中藥配方顆粒質(zhì)量控制研究現(xiàn)狀分析與思考

禹亞杰，包銳

（四川護(hù)理職業(yè)學(xué)院，四川 成都 610100）

0 引言

中藥配方顆粒是中藥現(xiàn)代化、產(chǎn)業(yè)化的產(chǎn)物，是由單味中藥飲片經(jīng)水提、濃縮、干燥、制粒而成，經(jīng)中醫(yī)臨床配方后，供患者沖服使用[1]。中藥配方顆粒（以下簡(jiǎn)稱(chēng)配方顆粒）是中藥飲片的補(bǔ)充形式，改變了中藥湯劑的用藥方式。在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，通過(guò)臨床醫(yī)師的處方組合，在某些藥理作用方面可以起到與傳統(tǒng)飲片組方相似的效果，甚至優(yōu)于傳統(tǒng)湯劑效果[2]。與傳統(tǒng)中藥飲片相比，配方顆粒體積小、攜帶方便、服用方便。在一定程度上改變了人們對(duì)傳統(tǒng)中藥湯劑煎煮繁瑣、服用量大、儲(chǔ)存不便、攜帶不便的認(rèn)識(shí)。相較于傳統(tǒng)中藥飲片的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制，配方顆粒在生產(chǎn)過(guò)程中由于設(shè)備要求高、工藝復(fù)雜、對(duì)原材料的要求高等因素致使價(jià)格比傳統(tǒng)中藥飲片高1～2 倍[3]。中藥配方顆粒繼承和發(fā)揚(yáng)了中醫(yī)藥理論，保持了中醫(yī)藥特色和優(yōu)勢(shì)，但人們?cè)谑褂门浞筋w粒的同時(shí)也對(duì)其質(zhì)量存在疑慮。如何保障配方顆粒與傳統(tǒng)飲片質(zhì)量和療效的等效性，仍是人們爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。2019 年，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求》（征求意見(jiàn)稿），國(guó)家藥典委公布了160 個(gè)品種的試點(diǎn)配方顆粒統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。以較高的規(guī)格對(duì)配方顆粒的質(zhì)量進(jìn)行規(guī)范。但相較于臨床常用的600 多種規(guī)格的中藥飲片，統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的試點(diǎn)配方顆粒數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足，這也是配方顆粒未來(lái)的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。本次研究通過(guò)現(xiàn)有的文獻(xiàn)資料等，總結(jié)標(biāo)準(zhǔn)湯劑和配方顆粒的質(zhì)量研究現(xiàn)狀，以期為配方顆粒質(zhì)量控制提供一定參考。

1 標(biāo)準(zhǔn)湯劑控制研究現(xiàn)狀

中藥材或中藥飲片制備成中藥配方顆粒后已完全失去其外觀性狀、氣味與鑒別點(diǎn)等特征，如何評(píng)價(jià)二者的等效性及臨床療效一直存在爭(zhēng)議。標(biāo)準(zhǔn)湯劑是以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，以臨床應(yīng)用為基礎(chǔ)，結(jié)合現(xiàn)代提取方法，將單味中藥飲片經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化工藝制備而成的水煎劑[4]。標(biāo)準(zhǔn)湯劑是衡量配方顆粒是否與臨床湯劑基本一致的物質(zhì)基準(zhǔn)，為使配方顆粒能夠承載中藥飲片的安全性、有效性，需要以標(biāo)準(zhǔn)湯劑為橋接。故標(biāo)準(zhǔn)湯劑應(yīng)按照臨床湯劑煎煮方法規(guī)范化煎煮，固液分離，以出膏率、有效（或指標(biāo)）成份的含量及轉(zhuǎn)移率、特征圖譜等綜合表征，保證以其為中間體制備的顆粒劑與中藥飲片具有臨床療效一致性。

1.1 標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率及影響因素

按照《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求》（征求意見(jiàn)稿）有關(guān)規(guī)定，中藥標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率范圍為均值加減3倍SD或均值的70%～130%（干膏粉計(jì)算浸膏得率及標(biāo)準(zhǔn)偏差）。邱連建[5]等以24批市售魚(yú)腥草為樣品，來(lái)源于重慶的3 個(gè)樣品中的1個(gè)樣品、來(lái)源于湖北的5 個(gè)樣品中的1 個(gè)樣品和來(lái)源于四川的16 個(gè)樣品中的8 個(gè)樣品的出膏率大于平均值。凌成利等[6]研究了15 批不同產(chǎn)地天麻標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率，結(jié)果來(lái)源于湖北的6 個(gè)樣品中的5個(gè)樣品，來(lái)源于云南的5 個(gè)樣品出膏率大于平均值；來(lái)源于東北、湖南、貴州的共4 個(gè)樣品出膏率全部小于平均出膏率。王學(xué)圓等[7]測(cè)定了不同產(chǎn)地的荷葉的標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率，來(lái)自湖南的9 個(gè)樣品中的2個(gè)和來(lái)自江西的5 個(gè)樣品中的4 個(gè)樣品出膏率大于平均出膏率。以上數(shù)據(jù)在一定程度上表明在相同的制備條件下，產(chǎn)地是影響出膏率的原因之一，配方顆粒要求投料的“道地性”是必要的。當(dāng)然，也可能與某些地區(qū)的樣品量少、樣本基數(shù)低有一定關(guān)系。中藥飲品的規(guī)格是影響中藥煎出率的重要因素。林杰等[8]研究了白芍飲品的厚度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率的影響，結(jié)果表明白芍飲片越厚其出膏率越低。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)湯劑轉(zhuǎn)移率及影響因素

標(biāo)準(zhǔn)湯劑是否具有和中藥飲片相似的臨床效用，取決于中藥防病治病的物質(zhì)基礎(chǔ)“化學(xué)成分”特別是有效成分或物質(zhì)質(zhì)量標(biāo)志物（Q-marker）[9]的轉(zhuǎn)移率。用于標(biāo)準(zhǔn)湯劑轉(zhuǎn)移率測(cè)定的標(biāo)志物一般是中藥材（中藥飲片）中含量較高的成分，或能代表其主要臨床療效的成分[10]。多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)湯劑中用于標(biāo)示轉(zhuǎn)移率的成分與藥典規(guī)定的質(zhì)量控制成分一致[11-13]，少數(shù)與藥典規(guī)定質(zhì)量控制成分不一致[7]，其原因有三：首先，制備方法不同，藥典中的含量測(cè)定多用有機(jī)溶劑提取，標(biāo)準(zhǔn)湯劑則采用傳統(tǒng)水煎煮方法。使某些脂溶性較強(qiáng)的成分無(wú)法溶出，故難以測(cè)定。其次，某些成分具有揮發(fā)性，水煎煮過(guò)程中可能隨煎煮液蒸發(fā)，也難以測(cè)定。故對(duì)含揮發(fā)性成分的中藥標(biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒采用單獨(dú)提取揮發(fā)油按比例加入的方式制備。最后，藥典規(guī)定的成分不一定是該味藥發(fā)揮臨床療效的物質(zhì)基礎(chǔ)。以臨床療效為準(zhǔn)則的標(biāo)準(zhǔn)湯劑可以選擇更能代表臨床療效的成分標(biāo)示轉(zhuǎn)移率。與出膏率類(lèi)似飲片厚度[8]、產(chǎn)地[5,7,13-15]等因素也同樣影響指標(biāo)成分的轉(zhuǎn)移率。除此之外，炮制也是影響轉(zhuǎn)移率的原因之一[16]。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)湯劑指紋圖譜研究進(jìn)展

中藥指紋圖譜是整體分析中藥成分的國(guó)際公認(rèn)最有效的手段，以指標(biāo)成分為基準(zhǔn)對(duì)中藥材（中藥飲片）與標(biāo)準(zhǔn)湯劑比較進(jìn)行指紋圖譜研究，有效控制標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量。指紋圖譜也是在《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求》（征求意見(jiàn)稿）中建議標(biāo)示標(biāo)準(zhǔn)湯劑的方法。有研究者[17]利用高效液相色譜技術(shù)研究了15 批甘草標(biāo)準(zhǔn)湯劑的指紋圖譜，并指認(rèn)出13 個(gè)特征峰。王子怡等[18]對(duì)不同產(chǎn)地的16 批山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行測(cè)定，建立山楂葉標(biāo)準(zhǔn)湯劑HPLC 指紋圖譜，并對(duì)5 種黃酮類(lèi)成分綠原酸、牡荊素鼠李糖苷、牡荊素葡萄糖苷、蘆丁、金絲桃苷進(jìn)行含量測(cè)定。許懷禮等[19]利用UPLC 分析了15 批鹽杜仲的標(biāo)準(zhǔn)湯劑，確定了其指紋圖譜，指認(rèn)出9個(gè)共有峰。董青等[20]建立UPLC-UV 指紋圖譜，有7個(gè)共有峰，并同時(shí)測(cè)定斯皮諾素和酸棗仁皂苷A含量。陳錦霞[21]等創(chuàng)新性的將火麻仁標(biāo)準(zhǔn)湯劑的水溶性和脂溶性分別建立指紋圖譜，并標(biāo)示出10 個(gè)特征峰。

2 配方顆粒質(zhì)量研究現(xiàn)狀

配方顆粒是中藥飲片新的臨床應(yīng)用形式，按照中藥藥典的顆粒劑項(xiàng)下的相關(guān)規(guī)定。顆粒劑是中藥飲片的臨床替代品，與傳統(tǒng)的中藥用法相比有諸多優(yōu)勢(shì)。但仍有人在配方顆粒的質(zhì)量與傳統(tǒng)湯劑等效性上存疑。因此，如何確保中藥配方顆粒質(zhì)量，如何解決配方顆粒品質(zhì)優(yōu)劣評(píng)價(jià)與及安全性、有效性評(píng)價(jià)，成為中藥配方顆粒研究者和生產(chǎn)企業(yè)亟待解決的問(wèn)題。2020 年11 月國(guó)家藥典委發(fā)布“關(guān)于中藥配方顆粒品種試點(diǎn)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的公示”廣東一方制藥有限公司、江陰天江藥業(yè)有限公司、四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司、北京康仁堂藥業(yè)有限公司、華潤(rùn)三九醫(yī)藥股份有限公司、培力（南寧）藥業(yè)有限公司、神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司、天士力醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司和安徽九洲方圓制藥有限公司9 家公司提供的160 個(gè)品種配方顆粒的試點(diǎn)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)配方顆粒的特點(diǎn)和中藥化學(xué)成分的復(fù)雜性，應(yīng)通過(guò)加強(qiáng)專(zhuān)屬性鑒別和多成份、整體質(zhì)量控制來(lái)控制配方顆粒的質(zhì)量。建立與藥效相關(guān)的活性成份或Q-marker 含量測(cè)定項(xiàng)，采用指紋圖譜或特征圖譜等方法進(jìn)行整體質(zhì)量評(píng)價(jià)，也可以采用生物活性評(píng)價(jià)方法。

2.1 活性成分或質(zhì)量標(biāo)志物（Q-marker）含量測(cè)定

活性成分或質(zhì)量標(biāo)志物（Q-marker）的含量是標(biāo)示藥物質(zhì)量的重要指標(biāo)，中藥制備成配方顆粒后已完全失去性狀鑒別的“外貌特征”，故含量測(cè)定成為控制其質(zhì)量的重要參數(shù)。王曉偉[22]等通過(guò)建立高效液相色譜法-二極管陣列檢測(cè)器（HPLC-DAD）雙波長(zhǎng)法同時(shí)測(cè)定不同廠家的柴胡配方顆粒中的柴胡皂苷a 和柴胡皂苷b2 的含量，測(cè)定結(jié)果顯示不同廠家的兩種皂苷的含量差異較大。呂佳佳等[23]利用甘草中的活性成分甘草苷和甘草酸的含量作為優(yōu)化甘草飲片制備甘草配方顆粒工藝的指標(biāo)。劉恩俊等[24]通過(guò)將12 批不同產(chǎn)地的黃精制成配方顆粒后，利用紫外分光光度法測(cè)定黃精多糖和總酚含量，結(jié)果表明不同產(chǎn)地的黃精配方顆粒兩者含量差異較大，分別規(guī)定總酚含量不得低于11.00mg·g-1，黃精多糖含量不得低于24.00mg·g-1；利用HPLC 測(cè)定黃精中主要成分5-羥甲基糠醛的含量，并將5-羥甲基糠醛含量不得低于0.500mg·g-1列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。黃博等[25]利用HPLC 法測(cè)定了不同廠家腫節(jié)風(fēng)配方顆粒的指紋圖譜，并同時(shí)測(cè)定了綠原酸、異嗪皮啶、迷迭香酸的含量，結(jié)合化學(xué)計(jì)量分析后得出不同企業(yè)腫節(jié)風(fēng)配方顆粒質(zhì)量不一致性。在公布的160 個(gè)品種中包含了腫節(jié)風(fēng)的統(tǒng)一試點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)，可以在極大程度上改善不同廠家質(zhì)量差異較大的問(wèn)題。

2.2 配方顆粒的指紋圖譜和特征圖譜研究

指紋圖譜和特征圖譜作為公認(rèn)的質(zhì)量控制手段，對(duì)多組分配方顆粒的質(zhì)量控制有著重要意義。高效液相色譜、超高液相色譜、MS 等技術(shù)常用于建立配方顆粒的指紋圖譜或特征圖譜。王趙等[26]利用HPLC 指紋圖譜對(duì)比不同廠家的金銀花配方顆粒的質(zhì)量，共檢測(cè)29 批次，確證了17 個(gè)共有峰，指認(rèn)出10 個(gè)特征峰；結(jié)合聚類(lèi)分析樣品按廠家基本可聚為一類(lèi)，其中綠原酸特征峰對(duì)指紋圖譜影響最大。王曉偉等[27]利用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器-蒸發(fā)光檢測(cè)器（HPLC-DAD-ELSD）聯(lián)用技術(shù)建立19批柴胡配方顆粒的指紋圖譜，不同檢測(cè)器的共有峰不同。其中HPLC-DAD（210nm）指紋圖譜共有峰14 個(gè)，HPLC-DAD（254nm）指紋圖譜共有峰9 個(gè)；HPLCELSD 指紋圖譜共有峰10 個(gè)。同時(shí)確認(rèn)了柴胡皂苷a、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2 及柴胡皂苷c 主成分峰。此外HPLC-MS/MS 等技術(shù)也用于配方顆粒的特征圖譜的建立[28]。

2.3 配方顆粒等效性評(píng)價(jià)

配方顆粒與傳統(tǒng)飲片的等效性評(píng)價(jià)是研究者一直致力解決的問(wèn)題。有研究表明，通過(guò)指紋圖譜數(shù)據(jù)結(jié)合聚類(lèi)分自（CA）與主成分分析（PCA）[29]，以標(biāo)準(zhǔn)煎液與配方顆粒相似度為參考評(píng)價(jià)配方顆粒與傳統(tǒng)中藥飲片湯劑的相似性。也可以通過(guò)測(cè)定給藥后試驗(yàn)動(dòng)物的血清藥物化學(xué)成分對(duì)配方顆粒的標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行生物等效性研究[30]。謝平等[31]利用大鼠模型以UPLC-MS 定量分析方法測(cè)定大鼠血漿中三葉青藤葉配方顆粒新綠原酸、綠原酸、葒草苷、異葒草苷、異葒草苷-2'-O-鼠李糖苷五個(gè)效應(yīng)組分的血藥濃度，比較配方顆粒與湯劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特性及生物等效性。結(jié)果表明三葉青藤配方顆粒與湯劑有生物等效性。韓月丹等[32]比較了相同生藥量濃度下姜半夏配方顆粒與飲片煎劑對(duì)小鼠AML12 肝細(xì)胞毒性的差異，結(jié)果表明在相同生藥濃度下，中藥配方顆粒毒性比飲片煎劑小，這可能與中藥配方顆粒制備過(guò)程中的加工制備方式有關(guān)。另有研究者利用化學(xué)相似性與生物等效性相結(jié)合來(lái)評(píng)價(jià)配方顆粒與傳統(tǒng)湯劑的一致性[33-34]。

3 分析與思考

出膏率和轉(zhuǎn)移率是標(biāo)示中藥中主要成分提出與轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率與轉(zhuǎn)移率直接影響配方顆粒的質(zhì)量與制作成本。若出膏率與轉(zhuǎn)移率低，相同重量的原藥材制備的配方顆粒產(chǎn)率降低，價(jià)格會(huì)隨之升高。這必將影響配方顆粒的推廣與市場(chǎng)占有率。從上述文獻(xiàn)中可以發(fā)現(xiàn)，出膏率與中藥的產(chǎn)地關(guān)系密切，這與中藥的“道地性”理論相適應(yīng)。這提示我們?cè)谥苽錁?biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)需考慮不同產(chǎn)地藥材差異性。

活性成分或質(zhì)量標(biāo)志物（Q-marker）是中藥發(fā)揮臨床療效的基礎(chǔ)，其含量也是評(píng)價(jià)配方顆粒與飲片一致性的重要指標(biāo)。由于中藥中成分復(fù)雜，《中國(guó)藥典》在控制中藥質(zhì)量時(shí)多采用脂溶性成分，而配方顆粒要采用水煎煮的方式提取必然與《中藥藥典》規(guī)定的含量測(cè)定成分有差異。目前公布的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)中主要是關(guān)注配方顆粒的外觀性狀等特征，如何找到更適合配方顆粒質(zhì)量控制的含量測(cè)定成分依然是配方顆粒質(zhì)量控制的瓶頸。且對(duì)于配方顆粒的一致性評(píng)價(jià)方法過(guò)于單一，我們應(yīng)將Q-marker 與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相結(jié)合進(jìn)行研究。既要控制配方顆粒與飲片在質(zhì)量上的一致性，也要控制其生物等效性中的一致性。

在標(biāo)準(zhǔn)湯劑與配方顆粒的指紋圖譜研究中高校液相與超高液相發(fā)揮了重要作用，但僅僅依靠此類(lèi)檢測(cè)技術(shù)不足以全面控制配方顆粒的質(zhì)量。如揮發(fā)性成分與無(wú)紫外吸收的成分并不能被很好的檢出。故在控制配方顆粒質(zhì)量時(shí)我們需要借助多方檢測(cè)形式如HPLC-MS 及氣象色譜等。

4 結(jié)語(yǔ)

中藥配方顆粒是適應(yīng)形勢(shì)下的中藥飲片的傳承與發(fā)展，改變了中藥傳統(tǒng)的湯劑服用方法。經(jīng)過(guò)近年來(lái)研究者與企業(yè)的共同努力，中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑和中藥配方顆粒的質(zhì)量均一性、穩(wěn)定性，臨床療效的等效性方面取得了長(zhǎng)足發(fā)展。隨著國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的范圍越來(lái)越廣，新的提取、濃縮、干燥、檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，中藥配方顆粒質(zhì)量會(huì)更趨于穩(wěn)定。中藥配方顆粒會(huì)與傳統(tǒng)飲片一起豐富中藥的用藥形式，使中醫(yī)藥現(xiàn)代化更上一層樓。