品，精密稱定至10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋，搖勻，作為對照品溶液.取工藝變更前后舒肝益脾顆粒適量，研細，加甲醇30 mL，加熱回流1 h，濾過，揮干.殘渣加水30 mL溶解，用正丁醇萃取2次，每次20 mL，合并正丁醇液.用氨試液提取2次，每次30 mL，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣用甲醇1 mL溶解.10 ℃以下放置過夜，分層，取下層溶液作為供試品溶液.取處方中黃芪以外的藥材，制備成陰性對照品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液.[2-5]

吸取對照品溶液2 μL，供試品溶液8 μL，陰性對照品溶液8 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水（13∶6∶2）為展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100 ℃加熱至斑點顯色清晰[2-5]，結(jié)果見圖1.

圖1顯示，工藝變更后三批樣品色譜與變更工藝前供試品色譜相同，證明此法專屬性良好，故將此法列入質(zhì)量標準正文.變更工藝前后產(chǎn)品中黃芪的成分沒有發(fā)生變化.

山楂 取山楂對照藥材，研細，至置具塞試管中.加乙酸乙酯10 mL，超聲處理20 min，濾過.濾液濃縮至4 mL作為對照品溶液.取工藝變更前后舒肝益脾顆粒適量，研細，置具塞試管中，加乙酸乙酯10 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至4 mL作為供試品溶液.取處方中山楂以外的藥材，制備成陰性對照品，按供試品溶液制備方法操作，制備成陰性對照品溶液.[2，5-6]

吸取對照藥材溶液3 μL，供試品溶液8 μL，陰性對照品溶液8 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水（10∶4∶1）的上層溶液為展開劑，預(yù)飽和15 min，展開，取出，110 ℃加熱10 min，放冷至室溫，噴用0.1 M氫氧化鈉溶液調(diào)為綠色的0.2%溴甲酚綠乙醇溶液[2，5-6]，結(jié)果見圖2.

圖2顯示，工藝變更后三批樣品色譜與變更工藝前供試品色譜相同，證明變更工藝前后產(chǎn)品中山楂的成分沒有發(fā)生變化.此法專屬性良好，可以將此法列入質(zhì)量標準正文.

2.2.2 粒度檢查照粒度與粒度分布測定法（《中國藥典》2015年版四部通則0982）第二法雙篩分法操作，分別測定工藝變更前、后各三批樣品不能通過一號篩和能通過四號篩的顆粒和粉末總和所占百分比.實驗結(jié)果表明，變更前三批不能通過一號篩和能通過四號篩的顆粒和粉末占2.5%，變更后占2.9%，均符合要求.[2]

2.2.3 水分檢查

采用水分測定法第二法（甲苯法）對舒肝益脾顆粒的水分進行測定.稱取舒肝益脾顆粒適量，照水分測定法（《中國藥典》2015年版四部通則0832）第四法（甲苯法）操作[2]，檢查工藝變更前、后各三批舒肝益脾顆粒的水分.結(jié)果表明，變更前水分占4.32%，變更后水分占2.31%，均符合標準規(guī)定.

2.2.4 溶化性檢查

稱取舒肝益脾顆粒適量，按照溶化性（《中國藥典》2015年版四部0105顆粒劑）項下可溶性顆粒檢查法操作[2]，檢查工藝變更前、后各三批舒肝益脾顆粒的溶化性.結(jié)果表明，變更前后舒肝益脾顆粒溶化性均符合標準規(guī)定.

2.2.5 裝量差異檢查

稱取舒肝益脾顆粒10袋/批，照裝量差異（《中國藥典》2015年版四部0105顆粒劑）項下操作[2]，計算工藝變更前、后各批次自制品裝量差異，結(jié)果見表1.

2.2.6 含量測定

取五味子醇甲對照品溶液，按《中國藥典》2015年版四部“紫外-可見分光光度法”項下方法進行測定.結(jié)果表明，五味子醇甲對照品溶液在248 nm波長處有最大吸收.其色譜峰的保留時間與對照品一致.取五味子醇甲對照品溶液，加甲醇稀釋至不同濃度，分別吸取10μL進樣，記錄峰面積，以峰面積值對濃度進行回歸[2，7-9]，得回歸方程為：

Y=1 382 X+6.354（r=0.999）.

實驗結(jié)果表明，五味子醇甲在0.01～0.08 mg/mL范圍內(nèi)，濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系.

精密度實驗、重復(fù)性實驗、穩(wěn)定性實驗和加樣回收實驗結(jié)果表明，精密度和重復(fù)性實驗的RSD值均小于1.5%，穩(wěn)定性實驗24 h內(nèi)測定結(jié)果RSD小于1.0%.加樣回收實驗平均回收率為98.24%，RSD為0.92%.表明分析儀器精密度和分析方法重復(fù)性良好，所制備的溶液至少在24 h內(nèi)穩(wěn)定，證明所建立的分析方法適用于產(chǎn)品的含量測定.[2，7，8]回收率結(jié)果見表2.

取工藝變更前后各3批舒肝益脾顆粒，依法制備成供試品溶液，按含量測定中的條件進樣，測定五味子醇甲含量.結(jié)果見表3.結(jié)果表明，工藝變更前后每袋舒肝益脾顆粒中五味子醇甲的含量均符合標準.

3 結(jié)論

實驗結(jié)果表明，工藝的變更沒有對產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)生影響.因蔗糖為非功能性輔料，處方本身沒有發(fā)生變化，根據(jù)《已上市中藥變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》等相關(guān)指導(dǎo)原則，變更后可不進行臨床實驗，按補充申請程序申報.獲得補充申請批件后可生產(chǎn)上市，并繼續(xù)檢測其臨床效果和不良反應(yīng)等.

參考文獻

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編輯：吳楠