陽荷植物組織培養(yǎng)技術(shù)的研究

賀強(qiáng)

摘要：陽荷與生姜同屬于姜科姜屬多年生草本植物，以陽荷與生姜在其生理特性和生長習(xí)性方面具有相似性的原理，借助生姜植物組織培養(yǎng)的條件，以陽荷的幼芽為外植體，研究陽荷的組織快繁技術(shù)[1]，對獲得的幼苗進(jìn)行形態(tài)觀察。結(jié)果表明：適宜誘導(dǎo)陽荷幼苗分化的培養(yǎng)基為MS+ NAA0.2mg/L+KT2.0mg/L;適宜生根的培養(yǎng)基為MS+NAA0.3mg/L+KT0.5mg/L

關(guān)鍵詞：陽荷;組織培養(yǎng);快速繁殖;姜科姜屬

陽荷（Zingiber striolatum Diels）又名野姜、野姜、陽藿、觀音花[2]，為姜科姜屬多年生草本植物，是一種營養(yǎng)價值很高的食藥同源的膳食纖維蔬菜[3]。陽荷富含氨基酸、蛋白質(zhì)、膳食纖維、紅花紅色素和微量元素等，具有活血調(diào)經(jīng)、祛痰止咳、解毒消腫、抗炎抗菌、抗氧化和降血糖作用，主治月經(jīng)不調(diào)、跌打損傷、咳嗽氣喘等疾病[4，5]，是一種具有豐富營養(yǎng)和保健作用的野生蔬菜[6，7]。陽荷喜溫怕寒，怕干旱，不耐澇，適宜在PH為6.5-7.5的中性或微酸性的土壤中種植，7-9月為陽荷花期，9-11月為陽荷果期[8]。陽荷可以開發(fā)成深加工產(chǎn)品，如陽荷罐頭、泡菜以及陽荷汁飲料等產(chǎn)品，已經(jīng)銷往全國各地及日本、韓國等國家[9]，可見陽荷具有極大的食用價值。

本研究根據(jù)陽荷與生姜同屬于姜科姜屬的生理特性，借助生姜植物組織培養(yǎng)的條件對陽荷進(jìn)行研究，以陽荷的幼芽為外植體，探究適宜誘導(dǎo)陽荷幼苗分化以及適宜其生根的條件，對陽荷的組織快繁技術(shù)、脫毒苗培育等進(jìn)行科學(xué)探討。

1材料與方法

1.1實驗材料

選用貴州山區(qū)野生蔬菜陽荷的種根為實驗材料，挑選生長良好、健壯的陽荷種根，放入紙盒或者塑料袋中，保持陽荷種根表面濕潤。將其放于通風(fēng)透光，氣溫為21-26℃的條件下進(jìn)行催芽[10]，待陽荷芽萌發(fā)至2cm左右時取出，將其幼芽從基部切下作為外植體材料。

1.2外植體處理

將切下來的外植體材料在自來水流水下沖洗干凈[11]，將外植體由外至內(nèi)依次剝?nèi)ビ啄鄣娜~片，直至見到陽荷生長點，將距生長點0.5-1cm以下部位切除，勿傷及生長點。將切取的生長點置于事先準(zhǔn)備好的燒杯中，用紗布封住燒杯口，流水沖洗30min以上。隨后用75%乙醇處理30S左右，再用無菌水沖洗2次以上，洗去多余的乙醇溶液。用0.1%HgCl2處理無菌水清洗過的外植體約4-7min，再用無菌水沖洗4次以上，洗去多余的HgCl2，防止消毒時間過長，造成外植體死亡。最后，將處理好的外植體放入培養(yǎng)瓶準(zhǔn)備接種。

2培養(yǎng)基的選擇和配制

2.1培養(yǎng)基的選擇

植物組織培養(yǎng)過程中常用的培養(yǎng)基包括MS、MT、B5、SH等，其中生姜組織培養(yǎng)大多使用MS[10]。因此，本實驗選擇MS培養(yǎng)基對陽荷進(jìn)行組織培養(yǎng)探究。

2.2培養(yǎng)基的配制

2.2.1誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制

以MS為基本培養(yǎng)基，取一干凈燒杯，加入蔗糖25g，NAA0.2mg/L、KT2.0mg/L定容至1L，調(diào)PH值至6.0-7.0之間，倒入加熱鍋中煮至沸騰再加入6-7g瓊脂，煮至澄清均勻倒入培養(yǎng)瓶中，隨后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

2.2.2生根培養(yǎng)基的配制

采用陽荷初代培養(yǎng)的莖稈進(jìn)行誘導(dǎo)生根，同樣以MS培養(yǎng)基為主，加入蔗糖25g，NAA0.3mg/L，KT0.5mg/L，定容至1L，調(diào)PH值至6.0-7.0，加入瓊脂6-7g，煮至澄清均勻倒入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

3誘導(dǎo)陽荷幼苗分化與生根

3.1誘導(dǎo)陽荷幼苗分化

在無菌操作臺上，將處理好的外植體插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每個培養(yǎng)瓶中3-4株，結(jié)束后貼上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)名稱以及時間日期，將其放于恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)箱溫度21-24℃，光照度60，每天光照16h，黑暗8h[11]。觀察記錄20天陽荷幼苗生長狀況，及時清理生長壞死或者染菌植株，觀察發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)的陽荷幼苗生長健壯。

3.2誘導(dǎo)陽荷生根

挑選經(jīng)誘導(dǎo)分化長出的生長良好陽荷幼苗，在無菌操作臺上，剪去多于的葉片以及愈傷組織，留生長點以下2cm左右，將其插入誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件與誘導(dǎo)分化相同。觀察并記錄陽荷生長和產(chǎn)生根系狀況。

4實驗結(jié)果分析

經(jīng)對誘導(dǎo)陽荷幼苗分化以及誘導(dǎo)生根生長出的幼苗的觀察發(fā)現(xiàn)，生姜的組織培養(yǎng)條件對陽荷的組織培養(yǎng)條件有很大的參考價值，生姜的培養(yǎng)條件完全可以用于培養(yǎng)陽荷，利用其生長條件誘導(dǎo)生長出的陽荷幼苗生長健壯。即可以得出誘導(dǎo)陽荷幼苗分化的適合培養(yǎng)基為MS+ NAA0.2mg/L+KT2.0mg/L;誘導(dǎo)陽荷莖稈生根的適合培養(yǎng)基為MS+NAA0.3mg/L+KT0.5mg/L?？梢杂行У膶﹃柡蛇M(jìn)行脫毒苗培育以及在生產(chǎn)育種中縮短育種時間，提高育種效率，選育新品種等。

參考文獻(xiàn)

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