陸珠　于延申　于春艷

摘要：以杏鮑菇菌株作為試驗(yàn)材料，對其進(jìn)行生物學(xué)特性及原種配方、栽培種栽培配方研究。結(jié)果表明，菌絲的最適生長條件如下：pH值為8.0，最適生長溫度為25 ℃，最適碳源為可溶性淀粉，最適氮源為酵母浸粉，最適微量元素為 KH2PO4。各因素對菌絲的影響程度排序?yàn)闇囟?碳源>pH值>氮源，各因素影響間差異極顯著，最佳原種配方為2號(hào)配方，即85%玉米、5%麥麩、5%鋸末、2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏、60%含水量。最佳栽培種配方為5號(hào)配方，即65%鋸末、20%麥麩、10%稻殼、3%豆粕、1%石灰、1%石膏、60%含水量。

關(guān)鍵詞：杏鮑菇;生物學(xué)特性;栽培;碳源;氮源;原種配方

中圖分類號(hào)：S646.1+40.1;S646.1+40.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2021）19-0168-04

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）別稱刺芹側(cè)耳[1-2]，因其菌肉肥厚且具有杏仁香味和鮑魚味，又稱為杏仁鮑魚菇[3]，有“草原上美味牛肝菌”的美稱[4]，可以降血壓、降血脂、提高免疫力[5-6]，是集食用、藥用、保健于一體的珍稀食用菌品種[7]。杏鮑菇是20世紀(jì)90年代末發(fā)展起來的珍稀食用菌[8]，是目前最受歡迎的蘑菇品種之一，其最早起源于歐洲，為亞洲部分地區(qū)的人們廣泛食用[9-12]。近年來，杏鮑菇已經(jīng)成為東亞地區(qū)種植最廣泛的蘑菇之一。本研究采用單因素和4因素3水平正交試驗(yàn)對吉林省食用菌研究院保藏的杏鮑菇（菌株號(hào)：JLSHJY2018064）的生物學(xué)特性[13-16]進(jìn)行研究，優(yōu)化菌絲培養(yǎng)條件，進(jìn)而篩選最佳生長條件?；趦?yōu)化的菌絲生長條件，以菌絲生長速度和菌絲長勢為衡量標(biāo)準(zhǔn)，篩選原種培養(yǎng)基配方和栽培種培養(yǎng)基配方。

1材料與方法

1.1供試材料

本試驗(yàn)于2020年11月至2021年1月末在吉林省蔬菜花卉科學(xué)研究院完成。供試菌株由吉林省食用菌研究院保藏（菌株號(hào)：JLSHJY2018064），經(jīng)過分子生物學(xué)試驗(yàn)，提取其DNA并擴(kuò)增ITS序列，將其結(jié)果在GenBank上進(jìn)行比對，確定該菌株為杏鮑菇（GenBank登錄號(hào)：MW426371）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1單因素試驗(yàn)

1.2.1.1碳源試驗(yàn)PDA（馬鈴薯葡萄糖瓊脂）基礎(chǔ)培養(yǎng)基，碳源分別為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、可溶性淀粉，其他成分不變，配制100 mL培養(yǎng)基，并倒入3個(gè)平板中。在培養(yǎng)基平板中央接入直徑為 5 mm 的大小相同的菌塊，于25 ℃培養(yǎng)。每隔24 h觀察1次并用平板劃線法測量、標(biāo)記菌絲生長長度。連續(xù)測量直至某一平板長滿菌絲，同時(shí)觀察并記錄菌絲長勢，繪制折線圖，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.1.2氮源試驗(yàn)PDA基礎(chǔ)培養(yǎng)基，氮源分別為酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨、麥麩汁，其他條件不變。處理、接種、培養(yǎng)、記錄、測量、分析方法等同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.1.3pH值試驗(yàn)采用PDA基礎(chǔ)培養(yǎng)基，設(shè)置pH值為5、6、7、8、9等5個(gè)梯度，為作圖方便分別命名為pH1、pH2、pH3、pH4、pH5，其他條件同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.1.4溫度試驗(yàn)PDA基礎(chǔ)培養(yǎng)基，pH值設(shè)為自然條件，接種后分別置于15、20、25、30、35 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其他條件同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.1.5微量元素篩選試驗(yàn)PDA基礎(chǔ)培養(yǎng)基，pH值自然，以空白、0.15% KH2PO4、0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4、0.1% CaCO3、005% 維生素B1作為供試的微量元素。其他條件同“1211”節(jié)。

1.2.2正交試驗(yàn)從5種單因素中選出培養(yǎng)效果最佳者，組成4因素3水平的正交試驗(yàn)（表1）。具體采用PDA培養(yǎng)基，分別添加相應(yīng)的碳源、氮源、微量元素，改變pH值及溫度，置于不同環(huán)境下培養(yǎng)。其他條件同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.3原種培養(yǎng)基配方試驗(yàn)分別以高粱、玉米和小麥為主料，配方為85%主料、5%麥麩、5%鋸末、 2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏，分別設(shè)置含水量為55%、60%、65%。分別編號(hào)為1（主料為高粱，含水量為55%）、2（主料為高粱，含水量為60%）、3（主料為高粱，含水量為65%）、4（主料為玉米，含水量為55%）、5（主料為玉米，含水量為60%）、6（主料為玉米，含水量為65%）、7（主料為小麥，含水量為55%）、8（主料為小麥，含水量為60%）、9（主料為小麥，含水量為65%）。接種量以鋪滿袋口為準(zhǔn)，置于25 ℃培養(yǎng)。每隔24 h觀察1次并用劃線法測量、標(biāo)記菌絲生長長度。連續(xù)測量直至出現(xiàn)某一袋長滿菌絲，同時(shí)觀察并記錄菌絲長勢，繪制折線圖，每個(gè)處理設(shè)10個(gè)重復(fù)。

1.2.4栽培種栽培配方試驗(yàn)分別以木屑、玉米芯和鋸末為主料，配方為主料65%、20%麥麩、10%稻殼、3%豆粕、1%石灰、1%石膏，含水量分別設(shè)置為55%、60%、65%，其他條件同“1.2.3”節(jié)。分別編號(hào)為1（主料木屑，含水量55%）、2（主料木屑，含水量60%）、3（主料木屑，含水量65%）、4（主料玉米芯，含水量55%）、5（主料玉米芯，含水量60%）、6（主料玉米芯，含水量65%）、7（主料鋸末，含水量55%）、8（主料鋸末，含水量60%）、9（主料鋸末，含水量65%）。

1.3數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)采用Graph Pad Prism 5和SPSS軟件進(jìn)行圖片制作和統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果與分析

2.1碳源對菌絲生長的影響

由圖1、表2可以看出，菌絲在葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖和可溶性淀粉5種碳源上均能生長，在以乳糖為碳源的培養(yǎng)基上，菌絲生長緩慢，長勢明顯減弱，與生長速度最快、長勢最好的蔗糖相比差異極顯著。在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上，菌絲的長勢也較稀疏，與蔗糖相比差異顯著。在以蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉為碳源的培養(yǎng)基上，菌絲生長速度雖有差別但差異不顯著。綜合菌絲長勢和菌絲生長速度可見，蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉均是菌絲可利用的較好碳源。

2.2氮源對菌絲生長的影響

由圖2、表2可以看出，菌絲在酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨和麥麩汁氮源上均能生長，但在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上生長極其緩慢;在以硫酸銨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長緩慢，長勢明顯減弱;在以酵母粉為氮源的培養(yǎng)基上生長速度最快，菌絲長勢最好;在以蛋白胨、麥麩汁為氮源的培養(yǎng)基上的長勢次之;在以蛋白胨、尿素、硫酸銨和麥麩汁為氮源的培養(yǎng)基上的生長速度與酵母浸粉相比差異均極顯著。綜上，酵母浸粉是菌絲生長的最適氮源。

2.3pH值對菌絲生長的影響

由圖3、表2可以看出，菌絲在pH值為5.0～90時(shí)均能生長，在此期間菌絲生長速率呈先逐漸上升后又逐漸下降的趨勢，與生長速度最快、長勢最好的pH3（pH值為7）相比，pH2 （pH值為6）時(shí)的菌絲生長速率差異不顯著，與其他組別相比差異極顯著。

2.4溫度對菌絲生長的影響

由圖4、表2可以看出，菌絲在15～35 ℃范圍內(nèi)均能生長，但在15 ℃以下、35 ℃以上時(shí)，菌絲生長非常緩慢，菌絲長勢較弱。在25、30 ℃時(shí)，菌絲生長速度快、長勢好。與生長速度最快、長勢最好的25 ℃相比，菌絲在30 ℃下的生長速率差異不顯著，與在20 ℃下的生長速率相比差異顯著，與15、35 ℃下的生長速率相比差異極顯著。因此得出菌絲的最適生長溫度為25～30 ℃。

2.5微量元素對菌絲生長的影響

由圖5可以看出，菌絲在0.15% KH2PO4、01% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4、01% CaCO3、0.05% 維生素B1為微量元素的培養(yǎng)基上均能生長，與生長速度最快的以0.15% KH2PO4為微量元素的培養(yǎng)基相比，0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4的菌絲生長速率差異不顯著，與0.1% CaCO3培養(yǎng)基有顯著性差異，與005%VB1培養(yǎng)基相比差異極顯著。由此可見，015% KH2PO4、0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+01% MgSO4均是菌絲可利用的較好微量元素。

2.6正交試驗(yàn)結(jié)果分析

由于單因素試驗(yàn)不能考慮到交互作用的影響，因此需要進(jìn)行正交試驗(yàn)才能得出最終結(jié)果。本研究以碳源、氮源、溫度、pH值組建4因素3水平的正交試驗(yàn)，觀察各試驗(yàn)菌絲的生長情況（表3、表4）。由表3可以看出，9組試驗(yàn)菌絲均能生長，以第7組菌絲的生長速度最快、長勢最好。經(jīng)SPSS主體效應(yīng)分析得出結(jié)論，各因素對菌絲生長的影響力排序?yàn)闇囟?碳源>pH值>氮源。在正交試驗(yàn)中，生長最快的為7號(hào)培養(yǎng)條件（碳源為可溶性淀粉，氮源為酵母浸粉，pH值為8，溫度為25 ℃）。

2.7原種培養(yǎng)基配方試驗(yàn)結(jié)果分析

由圖6可以看出，菌絲在供試配方上均能生長，最佳原種培養(yǎng)基配方為2號(hào)，即85%玉米、5%麥麩、5%鋸末、2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏、60%含水量。與3、5號(hào)配方相比差異不顯著，與1號(hào)配方相比差異顯著，與6、8號(hào)配方相比差異極顯著，與4、7、9號(hào)配方相比差異極顯著。

2.8栽培種栽培配方試驗(yàn)結(jié)果分析

由圖7可見，菌絲在供試配方上均能生長，最佳培養(yǎng)基配方為5號(hào)，即65%鋸末、20%麥麩、10%稻殼、 3%豆粕、1%石灰、1%石膏、60%含水量。與1、

2、4、7、8、9號(hào)培養(yǎng)基相比差異不顯著，與3號(hào)培養(yǎng)基相比差異極顯著，與6號(hào)培養(yǎng)基相比差異極顯著。

3結(jié)論

通過對杏鮑菇菌絲生長所需的碳源、氮源、溫度、pH值和微量元素的單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，得出供試范圍內(nèi)的適宜碳源為可溶性淀粉，適宜氮源為酵母浸粉，適宜pH值為8，適宜溫度為25 ℃，微量元素為 KH2PO4，最佳原種培養(yǎng)基配方為2號(hào)，最佳栽培種培養(yǎng)基配方為5號(hào)。

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作者簡介：陸珠（1991—），女，吉林公主嶺人，碩士，實(shí)習(xí)研究員，主要從事食用菌方面的研究。E-mail：783929277@qq.com。

通信作者：于延申，碩士，研究員，主要從事食用菌方面的研究。E-mail：1943294308@qq.com。