乳腺癌患者血清IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α水平變化及其臨床意義

林 曼

南山區(qū)婦幼保健院，廣東 深圳 518067

乳腺癌是起源于乳腺的惡性腫瘤，是國內(nèi)婦女常見的惡性腫瘤疾病，大部分是40～55歲的女性[1]。近年來，有年輕化的趨勢，20歲以上婦女的發(fā)病率呈上升趨勢，這與早期篩查及診治水平的提高有關(guān)[2]。乳腺腫塊可以通過自我檢查發(fā)現(xiàn)，特別是無痛性乳腺腫塊。建議主動去醫(yī)院檢查。乳腺B超、乳腺鉬靶及核磁共振檢查均可發(fā)現(xiàn)可疑病灶，如有必要，可以進(jìn)行穿刺活檢，以明確腫塊的性質(zhì)[3]。本研究對乳腺癌患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平的變化進(jìn)行分析評價。

1 一般資料

1.1 基本資料

2020年1月—2020年12月，選擇58例乳腺癌患者，其中早期31例，晚期27例，并選擇28例健康者，已簽同意書，經(jīng)倫理批準(zhǔn)，基本資料，見表1。

表1 基本資料（±s） 歲

表1 基本資料（±s） 歲

組別健康人（n=28）早期（n=31）晚期（n=27）P年齡45.62±10.12 44.93±10.33 45.06±10.14＞0.05

1.2 研究方法

采集患者的新鮮外周血，離心收集患者的血清，使用IL-6、IL-8、TNF-αELISA試 劑 盒，檢 測IL-6、IL-8、TNF-α水平。具體步驟：（1）包被：抗體用0.05 m PH9稀釋至1～10 g/mL蛋白質(zhì)。碳酸鹽涂層緩沖液。每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加入0.1 ml，反應(yīng)溫度為4℃過夜。第二天，把溶液倒掉，用洗滌緩沖液洗3次，每次3 min。（2）樣品添加：將0.1 ml稀釋樣品加入反應(yīng)中，在37℃溫度下培養(yǎng)1 h。同時制作空白孔、陰性孔和陽性孔。（3）添加酶標(biāo)抗體：每次反應(yīng)添加0.1 ml新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（滴定后稀釋）。在37℃下孵育0.5～1 h，然后清洗。（4）加入底物溶液顯色：加入0.1 ml TMB底物溶液，反應(yīng)37℃，10～30 min。（5）反應(yīng)終止：每個孔中加入0.05 ml的2M硫酸。反應(yīng)孔顏色越深，陽性程度越強(qiáng)。陰性反應(yīng)是無色或非常輕的。根據(jù)顏色的深度，用“+”和“-”表示。在酶標(biāo)儀上，用空白對照孔歸零后，可在450 nm處測定每個孔的吸光度值。并使用軟件計算每個濃度。（每個樣本設(shè)置3個平行孔，并且檢測重復(fù)3次以上）。

1.3 觀察指標(biāo)

分析三組血清IL-6、IL-8、TNF-α水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計量組間比較采用資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

與健康人進(jìn)行比較，早期和晚期IL-6、IL-8、TNF-α水平均高（P＜0.05），與早期比較，晚期IL-6、IL-8、TNF-α水平高（P＜0.05）。

表2 分析三組血清IL-6、IL-8、TNF-α水平（±s） ng/L

表2 分析三組血清IL-6、IL-8、TNF-α水平（±s） ng/L

組別健康人（n=28）早期（n=31）晚期（n=27）P IL-6 22.36±5.71 154.03±31.21 385.65±58.64＜0.05 IL-8 37.85±8.69 239.87±31.06 541.62±95.65＜0.05 TNF-α 9.06±1.56 15.26±3.22 20.17±4.22＜0.05

3 討論

乳腺癌是發(fā)生于乳腺腺上皮的惡性腫瘤，正常乳腺由皮膚、纖維組織、乳腺和脂肪組成，在性別方面，99%的乳腺癌發(fā)生在女性，只有1%發(fā)生在男性[4]。乳腺不是維持人體生命活動的重要器官，原位乳腺癌不是致命的，但是由于乳腺癌細(xì)胞失去了正常細(xì)胞的特征，細(xì)胞之間的聯(lián)系松散，容易脫落。一旦癌細(xì)胞脫落，游離的癌細(xì)胞就會通過血液或淋巴擴(kuò)散到全身，形成轉(zhuǎn)移并危及生命[5]。根據(jù)國家癌癥中心和國家衛(wèi)健委疾病預(yù)防控制局2019年公布的乳腺癌發(fā)病率數(shù)據(jù)，乳腺癌發(fā)病率居乳腺癌發(fā)病率之首，全國婦女乳腺癌發(fā)病率約為4 255/10萬，全市為5 191/10萬，農(nóng)村為2 312/10萬[6]。對于乳腺癌不僅要及時的進(jìn)行篩查，還有通過方法有效的判斷乳腺癌的嚴(yán)重程度。

本研究中，與健康人進(jìn)行比較，與健康人進(jìn)行比較，早期和晚期IL-6、IL-8、TNF-α水平均高，與早期比較，晚期IL-6、IL-8、TNF-α水平高。IL-6是一種多效性細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生長和分化，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、急性期反應(yīng)和造血功能，在機(jī)體抗感染免疫應(yīng)答中起重要作用[7]。IL-6在多種疾病中有明顯的變化，其表達(dá)失衡可引起多種疾病，主要臨床表現(xiàn)為發(fā)病初期IL-6水平升高。IL-8是趨化因子家族的一種細(xì)胞因子，在參與和調(diào)節(jié)人類生殖生理和病理過程的作用已得到肯定，其作用機(jī)制之一就是與其特異性受體結(jié)合而發(fā)揮作用[8]。IL-8能促進(jìn)炎癥細(xì)胞的趨化和增殖，是由th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)與細(xì)胞毒性和局部炎癥相關(guān)的輔助抗體的產(chǎn)生。它參與了細(xì)胞免疫和延遲型過敏炎癥的發(fā)生。其主要生物學(xué)作用是趨化和激活中性粒細(xì)胞，促進(jìn)溶酶體酶活性和吞噬中性粒細(xì)胞。它對嗜堿性細(xì)胞和t細(xì)胞也有一定的趨化作用，與IL-8接觸后，中性粒細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)變化，遷移到反應(yīng)部位并釋放一系列活性產(chǎn)物。這些作用會導(dǎo)致局部炎癥反應(yīng)，殺死細(xì)菌和破壞細(xì)胞。近年來發(fā)現(xiàn)IL-8在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)明顯增加。TNF-α是腫瘤壞死因子的襲一種類型，作用是一種能夠直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對正常細(xì)胞無明顯毒性的細(xì)胞因子[9]。

綜上所述，通過IL-6、IL-8、TNF-α水平可以反映乳腺癌手否處于晚期，對乳腺癌病情的判斷和預(yù)后，具有重要的臨床價值。