■彭祖想 嚴(yán) 林 衛(wèi)力博 翟浩杰 高 欣 王 偉，2 任同軍 韓雨哲，2*

（1.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，遼寧大連 116023；2.大連海洋大學(xué)，遼寧省北方魚類應(yīng)用生物學(xué)與增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連 116023）

魚粉因營養(yǎng)價(jià)值高、營養(yǎng)比例均衡成為了一種優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物蛋白，在我國水產(chǎn)飼料行業(yè)被廣泛應(yīng)用。近年來我國水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展迅速，巨大的需求導(dǎo)致魚粉資源短缺和價(jià)格上漲，這成為了水產(chǎn)行業(yè)發(fā)展的制約因素。目前我國北方地區(qū)的一些飼料廠普遍使用國產(chǎn)魚粉作為大宗淡水魚飼料原料，但國產(chǎn)魚粉也存在著以次充好、以假亂真的現(xiàn)象，質(zhì)量不穩(wěn)定。劣質(zhì)的國產(chǎn)魚粉中通常會(huì)被摻入鋸木粉和稻殼粉以增加其疏松度，摻入血粉、羽毛粉甚至尿素以增加粗蛋白含量[1]，這對(duì)于水產(chǎn)養(yǎng)殖危害極大，因此尋找一種替代魚粉的優(yōu)質(zhì)蛋白成為了要迫切解決的難題。家禽副產(chǎn)品粉（poultry by-product meal，PBM）是家禽屠宰之后的下腳料，經(jīng)提煉油脂和粉碎后得到的粉狀產(chǎn)品，在營養(yǎng)組成上與魚粉相似且價(jià)格低廉，與植物性蛋白源相比不含抗?fàn)I養(yǎng)因子，因此被認(rèn)作是一種潛在的魚粉替代源[2]。國內(nèi)外對(duì)軍曹魚（Rachycentron canadum）[3-4]、凡納濱對(duì)蝦（Litopenarus vannamei）[5]和尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）[6]等水產(chǎn)動(dòng)物的研究表明PBM可在一定程度上替代魚粉。雞腸粉是PBM的一種，是以新鮮雞腸為原料，經(jīng)沖洗、蒸煮、噴霧干燥和粉碎等工序加工而成的新型優(yōu)質(zhì)飼料蛋白源。優(yōu)質(zhì)的雞腸粉粗蛋白和粗脂肪含量與魚粉接近，部分氨基酸含量甚至高于魚粉，從營養(yǎng)成分及氨基酸組成分析，雞腸粉作為一種飼料原料可以替代一定量的魚粉[7]。

鯉（Cyprinus carpio），是我國重要的淡水經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種，據(jù)中國漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒統(tǒng)計(jì)2019年全國鯉養(yǎng)殖產(chǎn)量為288.5萬噸，是全國淡水魚養(yǎng)殖產(chǎn)量的11.32%。作為大宗淡水魚主要品種，鯉具有苗種容易獲得、抗病力強(qiáng)、食性廣、生長(zhǎng)快、耐低氧、產(chǎn)量高、產(chǎn)品運(yùn)輸方便等優(yōu)勢(shì)，在我國水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中具有一定的發(fā)展前景。

本試驗(yàn)的目的是基于鯉營養(yǎng)研究基礎(chǔ)，探究雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉生長(zhǎng)、消化、免疫、抗氧化和血清生化指標(biāo)的影響，探究鯉飼料中雞腸粉最佳魚粉替代比例，以期為雞腸粉在淡水魚飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在大連海洋大學(xué)遼寧省北方魚類生物學(xué)與增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室循環(huán)水池內(nèi)進(jìn)行，試驗(yàn)所用的鯉購于遼寧省丹東市景波養(yǎng)殖場(chǎng)。選取當(dāng)年繁殖的初始體重為66 g左右的鯉200尾，于4.3 m×1.5 m×1.2 m的水泥池中暫養(yǎng)1周以適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境，暫養(yǎng)期間投喂對(duì)照組飼料。暫養(yǎng)后選取體重相近、活力較好、體表無傷的鯉150尾，隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)平行，每個(gè)平行10尾，置于15個(gè)1.3 m×0.8 m×0.7 m的聚乙烯網(wǎng)箱中，水體覆蓋網(wǎng)箱80%以上，以曝氣24 h以上的自來水作為試驗(yàn)水體，試驗(yàn)期間采用氣石24 h充氣，每日08：00和16：00投喂2次，表觀飽食，每日吸底1次、換水1次，換水量約為1/2，試驗(yàn)期間水溫（18±1）℃，溶氧為（6±0.5）mg/L，pH為（7.1±0.5），養(yǎng)殖周期為6周。

1.2 試驗(yàn)飼料

雞腸粉由遼寧省鞍山裕豐飼料有限公司提供，粗蛋白65.47%，粗脂肪14.80%。魚粉為本地飼料廠大宗淡水魚飼料普遍使用的國產(chǎn)魚粉，粗蛋白52.20%，粗脂肪11.60%。試驗(yàn)飼料原料購自于大連貝西商貿(mào)有限公司。試驗(yàn)飼料配方見表1，以魚粉、雞腸粉、豆粕等為主要蛋白源，以豆油為主要脂肪源配制5組等氮等脂飼料，標(biāo)記為D1、D2、D3、D4、D5。對(duì)照組（D1組）飼料魚粉含量為4%，5組飼料替代魚粉比例分別為0、25%、50%、75%、100%。飼料原料過80目篩，逐級(jí)混勻，混合后的粉狀飼料經(jīng)制粒機(jī)制成2 mm的顆粒飼料，放入烘箱中42℃烘干至水分含量為10%，于-20℃冰箱中保存。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ)，%)

1.3 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

取樣前，試驗(yàn)魚停食24 h，放入冰水中冷休克，稱重測(cè)量體長(zhǎng)、體重，剝離內(nèi)臟和腸系膜脂肪并稱重，計(jì)算其生長(zhǎng)指標(biāo)。稱重后，于冰上進(jìn)行無菌解剖，每個(gè)平行6尾魚全部取肝臟、腸道及背部肌肉，同組混樣裝管，樣品于-80℃保存待測(cè)。每個(gè)平行取4尾魚用注射器靜脈采血，將采集到的血液樣本放于4℃冰箱中靜置24 h，于5 000 r/min離心10 min，取上清液保存于-80℃?zhèn)溆?，用于血清生化指?biāo)分析。腸道和肝臟樣品分別注入質(zhì)量體積比1∶9的生理鹽水，經(jīng)4℃、4 000 r/min、10 min高速離心后，取上清液，4℃保存，用于測(cè)定腸道消化酶活性、肝臟抗氧化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的測(cè)定。

特定生長(zhǎng)率（SGR，%/d）=100×（ln 終末體質(zhì)量-ln初始體質(zhì)量）/42

增重率（WGR，%）=100×（平均終末體質(zhì)量-平均初始體質(zhì)量）/平均初始體質(zhì)量

飼料系數(shù)（FCR）=平均投餌量/（終末平均體質(zhì)量-初始平均體質(zhì)量）

肥滿度（CF，g/cm3）=100×終末體質(zhì)量/體長(zhǎng)3

成活率（SR，%）=100×（終末個(gè)體數(shù)/初始個(gè)體數(shù)）

腸脂比（ISI，%）=100×腸脂質(zhì)量/體質(zhì)量

臟體比（VSI，%）=100×內(nèi)臟團(tuán)質(zhì)量/體質(zhì)量

飼料常規(guī)營養(yǎng)成分的測(cè)定：飼料中水分含量采用105℃烘箱烘干至恒重法測(cè)定（GB/T 6435—2006），粗蛋白含量采用凱氏定氮法測(cè)定（GB/T 6432—2018），粗脂肪含量采用索氏抽提法測(cè)定（GB/T 6433—2006），粗灰分采用馬弗爐550℃高溫灼燒法測(cè)定（GB/T 6438—2007）。

腸道消化酶活性的測(cè)定：胃蛋白酶（Pepsin，PEP）、α-淀粉酶（α-amylase，α-AMS）和脂肪酶（lipase，LPS）均采用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

肝臟抗氧化指標(biāo)的測(cè)定：總超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、過氧化氫酶（catalase from micrococcus lysodeikticu，CAT）活性及丙二醛（malond-ialdehyde，MDA）含量，均采用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

非特異性免疫指標(biāo)的測(cè)定：肝臟酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）和溶菌酶活性（lysozyme，LZM）均采用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

血清生化指標(biāo)的測(cè)定：總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，ALB）、總膽固醇（total cho-lesterol，T-CHO）、三酰甘油（triglyceride，TG）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（glutamic-oxalacetic transaminase，GOT）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（glutamic-pyruvic transaminase，GPT）均采用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±standard error，SE）”表示，用SPSS 25.0軟件（IBM，USA）進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA）。并采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較來分析各處理組間的顯著性，設(shè)置P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉生長(zhǎng)性能的影響（見表2）

由表2可知，鯉的成活率在各組間均無顯著差異（P＞0.05）。隨雞腸粉替代魚粉比例的升高，增重率和特定生長(zhǎng)率呈先上升后下降的趨勢(shì)，且在D4組時(shí)，鯉的增重率和特定生長(zhǎng)率均達(dá)到峰值，并顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。各試驗(yàn)組飼料系數(shù)均低于對(duì)照組，隨著替代比例的升高，飼料系數(shù)逐漸降低且均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。鯉的肥滿度、臟體比及腸脂比在各組間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉生長(zhǎng)性能的影響

2.2 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉腸道消化酶活性的影響（見表3）

由表3可知，與對(duì)照組相比，雞腸粉替代魚粉影響PEP、α-AMS和LPS活性，隨著替代比例的增加PEP、α-AMS和LPS活性均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，并在D4組時(shí)達(dá)到峰值，D2組LPS活性及D5組α-AMS和LPS活性與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表3 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉腸道消化酶活性的影響

2.3 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉肝臟抗氧化能力的影響（見表4）

由表4可知，鯉肝臟SOD活性在D4組時(shí)達(dá)到峰值、CAT活性在D3組時(shí)達(dá)到峰值，且與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比雞腸粉替代魚粉后對(duì)MDA水平無顯著影響（P＞0.05），D5組SOD活性顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）、CAT活性與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表4 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉肝臟抗氧化能力的影響

2.4 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響（見表5）

由表5可知，與對(duì)照組相比，鯉肝臟ACP、AKP和LZM活性在D4組時(shí)達(dá)到峰值（P＜0.05）。D2組、D3組和D5組ACP活性與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05），D2組和D5組AKP和LZM活性與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表5 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響

2.5 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉血清生化指標(biāo)的影響（見表6）

由表6可知，鯉血清總蛋白、白蛋白、總膽固醇和三酯甘油水平在各組間無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，雞腸粉替代魚粉增加了鯉血清中GOT和GPT活性，并在D5組達(dá)到峰值（P＜0.05）。

表6 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉生長(zhǎng)的影響

PBM是家禽屠宰之后的下腳料經(jīng)提煉油脂和粉碎后得到的粉狀產(chǎn)品，其蛋白質(zhì)含量、氨基酸組成與魚粉類似，是一種很有潛力的動(dòng)物蛋白[8]。雞腸粉屬于PBM的一種，使用PBM替代魚粉的相關(guān)研究在國內(nèi)外都有在進(jìn)行，由于受到試驗(yàn)魚種類、禽類副產(chǎn)品原料組成和加工工藝的影響，PBM替代魚粉對(duì)魚類生長(zhǎng)性能的影響結(jié)果往往不同。Emre等[9]研究發(fā)現(xiàn)在飼料中添加PBM后，鏡鯉（Cyprinus carpio）的生長(zhǎng)會(huì)顯著下降，飼喂全魚粉飼料鏡鯉體重增長(zhǎng)顯著高于飼喂PBM替代魚粉比例為33%、67%和100%的試驗(yàn)組。但也有研究發(fā)現(xiàn)投喂雞腸粉部分替代魚粉的飼料能夠顯著提高魚類的增重率、飼料效率和顯著降低飼料系數(shù)，并且在雞腸粉替代魚粉比例為75%時(shí)，草魚（Ctenopharyngodon idella）的生長(zhǎng)性能體現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì)，替代比例為100%時(shí)不影響生長(zhǎng)[7]。與后者相似，在本試驗(yàn)中，雞腸粉替代魚粉比例為25%、50%、75%和100%時(shí)均能夠顯著提高增重率、特定生長(zhǎng)率和降低飼料系數(shù)，并且在替代比例為75%時(shí)鯉增重率和特定生長(zhǎng)率達(dá)到峰值，替代比例達(dá)到100%時(shí)仍具有顯著性。在一些相似的研究中，隨著PBM替代魚粉比例的升高，鯰（Clarias batrachus）[10]、駝背鱸（Cromileptes altivelis）[11]、紅鼓魚（Sciaenops ocellatus）[12]的生長(zhǎng)性能均顯著升高并且在替代比例達(dá)到100%均對(duì)生長(zhǎng)無負(fù)面作用，點(diǎn)帶石斑魚（Epinephelus coioides）[13]和銀鯽（Carassius auratus gibelio）[14]在PBM替代魚粉比例達(dá)到60%時(shí)均能顯著生長(zhǎng)。一些研究人員使用高質(zhì)量的PBM替代對(duì)蝦和魚飼料中50%～100%的魚粉，發(fā)現(xiàn)不會(huì)影響其生長(zhǎng)性能和魚體健康[15-17]。這些研究取得了與本試驗(yàn)相一致的結(jié)果。但李宗升[18]研究發(fā)現(xiàn)雞肉粉替代魚粉比例超過60%時(shí)大菱鲆（Scophthal-mus maximus）增重率顯著降低，替代水平達(dá)到80%時(shí)終末體質(zhì)量、特定生長(zhǎng)率均顯著低于對(duì)照組，這與本試驗(yàn)結(jié)果存在差異。這可能因?yàn)镻BM營養(yǎng)成分存在差異及不同魚類對(duì)PBM消化和適應(yīng)不同。PBM替代魚粉的主要短板是限制性氨基酸的缺乏和適口性差，氨基酸的不平衡和高比例的魚粉替代導(dǎo)致的適口性降低都是魚類生長(zhǎng)性能降低的主要原因[19]。由于劣質(zhì)國產(chǎn)魚粉普遍存在著摻假問題，而大宗淡水魚飼料又大量使用國產(chǎn)魚粉作為原料，這就不可避免地會(huì)出現(xiàn)飼料質(zhì)量安全問題。使用摻假魚粉做成的飼料不僅適口性差影響魚類生長(zhǎng)，還會(huì)導(dǎo)致魚類體質(zhì)變差，飼料系數(shù)增大等[20]。在本試驗(yàn)結(jié)果中飼料系數(shù)較高的原因可能有兩個(gè)：①魚粉選用的是當(dāng)?shù)仫暳蠌S普遍使用的廉價(jià)國產(chǎn)魚粉，可能存在摻假和質(zhì)量不穩(wěn)定等問題，因此試驗(yàn)結(jié)果中對(duì)照組飼料系數(shù)顯著高于其他各組；②試驗(yàn)采用網(wǎng)箱養(yǎng)殖，投喂過程中一些飼料未被鯉及時(shí)攝食掉落池底也會(huì)影響飼料系數(shù)。各替代組鯉增重率顯著高于對(duì)照組原因很可能是由于劣質(zhì)摻假的國產(chǎn)魚粉抑制了對(duì)照組鯉的生長(zhǎng)，而替代組雞腸粉比例逐漸升高促進(jìn)了鯉的生長(zhǎng)，并且各組生長(zhǎng)緩慢，這可能都是由于使用了劣質(zhì)國產(chǎn)魚粉的原因。這也間接說明了雞腸粉替代質(zhì)量不穩(wěn)定的國產(chǎn)魚粉的必要性，同時(shí)使用優(yōu)質(zhì)的雞腸粉替代質(zhì)量不穩(wěn)定的國產(chǎn)魚粉也是本試驗(yàn)的目的之一。在本試驗(yàn)條件下，以生長(zhǎng)性能為評(píng)價(jià)指標(biāo)，鯉飼料中雞腸粉可部分或全部替代魚粉。

3.2 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉腸消化酶活性的影響

消化酶是由消化器官和消化系統(tǒng)分泌的一種具有高度的催化性和專一性的酶類，能夠促進(jìn)機(jī)體對(duì)食物的消化和營養(yǎng)吸收[21]。曹曉莉等[22]使用雞肉粉替代黃鱔（Monopterus albus）飼料中的魚粉，發(fā)現(xiàn)45%替代組的脂肪酶活性、淀粉酶活性和胰蛋白酶活性均最高，表明雞肉粉適當(dāng)替代魚粉可促進(jìn)黃鱔對(duì)蛋白質(zhì)、淀粉和脂肪的利用。但李宗升[18]發(fā)現(xiàn)雞肉粉替代魚粉對(duì)大菱鲆幼魚肝胰臟蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性影響不顯著，這可能也是因?yàn)镻BM營養(yǎng)成分存在差異及不同魚類對(duì)PBM消化和適應(yīng)不同。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，適量的雞腸粉替代魚粉后能夠顯著提高鯉胃蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶活性，并呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，這與羅嘉翔等[23]對(duì)黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）幼魚胃蛋白酶活性和前腸淀粉酶活性研究結(jié)果相似。賈高旺等[24]研究表明，隨著家禽副產(chǎn)品酶解肽部分替代魚粉比例的增加，大菱鲆胃蛋白酶和胰蛋白酶活性先升高后降低，這與本研究結(jié)果相似，但家禽副產(chǎn)品酶解肽部分替代魚粉對(duì)大菱鲆脂肪酶活性影響不顯著，這與本研究結(jié)果不同，可能是由于飼料配方、試驗(yàn)魚種類、食性和生活的鹽度環(huán)境不同所導(dǎo)致的[16]。

3.3 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉肝臟抗氧化能力的影響

機(jī)體在正常代謝時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的氧化自由基，這些自由基會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損傷，誘發(fā)多種慢性疾病，但機(jī)體自身也存在抗氧化酶防御系統(tǒng)維持氧化自由基產(chǎn)生和清除?？寡趸阜烙到y(tǒng)主要包括SOD、CAT和GSH等，機(jī)體組織損傷程度就是自由基與抗氧化保護(hù)防御平衡的結(jié)果[25]。SOD和CAT是衡量機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)，MDA是脂質(zhì)過氧化作用的分解產(chǎn)物，可以間接反映細(xì)胞損傷程度[26]。在本研究中隨著雞腸粉替代魚粉比例的增加，鯉肝臟中的SOD和CAT活性先升高后下降，MDA水平無顯著影響，D4組SOD活性和D3組CAT活性達(dá)到峰值，這表明雞腸粉替代魚粉提高了鯉的抗氧化能力。這與賈倩[27]的研究結(jié)果相似，隨著禽肉骨粉替代魚粉比例增加，大菱鲆肝臟SOD活性和CAT活性均呈上升趨勢(shì)，在替代比例為50%時(shí)達(dá)到峰值，與對(duì)照組差異顯著。但PBM替代魚粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化性的研究結(jié)果并不一致，黃文慶等[28]發(fā)現(xiàn)不同比例的PBM替代魚粉對(duì)草魚TSOD活性、MDA水平和T-AOC無顯著影響。Zhou等[3]的研究表明不同比例的PBM并不會(huì)對(duì)軍曹魚幼魚肝臟SOD、CAT、GPX和GST活性產(chǎn)生顯著影響。但易新文等[29]發(fā)現(xiàn)隨著PBM替代魚粉比例的增加卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）肝臟中SOD和CAT活性呈下降趨勢(shì)，降低了卵形鯧鲹的抗氧化能力。PBM替代魚粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化性結(jié)果的差異可能是飼料營養(yǎng)成分的不同所導(dǎo)致的，有研究表明高蛋白和高脂肪飼料更有利于提高水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化性[30]。

3.4 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉非特異性免疫指標(biāo)的影響

魚類的非特異性免疫在魚類受到病原入侵時(shí)發(fā)揮著主要作用，AKP、ACP和LZM就是其中重要的抗菌蛋白。LZM是免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗菌酶，能夠溶解微生物細(xì)胞壁消滅病原微生物，可反映魚類非特異性免疫狀態(tài)[31]。ACP參與吞噬溶酶體的組成，是巨噬細(xì)胞溶酶體酶的標(biāo)志酶，AKP參與鈣磷的吸收，二者均在魚類免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用[32-33]。不同品質(zhì)的PBM替代魚粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物非特異性免疫結(jié)果也有差異，賈倩[27]研究表明不同比例禽肉骨粉替代魚粉對(duì)大菱鲆LZM活性和ACP活性影響不顯著，雖然沒有增加大菱鲆非特異性免疫能力，但也不會(huì)對(duì)大菱鲆免疫系統(tǒng)造成損傷。路晶晶等[34]發(fā)現(xiàn)隨著家禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉水平的增加，凡納濱對(duì)蝦血漿中的LZM活性顯著升高，呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，禽副產(chǎn)物酶解肽替代魚粉能夠增加凡納濱對(duì)蝦的非特異性免疫能力。Dawood等[35]發(fā)現(xiàn)在飼料添加5%、10%和15%經(jīng)發(fā)酵后的PBM能夠顯著提高鯉LZM活性，同樣在尼羅羅非魚日糧中添加10%和20%的經(jīng)發(fā)酵后的PBM也能夠顯著提高魚體LZM活性和血清中IgM水平[36]。與前人研究結(jié)果相似，在本研究中隨著雞腸粉替代魚粉比例的增加，鯉ACP、AKP和LZM活性有不同程度的影響，并呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，D4組ACP、AKP和LZM活性均顯著高于對(duì)照組，說明適量的雞腸粉替代魚粉可以增強(qiáng)鯉非特異性免疫能力。

3.5 雞腸粉替代魚粉對(duì)鯉血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可以反映組織細(xì)胞通透性和機(jī)體生理代謝狀態(tài)，在一定程度上可以作為評(píng)價(jià)動(dòng)物健康狀態(tài)的指標(biāo)之一。血清總蛋白是在肝臟合成的，他是白蛋白和球蛋白的總和，反映了機(jī)體蛋白質(zhì)代謝和肝臟功能狀態(tài)[37]。三酰甘油和總膽固醇反映了機(jī)體脂肪代謝狀態(tài)，脂類運(yùn)輸受到阻礙會(huì)導(dǎo)致血清中總膽固醇含量升高[34]。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，各替代組總蛋白、白蛋白、三酯甘油和總膽固醇含量差異不顯著，說明雞腸粉替代魚粉不會(huì)對(duì)鯉蛋白質(zhì)代謝和脂肪代謝產(chǎn)生有害影響，這也與前人對(duì)黃顙魚[23]、金鯧（Trachinotus ovatus）[38]和黃鱔[22]的研究結(jié)果相似。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝臟內(nèi)參與氨基酸代謝的轉(zhuǎn)氨酶，正常情況下血清中這兩種轉(zhuǎn)氨酶的活性較低，當(dāng)肝臟受到損傷時(shí)才會(huì)釋放到血液之中導(dǎo)致活性升高，因此可通過這兩種轉(zhuǎn)氨酶活性判斷肝臟功能情況[39]。在本試驗(yàn)中，隨著雞腸粉替代魚粉比例的升高鯉血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性逐漸增強(qiáng)，當(dāng)雞腸粉替代魚粉比例≥75%時(shí)，谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著高于對(duì)照組，表明鯉肝臟可能受到了損傷。但李宗升[18]認(rèn)為隨著雞肉粉替代魚粉比例的增加，大菱鲆血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著增加的原因也可能是肝臟蛋白質(zhì)代謝活動(dòng)增強(qiáng)以適應(yīng)高含量的雞肉粉飼料。結(jié)合在金鯧[38]的研究結(jié)果，當(dāng)雞肉粉替代魚粉比例≥80%時(shí)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著增強(qiáng)，金鯧肝細(xì)胞可能受到一定損傷，也不排除在高比例雞腸粉替代魚粉時(shí)鯉肝臟出現(xiàn)損傷情況。

4 結(jié)論

綜上所述，對(duì)照魚粉含量為4%的鯉飼料，雞腸粉能夠部分或全部替代魚粉，不會(huì)對(duì)鯉生長(zhǎng)、消化和免疫等指標(biāo)造成負(fù)面影響，但當(dāng)雞腸粉替代魚粉比例≥75%時(shí)可能會(huì)引起鯉肝臟代謝異常。