肖瑾 韋春玲 肖珊 羅姣 盧茂芳 魯曼霞 劉向前

〔摘要〕 糙葉五加是五加科五加屬植物，具有祛風(fēng)濕、補(bǔ)肝腎、活血化瘀、壯筋骨等功效，主要用于治療風(fēng)濕痹痛、拘攣麻木、筋骨痞軟、水腫、跌打損傷、疝氣腹痛等。糙葉五加的化學(xué)成分主要為黃酮類、萜類、苯丙素類、有機(jī)酸類、甾體類、蒽醌類等，具有抗炎、抗菌、抑制膽堿酯酶等多種生物活性。文中主要對(duì)糙葉五加的化學(xué)成分及生物活性進(jìn)行綜述，為糙葉五加的進(jìn)一步研究和開發(fā)提供一定的理論基礎(chǔ)。

〔關(guān)鍵詞〕 糙葉五加;化學(xué)成分;生物活性;抗炎;抗神經(jīng)炎;抗菌;抑制膽堿酯酶

〔中圖分類號(hào)〕R284.1? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.08.029

Advance on Chemical Constituents and Bioactivity of Acanthopanax Henryi （Oliv.） Harms

XIAO Jin， WEI Chunling， XIAO Shan， LUO Jiao， LU Maofang， LU Manxia， LIU Xiangqian*

（School of Pharmacy， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China）

〔Abstract〕 Acanthopanax henryi （Oliv.） Harms is a plant belonging to Acanthopanax senticosus in Acanthopanax family. Acanthopanax henryi （Oliv.） Harms has the effects of eliminating wind dampness， tonifying liver and kidney， promoting blood circulation and removing blood stasis， strengthening muscles and bones. It is mainly used to treat rheumatic arthralgia， contracture numbness， soft muscles and bones， edema， traumatic injury， hernia and abdominal pain， etc. The main chemical components are flavonoids， terpenes， phenylpropanoids， organic acids， steroids， anthraquinones， etc. It has many biological activities such as anti-inflammatory， anti-bacterial and anti-cholinesterase. In this paper， we made a review on the chemical components and biological activity of Acanthopanax henryi （Oliv.） Harms， which can provide a theoretical basis for its further research and development.

〔Keywords〕 Acanthopanax henryi （Oliv.） Harms; chemical component; biological activity; anti-inflammatory; anti-neuroinfl?

ammation; anti-bacterial; anti-cholinesterase

糙葉五加Acanthopanax henryi （Oliv.） Harms又名亨利五加，為中國特有的五加科五加屬植物，是治療風(fēng)濕和炎癥的傳統(tǒng)藥物[1-2]，廣泛分布于湖南、湖北、浙江、安徽、甘肅、四川、河北、山西、陜西等地，資源豐富，生于林緣或灌叢中，海拔1 000～3 200 m。其根皮作為“五加皮”收載于湖南省中藥材地方標(biāo)準(zhǔn)，文中記載其歸肺、脾、腎、肝經(jīng)[3]，味辛、性溫，具有祛風(fēng)濕、補(bǔ)肝腎、活血化瘀、壯筋骨等功效，主要用于治療風(fēng)濕痹痛、拘攣麻木、筋骨痞軟、水腫、跌打損傷、疝氣腹痛等[4-8]。《中華本草》等典籍記載，糙葉五加的藥用部位為根皮，具有祛風(fēng)利濕、活血舒筋、理氣止痛之功效;于秋季挖根，洗凈，除去須根，趁鮮用木槌敲擊，使木心和皮部分離，抽去木心，切段，曬干[9]。本文主要對(duì)糙葉五加的化學(xué)成分及生物活性等方面進(jìn)行綜述，以期為糙葉五加資源的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供參考依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1? 糙葉五加中的主要化學(xué)成分

目前，從糙葉五加中分離得到的化合物共有112個(gè)，主要有黃酮類、萜類、苯丙素類（木脂素類、香豆素類）、有機(jī)酸類、甾體類、醌類等多種藥用及營養(yǎng)成分，其中萜類和有機(jī)酸類占多數(shù)。黃酮類是糙葉五加的主要化學(xué)成分之一，主要有山柰酚、蘆丁、槲皮素、金絲桃苷、異槲皮苷、山柰酚-3-蕓香糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等。甾體類主要有豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等。有機(jī)酸類主要有三十二烷酸、正三十四烷酸、蜜蠟酸、棕櫚酸、綠原酸、咖啡酸、富馬酸、原兒茶酸、p-香豆酸、阿魏酸、5-O-咖啡?？鼘幩岬取１奖仡悾ㄏ愣顾仡?、木脂素類）主要有6，7-二甲氧基香豆素、異嗪皮啶;刺五加苷B（1）、刺五加苷E（2）、（-）-kobusin（3）、styraxlignolide E（4）和styraxlignolide D（5）等。萜類（單萜、二萜類、三萜類）主要有eleuhenryiside A（6）、eleuhenryiside B（7）、eleuhenryiside C（8）;五加酸（9）;烏蘇酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷（10）、刺囊酸-3-O-α-L吡喃阿拉伯糖苷（11）、五加苷K（12）、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃木糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（13）、刺囊酸-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（14）、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（15）、烏蘇酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（16）、齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（18）、齊墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（19）、木鱉子皂苷Ib（20）、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（21）、卵葉銀蓮花苷A（22）和ursolic acid 3-O-α-L-arabinopyranosyl-28-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→4）-O-β-D-glucopyranosyl-（1→6）-O-β-D-glucopyranoside（23）等。另有在五加科植物中較少見的蒽醌類物質(zhì)蒽醌-1，6，8-三羥基-3-甲基-2-羧酸甘油酯（24）。有研究[10]表明，糙葉五加葉中三萜皂苷的母核種類比較單一，主要以齊墩果烷和烏蘇烷為主，從中分離得到的多個(gè)三萜皂苷皆為五環(huán)三萜類成分，且存在多個(gè)同分異構(gòu)體。根據(jù)目前的生物活性相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，糙葉五加中分離得到的木脂素類和萜類化合物具有較好的生物活性，木脂素類及萜類化合物結(jié)構(gòu)詳見圖1，糙葉五加中的具體化學(xué)成分見表1。

1.2? 糙葉五加中化學(xué)成分含量研究

1.2.1? 黃酮類? 鄒親朋[22]釆用高效液相色譜法對(duì)糙葉五加葉中槲皮素、山柰酚、金絲桃苷和蘆丁進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果表明，糙葉五加不同部位均含有黃酮類化合物，葉中黃酮類物質(zhì)的總含量達(dá)11%，其中蘆丁含量高達(dá)9%。陳勇等[30]發(fā)現(xiàn)槲皮素和山柰酚在糙葉五加葉中含量最高，其次為莖，根中并未檢出。馮勝等[28]采用RP-HPLC法對(duì)4種五加屬植物（短梗五加、糙葉五加、藤五加和窄葉藤五加）果實(shí)中的金絲桃苷、蘆丁、槲皮素、山柰素、6，7-二甲氧基香豆素和紫丁香苷的含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)糙葉五加果實(shí)中山柰素和金絲桃苷含量較高，紫丁香苷含量最高，6，7-二甲氧基香豆素的含量相對(duì)較低。羅姣等[34]采用單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)合響應(yīng)曲面設(shè)計(jì)法進(jìn)行純化工藝優(yōu)化研究，工藝優(yōu)化后糙葉五加葉總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到75.87%;總黃酮得率為30.13%。Zhang XD等[19]采用高效液相色譜法對(duì)糙葉五加的MeOH提取物進(jìn)行色譜分析，最高峰對(duì)應(yīng)化合物為5-O-咖啡?？鼘幩岷吞J丁。此外，異槲皮苷、山柰酚-3-蕓香糖苷、3，5-雙咖啡?？鼘幩岷?，5-雙咖啡?？鼘幩崾遣谌~五加甲醇提取物中主要的次生代謝產(chǎn)物。

1.2.2? 萜類? 李芝[10]、Zhang XD等[16]發(fā)現(xiàn)糙葉五加根皮、莖皮、葉和果實(shí)各部位中，所測(cè)的15種三萜皂苷含量各有不同。糙葉五加葉中15種皂苷皆有，以齊墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷含量最高（8.79 mg/100 g），烏蘇酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷含量最低（0.62 mg/100 g）。根皮中各皂苷含量均較低，未檢測(cè)出齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃木糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和五加苷K。果實(shí)中15種皂苷與葉中種類和含量相近，齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（9.41 mg/100 g）含量最高。除刺囊酸-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃木糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和五加苷K外，莖皮中其他12種三萜皂苷的含量均高于糙葉五加的其他部分。糙葉五加苷I在根皮、莖皮、葉和果實(shí)各部位中均存在，但含量差別較大。張偉蘭等[11]研究發(fā)現(xiàn)糙葉五加不同部位中五加酸的含量由大到小依次為葉>根>莖，貝殼烯酸的含量由大到小依次為葉>莖>根，且糙葉五加不同部位中五加酸含量均高于貝殼烯酸含量。

1.2.3? 其他? Adamczyk K等[32]研究了5種五加（刺五加、兩歧五加、短梗五加、細(xì)柱五加、糙葉五加）75%甲醇提取物中多酚和酚酸的含量，發(fā)現(xiàn)多酚、酚酸含量最高的是糙葉五加。在根中檢測(cè)到4種酚酸，其中原兒茶酸含量最高，其次為咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸。馮勝等[33]研究發(fā)現(xiàn)糙葉五加不同部位中刺五加苷B含量由大到小依次為莖>根>葉，刺五加苷E含量由大到小依次為莖>葉>根，莖中刺五加苷B和E含量均為最高。Daniel等[26]對(duì)新鮮干燥和保存1年后的糙葉五加果實(shí)的乙醇提取物的成分進(jìn)行研究，結(jié)果表明新鮮干燥果實(shí)的主要成分是β-longipinene（49.11%），而貯藏1年后其主要成分為iso-longifolol（24.23%），且匙葉桉油烯醇含量降低，未檢測(cè)到β-longipinene。

2 糙葉五加不同部位的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)差異

鄒親朋等[29]使用RP-HPLC法對(duì)糙葉五加根、莖、葉中的各類化學(xué)成分進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，所檢測(cè)的15種物質(zhì)在糙葉五加各部位中均存在，但含量存在明顯差異。有機(jī)酸類的咖啡酸、香豆素類的異嗪皮啶與6，7-二甲氧基香豆素、甾醇類的β-谷甾醇和豆甾醇在根中的含量最高;有機(jī)酸類的綠原酸、木脂素類的刺五加苷B和刺五加苷E、三萜類的齊墩果酸在莖中含量最高;而黃酮類物質(zhì)金絲桃苷、蘆丁、槲皮素、山柰素以及二萜類的五加酸和貝殼烯酸則主要存在于葉中。李小軍等[20-21]研究發(fā)現(xiàn)糙葉五加果實(shí)乙酸乙酯萃取部位中主要成分類型為木脂素和單萜類;糙葉五加花乙酸乙酯萃取部位中主要成分為帶有槲皮素或山柰酚母核的黃酮類及二取代的咖啡?；鼘幩犷?。莖的主要成分為酚類和咖啡?；鼘幩犷?葉的主要成分為黃酮類和咖啡?；鼘幩犷怺17，20，35-37]。綜合以上對(duì)糙葉五加根、莖、葉、花以及果實(shí)化學(xué)成分的研究可得知，其不同部位的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)存在一定的差異，作為藥用時(shí)建議分開來使用。

3 生物活性

3.1? 抗炎

劉恒言等[13]研究發(fā)現(xiàn)糙葉五加根皮80%甲醇流份對(duì)一氧化氮（nitric oxide， NO）、前列腺素E2（prostaglandin E2， PGE2）等炎癥因子具有明顯的抑制作用，提示可能存在具有良好抗炎作用的物質(zhì)。Seo YS等[38]研究了糙葉五加中齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（araliasaponin II）的抗炎作用，發(fā)現(xiàn)araliasaponin II能顯著抑制脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞中NO和PGE2產(chǎn)生，并下調(diào)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase， iNOS）、環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2， COX-2）蛋白和mRNA的表達(dá)。還可顯著抑制toll樣受體-4（toll-like receptor 4， TLR-4）的表達(dá)，下調(diào)腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α， TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6， IL-6）的蛋白和mRNA表達(dá)水平，減少核因子-κB（inhibitor-κB， NF-κB）的核易位。此外，用araliasaponin II進(jìn)行預(yù)處理顯著抑制了TLR-4-NF-κB信號(hào)通路。以上結(jié)果提示，araliasaponin II可通過抑制炎癥介質(zhì)的表達(dá)以及阻斷NF-κB的活化發(fā)揮抗炎作用。Kang DH等[25]對(duì)糙葉五加葉中齊墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（ciwujianoside C3）的抗炎活性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)ciwujianoside C3可抑制LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞中NO的生成，且以濃度依賴性方式抑制炎性細(xì)胞因子IL-6、TNF-α和PGE2，以及iNOS、COX-2蛋白和mRNA的表達(dá)水平。此外，ciwujianoside C3抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶和c-Jun N-末端激酶的磷酸化，還可以抑制絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase， MAPK）和NF-κB磷酸化。以上結(jié)果表明，ciwujianoside C3具有一定的抗炎作用。Kim JH等[39]發(fā)現(xiàn)糙葉五加根皮80% MeOH組分具有顯著的抗炎活性，其對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞中NO、PGE2、白細(xì)胞介素-1（interleukin 1， IL-1）和IL-6等炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生具有較好的抑制作用，對(duì)iNOS的蛋白表達(dá)有明顯的抑制作用，呈劑量依賴性，但對(duì)COX-2的蛋白表達(dá)無抑制作用。

李芝[10]對(duì)糙葉五加葉的抗炎活性進(jìn)行研究，結(jié)果表明，在無細(xì)胞毒性作用的濃度下，glycoside St-D1表現(xiàn)出較顯著的抑制NO分泌的作用;當(dāng)化合物濃度達(dá)到40 μg/mL時(shí)，ciwujianoside C3、ursolic acid 3-O-α-L-arabinopyranosyl-28-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→4）-O-β-D-glucopyranosyl-（1→6）-O-β-D-glucopyranoside抑制NO分泌的作用較為顯著，呈現(xiàn)劑量依賴性。此外，蒽醌-1，6，8-三羥基-3-甲基-2-羧酸甘油酯具有顯著的抑制NO、TNF-α和IL-6等炎癥因子分泌的作用;當(dāng)濃度達(dá)到40 μg/mL時(shí)，可顯著抑制NO的分泌，抑制率超過50%。

李小軍等[20]基于LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞BV2模型對(duì)糙葉五加果實(shí)的化學(xué)成分進(jìn)行抗炎活性研究，結(jié)果表明，化合物5-羥甲基-2-糠醛、6-甲氧基-7-羥基香豆素、（-）-松脂醇、4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、（-）-芝麻素、3，4-二羥基-p-薄荷-1-烯、（4R）-p-薄荷-1-烯-4，7-二醇和styraxlignolide D對(duì)NO生成具有較好的抑制作用。采用同樣的方法對(duì)糙葉五加花乙酸乙酯萃取部位、莖乙酸乙酯部位的抗炎活性進(jìn)行研究，結(jié)果表明兩者都具有較強(qiáng)的抗炎活性[15，21]。Li XJ等[27]研究發(fā)現(xiàn)eleuhenryiside A、eleuh?

enryiside C和（-）-kobusin可能具有潛在的抗神經(jīng)炎活性，而（-）-kobusin可能還具有潛在的抗炎活性。化合物eleuhenryiside A、eleuhenryiside C和（-）-kobusin對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞中NO的生成具有抑制作用，IC50值分別為（32.50±1.60）、（3.54±0.20）、（14.25±2.69） μmol/L。此外，（-）-kobusin還對(duì)RAW264.7細(xì)胞中NO的產(chǎn)生有抑制作用，IC50值為（36.35±6.27） μmol/L。Li XJ等[12]發(fā)現(xiàn)糙葉五加中的灑維寧具有體外抗神經(jīng)炎活性。灑維寧能抑制LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞中NO、PGE2的產(chǎn)生，IC50值分別為（2.22±0.11）、（2.28±0.23） μmol/L;還可顯著抑制p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase， p38 MAPK）的磷酸化，抑制iNOS和COX-2蛋白的過度表達(dá)，減少白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β， IL-1β）、TNF-α的產(chǎn)生以及降低IL-1β、TNF-α的mRNA水平，但對(duì)IL-6生成及其mRNA水平無明顯影響。

3.2? 抗氧化

鄒親朋[22]采用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力測(cè)定法（2，2diphenyl-1-picrylhydrazyl assay， DPPH）對(duì)糙葉五加葉不同極性部位的抗氧化活性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其抗氧化能力大小為乙酸乙酯>正丁醇>石油醚。Zhang XD等[19]用DPPH法、2，2'-聯(lián)氮-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽法（2， 2'-azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid）， ABTS）和超氧陰離子清除法對(duì)分離自糙葉五加葉的化學(xué)成分進(jìn)行抗氧化活性研究，結(jié)果表明，除山柰酚-3-蕓香糖苷外，所有受試化合物對(duì)ABTS的清除活性均優(yōu)于陽性對(duì)照劑水溶性維生素E（trolox）和抗壞血酸。其中，1，5-雙咖啡?？鼘幩釋?duì)ABTS自由基的抑制作用最大，二咖啡?？鼘幩嵫苌镲@示出比陽性對(duì)照抗壞血酸和trolox更高的DPPH自由基清除活性，4，5-雙咖啡?？鼘幩釋?duì)DPPH的抑制作用最強(qiáng)，IC50值為（36.8±1.5） μmol/L。槲皮素、異懈皮苷、蘆丁、3，5-雙咖啡?？鼘幩?、3，4-雙咖啡?？鼘幩?、1，5-雙咖啡酰奎寧酸和4，5-雙咖啡?？鼘幩岬?種化合物對(duì)超氧陰離子具有較高的清除活性，其中1，5-雙咖啡酰奎寧酸對(duì)超氧陰離子清除活性最大，IC50值為（62.9±26.2） μmol/L。

3.3? 抗菌

Li QQ等[40]研究發(fā)現(xiàn)糙葉五加葉中的五加苷K能有效抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus aureus， MRSA）的生長，具有一定的抗菌作用，并使用棋盤稀釋法和時(shí)間殺菌曲線評(píng)價(jià)了苯唑西林（oxacillin， OXA）和五加苷K之間是否具有協(xié)同作用：與單用五加苷K或OXA相比，將五加苷K與OXA聯(lián)合使用時(shí)具有更顯著的抑菌作用。五加苷K能顯著降低 β-內(nèi)酰胺類抗生素對(duì)MRSA的作用劑量，五加苷K與OXA聯(lián)合應(yīng)用可明顯提高β-內(nèi)酰胺類抗生素的療效，五加苷K與β-內(nèi)酰胺類抗生素具有協(xié)同作用，表明五加苷K可以逆轉(zhuǎn)MRSA的耐藥性。此外，根據(jù)蛋白質(zhì)印跡法，青霉素結(jié)合蛋白2a（penicillin binding protein 2a， PBP2a）表達(dá)下調(diào)證實(shí)五加苷K以劑量依賴性的方式抑制細(xì)菌活性。Zhou T等[41]采用肉湯微量稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration， MIC），采用棋盤稀釋法和時(shí)間殺菌曲線測(cè)定糙葉五加葉中的烏蘇酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷（URS）與OXA的協(xié)同效應(yīng)，并使用蛋白質(zhì)印跡法測(cè)定PBP2a的蛋白水平。研究發(fā)現(xiàn)，URS對(duì)甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（methicillin-sensitive staphylococcus aureus， MSSA）和MRSA具有較強(qiáng)的抗菌活性，MIC值分別為3.125 μg/mL和6.25 μg/mL。URS和OXA在不同MRSA菌株中具有部分協(xié)同效應(yīng)，URS聯(lián)合OXA治療可使OXA的MIC降低2～32倍。使用去垢劑或三磷酸腺苷酶（adenosinetriphosphatase， ATPase）抑制劑時(shí)，MRSA對(duì)URS的敏感性增加，URS的抗菌活性可能與細(xì)胞質(zhì)膜通透性和ATPase功能的抑制有關(guān)。當(dāng)URS和OXA聯(lián)合使用時(shí)，PBP2a的蛋白表達(dá)受到抑制。透射電子顯微鏡圖像顯示細(xì)菌細(xì)胞膜崩解、細(xì)胞裂解以及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物釋放，細(xì)菌細(xì)胞形態(tài)的顯著變化表明，兩者聯(lián)合使用可降低細(xì)菌細(xì)胞膜的黏度和通透性。

3.4? 抑制膽堿酯酶

Za[?]uski D等[42]采用生物自顯影技術(shù)對(duì)糙葉五加乙醇提取物是否具有抑制膽堿酯酶活性進(jìn)行研究，研究結(jié)果提示其乙醇提取物對(duì)丁酰膽堿酯酶（butyrocholinesterase， BuChE）具有較強(qiáng)的抑制活性，IC50值為0.13 mg/mL。Zhang XD等[19]采用改良的Ellman法對(duì)分離自糙葉五加葉的各化合物抑制乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase， AchE）的活性進(jìn)行研究，其中槲皮素、4-咖啡?？鼘幩岷?，5-咖啡?？鼘幩峋哂休^強(qiáng)的AchE抑制活性，IC50值為62.6～121.9 μmol/L。

3.5? 抑制脂肪形成

Han YH等[17]采用油紅O染色法對(duì)3T3-L1細(xì)胞脂質(zhì)積累進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明糖苷St-C1和St-E2對(duì)3T3-L1細(xì)胞中脂質(zhì)積累具有抑制作用。過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferators-activated receptors gamma， PPARγ）和CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α（CCAAT/enhancerbinding proteinα， C/EBPα）是參與脂肪形成的關(guān)鍵基因[43]。為探討糖苷St-C1和糖苷St-E2抑制脂肪形成的機(jī)制，研究了糖苷St-C1和糖苷St-E2對(duì)PPARγ和C/EBPα的mRNA表達(dá)和蛋白水平的影響。結(jié)果表明，糖苷St-C1和糖苷St-E2分別在mRNA和蛋白水平上抑制PPARγ和C/EBPα的表達(dá)，通過抑制PPARγ和C/EBPα降低了脂肪細(xì)胞的分化，抑制脂肪形成;且在調(diào)節(jié)PPARγ和C/EBPα?xí)r激活腺苷酸活化蛋白激酶（Amp-activated protein kinase， AMPK）。但是，對(duì)PPARγ和C/EBPα的mRNA水平的抑制作用小于對(duì)脂質(zhì)積累的抑制作用。同樣Hong S H[44]也發(fā)現(xiàn)糖苷St-E2能抑制脂質(zhì)積累，具有抗脂肪生成的作用。

3.6? 其他藥理活性

Adamczyk K等[45]研究了5種五加（刺五加、兩歧五加、短梗五加、細(xì)柱五加、糙葉五加）根中75%甲醇提取物是否具有抑制透明質(zhì)酸酶（hyaluronidase， Hyal）活性和HL-60細(xì)胞系生長的活性。通過測(cè)定5種五加根75%甲醇提取物對(duì)HL-60細(xì)胞的細(xì)胞毒性，發(fā)現(xiàn)糙葉五加根提取物對(duì)HL-60細(xì)胞株生長的抑制作用最強(qiáng)（IC50為270 μg/mL）。使用分光光度法測(cè)定5種五加根75%甲醇提取物抑制Hyal的活性，將提取物溶解在10%的乙醇水溶液中，測(cè)定5種五加提取物對(duì)Hyal（30 U/mg）的抑制作用，結(jié)果表明抑制作用最強(qiáng)的是糙葉五加（40.7%）。在Za[?]uski D等[46]研究中，七葉皂苷作為標(biāo)準(zhǔn)化合物，濃度為100 μg時(shí)抑制率為30.1%，糙葉五加提取物顯示出比七葉皂苷更強(qiáng)的活性。

4 結(jié)語

通過對(duì)糙葉五加的化學(xué)成分及生物活性研究的歸納總結(jié)，發(fā)現(xiàn)其含有黃酮類、萜類、苯丙素類、有機(jī)酸類、甾體類、蒽醌類等多種成分。糙葉五加根、果實(shí)、葉、莖和花的物質(zhì)基礎(chǔ)均存在明顯差異，不同部位具有不同的用途。多數(shù)研究報(bào)道，糙葉五加具有良好的抗炎活性，這對(duì)糙葉五加的深入研究及其臨床應(yīng)用和產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了一定的理論依據(jù)。目前，對(duì)糙葉五加的研究集中于其單體化合物的分離及其抗炎活性等方面，且多集中于基礎(chǔ)性藥理研究，臨床應(yīng)用研究較少。因此，可利用現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)技術(shù)，結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域知識(shí)，更深入地探索與開拓糙葉五加的應(yīng)用前景。糙葉五加具有多種生物活性，但目前研究并不全面，又因其化學(xué)成分及藥理作用研究不夠深入，導(dǎo)致其開發(fā)和利用受到局限。因此，必須首先明確糙葉五加的物質(zhì)基礎(chǔ)，并在此基礎(chǔ)上通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步闡明其藥理作用及機(jī)制，為糙葉五加的臨床應(yīng)用及研究開發(fā)奠定基礎(chǔ)，為綜合利用與深入研究糙葉五加提供理論依據(jù)，對(duì)糙葉五加的研究也可以進(jìn)一步豐富五加科五加屬植物的研究內(nèi)容。

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