針灸治療潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)作用機(jī)制的研究進(jìn)展

麻琦瑤，倪 敏

（1. 南京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，江蘇 南京 210046 ；2. 南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京中醫(yī)院，江蘇 南京 210001）

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC) 是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，其以結(jié)腸黏膜連續(xù)性、彌漫性炎癥改變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)，病因尚未完全明確[1]。此病患者可出現(xiàn)腹瀉、排黏液膿血便、腹痛、里急后重等癥狀，其病程多在4 ～6 周以上[1-2]。中醫(yī)認(rèn)為，此病屬于本虛標(biāo)實(shí)之證，多由脾腎虛損、正不勝邪、邪氣留連所致，故其病程遷延、纏綿難愈。針灸療法具有扶正祛邪、平衡陰陽(yáng)、調(diào)理臟腑的功效。大量的研究證實(shí)，用針灸療法治療UC 可取得顯著的療效。在本文中，筆者主要是介紹近年來(lái)有關(guān)用針灸療法治療UC 作用機(jī)制的研究進(jìn)展。

1 用針灸療法治療UC 時(shí)產(chǎn)生的免疫調(diào)節(jié)作用

1.1 調(diào)控細(xì)胞因子

目前，臨床上尚未明確UC 的發(fā)病機(jī)制。有研究表明，由遺傳易感性、環(huán)境、心理等多種因素引起的免疫失衡是導(dǎo)致其發(fā)生的重要因素。相關(guān)的研究指出，T 淋巴細(xì)胞亞群〔包括輔助性T 細(xì)胞(T helper cell，Th)、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Tregs) 和細(xì)胞毒性T 細(xì)胞(cytotoxic T ceils,Tc)〕等免疫細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子在免疫應(yīng)答產(chǎn)生的過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。其中促炎細(xì)胞因子〔包括白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因 子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ- 干 擾 素(interferon-γ,IFN-γ) 等〕與抑炎細(xì)胞因子〔包括IL-4、IL-10、IL-13、 轉(zhuǎn) 化 生 長(zhǎng) 因 子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) 等〕的失衡與UC 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[3-4]。施麗薇等[5]在實(shí)驗(yàn)研究中將32 只SD 大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、電針組及手針組（8 只/ 組）。對(duì)各組大鼠分別進(jìn)行不同的處理，然后觀察其結(jié)腸組織樣本中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)Hcy、髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase,MPO) 的水平。研究結(jié)果表明，對(duì)UC 大鼠進(jìn)行電針針刺或手針針刺均可有效地調(diào)節(jié)其體內(nèi)促炎和抑炎細(xì)胞因子的表達(dá)，降低其體內(nèi)MPO和Hcy 的表達(dá)水平，從而可控制其體內(nèi)的炎性反應(yīng)。與手針針刺相比，電針針刺對(duì)部分細(xì)胞因子的調(diào)控效應(yīng)更明顯。荊志強(qiáng)等[6]研究發(fā)現(xiàn)，用溫針灸聯(lián)合中藥灌腸療法治療慢性遠(yuǎn)端結(jié)腸型UC 能有效地改善患者血清TNF-α、IL-8 的水平。但目前臨床上尚不明確用針灸療法調(diào)控細(xì)胞因子的具體作用機(jī)制[7-9]。

1.2 調(diào)節(jié)Th1/Th2 的平衡

Th1 和Th2 均屬于CD4＋T 細(xì)胞亞群。正常情況下，人體內(nèi)Th1 分泌的IFN-γ、TNF-α、IL-2 等Th1 型細(xì)胞因子與Th2 分泌的IL-4、IL-5、IL-13 等Th2 型細(xì)胞因子會(huì)處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，從而共同維持免疫功能的正常。有研究指出，Th1/Th2 的表達(dá)失衡可能與UC 的發(fā)生密切相關(guān)[10-11]。楊夢(mèng)凡等[12]在實(shí)驗(yàn)研究中將數(shù)只SD 大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、UC 組和針灸組。對(duì)各組大鼠分別進(jìn)行不同的處理，然后觀察其腸黏膜中細(xì)胞因子的mRNA 表達(dá)量及血清中細(xì)胞因子的含量。研究結(jié)果顯示，UC 組大鼠腸黏膜中IFN-y 的mRNA 表達(dá)量及血清中IFN-y 的含量均高于對(duì)照組大鼠，其腸黏膜中IL-4、IL-5 的mRNA 表達(dá)量及血清中IL-4、IL-5 的含量均低于對(duì)照組大鼠，P＜0.05。接受針灸后，針灸組大鼠腸黏膜中IFN-y 的mRNA 表達(dá)量及血清中IFN-y 的含量均低于UC 組大鼠，其腸黏膜中IL-4、IL-5的mRNA 表達(dá)量及血清中IL-4、IL-5 的含量均高于UC 組大鼠，P＜0.05。這提示，針灸療法對(duì)UC 動(dòng)物模型腸黏膜的免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)均具有調(diào)節(jié)作用。

1.3 調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路

有研究指出，Toll 樣受體(Toll-like Receptors,TLR) 可識(shí)別病原體相關(guān)分子模式，啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB），從而可起到調(diào)控促炎基因轉(zhuǎn)錄的作用。相關(guān)的研究表明，UC 患者會(huì)出現(xiàn)病灶組織中TLR2、TLR4 表達(dá)上調(diào)的情況，且上調(diào)的幅度與患者病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[13-15]。薛丹等[16]的研究表明，UC患者會(huì)出現(xiàn)血液中TNF-α、IL-6 及腸黏膜中NF-κB/p65蛋白高表達(dá)的情況，為其采用俞募配穴溫針灸法進(jìn)行治療后其上述指標(biāo)的表達(dá)均會(huì)明顯下調(diào)。對(duì)該研究的結(jié)果進(jìn)行分析可知，為UC 患者采用俞募配穴溫針灸法進(jìn)行治療可改善其臨床癥狀，促進(jìn)其結(jié)腸潰瘍病灶的修復(fù)，且治療的作用機(jī)制與減輕其全身及局部病灶處的炎癥反應(yīng)有關(guān)。王姍姍等[17]的研究表明，對(duì)UC 患者進(jìn)行針刺治療可抑制其結(jié)腸黏膜的不典型增生，改善其臨床癥狀，促進(jìn)其腸黏膜的修復(fù)。毛婧等[18]在研究中指出，UC 患者出現(xiàn)的腸功能紊亂主要是由其體內(nèi)IL-6/ 蛋白酪氨酸激酶2/ 信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活蛋白3 信號(hào)通路被激活導(dǎo)致的Th 失衡引起的，有效抑制其體內(nèi)的IL-6/ 蛋白酪氨酸激酶2/ 信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活蛋白3 信號(hào)通路對(duì)改善其預(yù)后具有重要的意義。

1.4 調(diào)節(jié)神經(jīng)- 免疫軸

臨床研究表明，經(jīng)膽堿能抗炎通路、脾交感神經(jīng)抗炎通路、下丘腦- 垂體- 腎上腺軸抗炎通路激活迷走神經(jīng)及副交感神經(jīng)可起到顯著的抗炎作用。Borovikova 等[19]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠的迷走神經(jīng)進(jìn)行電刺激可顯著降低其血清和肝臟組織中TNF-α 的水平。大量的研究表明，迷走神經(jīng)釋放的遞質(zhì)乙酰膽堿能夠顯著抑制細(xì)胞因子的釋放，減輕炎癥反應(yīng)（這種神經(jīng)- 免疫交互作用被稱為膽堿能抗炎通路）。電針治療主要是通過(guò)將針柄連接電脈沖發(fā)生器并對(duì)穴位施加特定的脈沖電刺激來(lái)實(shí)現(xiàn)的，其電脈沖參數(shù)可嚴(yán)格量化，其療效重復(fù)性優(yōu)于手針治療[20-21]。胡森等[22-23]的研究證實(shí)，用電針刺激足三里穴起到的抗炎和肝臟保護(hù)作用主要是通過(guò)膽堿能抗炎通路實(shí)現(xiàn)的。陳正鑫[24]在臨床研究中將30 例脾腎陽(yáng)虛型UC 患者隨機(jī)分為對(duì)照組(n=15) 和治療組(n=15)。為對(duì)照組患者采用美沙拉秦緩釋顆粒劑進(jìn)行治療，在此基礎(chǔ)上為治療組患者采用電針深刺八髎穴療法進(jìn)行治療。研究結(jié)果顯示，治療組患者治療的有效率及治療后其各項(xiàng)臨床指標(biāo)均優(yōu)于對(duì)照組患者，P＜0.05。這表明，用電針深刺八髎穴療法治療脾腎陽(yáng)虛型UC 可取得良好的效果。相關(guān)的研究指出，用電針刺激八髎穴可起到促進(jìn)迷走神經(jīng)釋放乙酰膽堿、抑制交感神經(jīng)興奮等作用。金海峰等[25]在實(shí)驗(yàn)研究中對(duì)UC 大鼠的骶神經(jīng)進(jìn)行了電刺激。研究結(jié)果表明，對(duì)UC 大鼠的骶神經(jīng)進(jìn)行電刺激能提高其迷走神經(jīng)的活性，促進(jìn)其進(jìn)食量和體質(zhì)量的恢復(fù)，減輕其腸道黏膜的損傷，降低其疾病活動(dòng)指數(shù)、血清促炎細(xì)胞因子的水平和腸道黏膜中MPO 的水平。

2 用針灸療法治療UC 時(shí)產(chǎn)生的增強(qiáng)腸黏膜屏障功能的作用

腸黏膜屏障是由機(jī)械屏障、免疫屏障、化學(xué)屏障和生物屏障共同構(gòu)成的“防御系統(tǒng)”，其功能受損是UC 的主要病理改變，在UC 的發(fā)生、發(fā)展中起到重要的作用。

2.1 增強(qiáng)腸黏膜的機(jī)械、化學(xué)屏障功能

腸上皮細(xì)胞緊密連接（tight junctions，TJs）結(jié)構(gòu)在腸黏膜機(jī)械屏障功能的實(shí)現(xiàn)中起到重要的作用。TJs 結(jié)構(gòu)及功能受損會(huì)導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞屏障通透性的增加，從而可介導(dǎo)炎癥性腸病的發(fā)生與發(fā)展[26]。馬喆等[27]在實(shí)驗(yàn)研究中對(duì)UC 大鼠的天樞穴進(jìn)行隔藥灸和溫和灸，然后觀察其結(jié)腸組織TJs 結(jié)構(gòu)中咬合蛋白、連接黏附分子、閉合小環(huán)蛋白表達(dá)量的變化情況。研究結(jié)果顯示，接受隔藥灸后，UC 大鼠結(jié)腸組織TJs 結(jié)構(gòu)中咬合蛋白、連接黏附分子、閉合小環(huán)蛋白的表達(dá)量均較接受隔藥灸前顯著升高，P＜0.05。接受溫和灸后，UC 大鼠結(jié)腸組織TJs 結(jié)構(gòu)中咬合蛋白、閉合小環(huán)蛋白的表達(dá)量均較接受溫和灸前顯著升高，P＜0.05。這表明，對(duì)UC 大鼠的天樞穴進(jìn)行隔藥灸和溫和灸可提高其腸黏膜機(jī)械屏障中TJs 相關(guān)蛋白的表達(dá)量，從而可起到增強(qiáng)其腸黏膜機(jī)械屏障功能的作用。這一作用可能是艾灸抑制UC 患者腸道炎癥反應(yīng)的實(shí)現(xiàn)途徑之一。腸道杯狀細(xì)胞分泌的黏蛋白(mucin，MUC) 主要由MUC2 基因編碼，其主要附著于腸黏膜表面的黏液層，可起到抵抗細(xì)菌侵襲、維持腸黏膜化學(xué)屏障功能的作用。馬喆等的研究表明，缺乏MUC2 的大鼠通常存在明顯的結(jié)腸炎癥反應(yīng)，且其缺乏MUC2 的程度與其結(jié)腸炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。接受隔藥灸和溫和灸后，UC 大鼠會(huì)出現(xiàn)結(jié)腸組織病理學(xué)評(píng)分顯著降低，結(jié)腸組織中MUC2 蛋白表達(dá)量顯著升高的情況。這表明，對(duì)UC 大鼠的天樞穴進(jìn)行隔藥灸和溫和灸可提高其結(jié)腸組織中MUC2 蛋白的表達(dá)量，從而可起到增強(qiáng)其腸黏膜化學(xué)屏障功能的作用。這一作用機(jī)制可能是進(jìn)行艾灸治療抑制UC 患者腸道炎癥反應(yīng)的實(shí)現(xiàn)途徑之一。

2.2 增強(qiáng)腸黏膜的免疫屏障功能

腸黏膜免疫屏障主要由腸道相關(guān)淋巴組織和分泌型免疫球蛋白構(gòu)成，其可識(shí)別腸道內(nèi)的菌群及抗原并作出相應(yīng)的反應(yīng)，從而可維持腸道及全身的免疫穩(wěn)態(tài)[28]。臨床研究表明，CD4＋腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(intraepithelial lymphocyte，IEL) 是腸黏膜免疫的效應(yīng)部位，其在維持腸道免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要的作用。相關(guān)的研究指出，異常的CD4＋I(xiàn)EL 會(huì)加速炎癥性腸病的進(jìn)展[29]。孫斌[30]的研究表明，用針刺聯(lián)合常規(guī)西藥療法治療慢性肝郁脾虛型UC 可有效地提高患者血清CD4＋的表達(dá)水平，改善其免疫功能，促進(jìn)其康復(fù)。

2.3 增強(qiáng)腸黏膜的生物屏障功能

腸道微生物穩(wěn)態(tài)是對(duì)抗病原體的重要屏障。有研究指出，腸道菌群失衡是誘發(fā)炎癥性腸病的重要因素[31-32]。采用16SrRNA 高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)UC 小鼠與正常小鼠的腸道菌群可以發(fā)現(xiàn)，正常小鼠腸道菌群的多樣性明顯優(yōu)于UC小鼠，且UC 小鼠個(gè)體間腸道菌群多樣性的差異較大。UC小鼠腸道菌群的分布情況也明顯區(qū)別于正常小鼠，其腸道中雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬等較少，腸球菌屬、韋榮氏球菌屬等較多。相關(guān)的研究證實(shí)，UC 小鼠腸道中雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬的相對(duì)豐度明顯低于正常小鼠，其腸道中腸球菌屬、韋榮氏球菌屬的相對(duì)豐度明顯高于正常小鼠[33]。新近的研究表明，針灸對(duì)腸道菌群具有調(diào)控作用。謝文松等[34]在臨床研究中將130 例UC 患者按隨機(jī)數(shù)表法分為觀察組和對(duì)照組（65 例/ 組）。對(duì)兩組患者均進(jìn)行常規(guī)治療。在此基礎(chǔ)上，為對(duì)照組患者采用益陽(yáng)愈潰湯進(jìn)行治療，為觀察組患者采用益陽(yáng)愈潰湯聯(lián)合針刺療法進(jìn)行治療。研究結(jié)果顯示，治療后，兩組患者腸道中雙歧桿菌、乳酸桿菌的相對(duì)豐度均較治療前明顯提高，且觀察組患者腸道中雙歧桿菌、乳酸桿菌的相對(duì)豐度均高于對(duì)照組患者，P＜0.05。這提示，對(duì)UC 患者進(jìn)行針刺治療有助于恢復(fù)其腸道微生物穩(wěn)態(tài)。侯天舒等[35]的研究表明，UC 大鼠腸道菌群的多樣性指數(shù)較低，對(duì)其進(jìn)行電針治療能提高其腸道菌群的多樣性指數(shù)及其腸道菌群中乳酸桿菌屬、毛螺菌屬的含量。這一作用機(jī)制可能是進(jìn)行電針治療減輕UC 患者腸道炎癥反應(yīng)的實(shí)現(xiàn)途徑之一。

3 總結(jié)與展望

UC 在臨床上較為常見(jiàn)。此病屬于中醫(yī)理論中“泄瀉”、“腸澼”、“久痢”、“休息痢”等范疇。近年來(lái)，臨床上對(duì)用針灸療法治療UC 相關(guān)作用機(jī)制的研究取得了一定的進(jìn)展。但相關(guān)研究仍普遍存在以下問(wèn)題：1）缺乏對(duì)免疫分子網(wǎng)絡(luò)間交互效應(yīng)的深入探討；2）臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)不夠完善，嚴(yán)謹(jǐn)性不足；3）研究對(duì)象的納入、排除標(biāo)準(zhǔn)不合理，且缺乏對(duì)其個(gè)體差異、病變部位、疾病活動(dòng)性等方面的全面評(píng)估。這些問(wèn)題會(huì)嚴(yán)重影響研究結(jié)果的可重復(fù)性。筆者認(rèn)為，隨著相關(guān)研究的不斷深入，針灸療法在治療UC 方面的應(yīng)用前景將越來(lái)越廣闊。