邢菊玲 劉芬 馮萌 郝夢嬌 黃天來 周欣欣 湯湘江

摘 要 目的：研究桑根酮C對游離脂肪酸誘導(dǎo)的人肝癌HepG2細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的改善作用。方法：將HepG2細(xì)胞分為對照組、模型組、非諾貝特組（10 μmol/L）和桑根酮C低、中、高濃度組（2、4、8 μmol/L），除對照組外，其余各組細(xì)胞加入1 mmol/L游離脂肪酸以誘導(dǎo)建立脂質(zhì)蓄積模型，且各給藥組加入相應(yīng)含藥培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。采用油紅O染色法觀察細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積情況，并測定脂質(zhì)水平和三酰甘油（TG）含量;采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法和Western blot法檢測細(xì)胞中過氧化物酶體增殖物激活受體α （PPARα）、肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1（CPT-1）、成脂甾醇元件結(jié)合蛋白固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助激活物1α（PGC-1α）的mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：與對照組比較，模型組細(xì)胞核明顯萎縮、體積變小，脂滴數(shù)明顯增加;細(xì)胞中脂質(zhì)水平、TG含量以及SREBP-1c、FAS 的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α 的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P<0.01）。與模型組比較，桑根酮C各濃度組細(xì)胞核萎縮不明顯、體積大小正常，脂滴數(shù)明顯減少;細(xì)胞中脂質(zhì)水平、TG含量以及上述PPARα通路相關(guān)基因的mRNA和蛋白（桑根酮C低濃度組的SREBP-1c蛋白除外）表達(dá)水平均顯著逆轉(zhuǎn)（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：桑根酮C可改善HepG2細(xì)胞的脂質(zhì)蓄積;其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)PPARα信號通路、提高細(xì)胞脂質(zhì)氧化能力、抑制脂質(zhì)合成有關(guān)。

關(guān)鍵詞 桑根酮C;HepG2細(xì)胞;脂質(zhì)蓄積;PPARα信號通路

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the improvement effects of sanggenone C on lipid accumulation in human liver cancer HepG2 cells induced by free fatty acid （FFA）. METHODS： HepG2 cells were divided into control group， model group， fenofibrate group （10 μmol/L）， sangerone C low， medium and high concentration groups （2， 4， 8 μmol/L）. Except for control group， other groups were treated with 1 mmol/L FFA to induce lipid accumulation model， and administration groups were cultured with relevant medium containing drugs. The lipid accumulation was observed by oil red O staining， and lipid level and triglyceride （TG） content were also determined. Real-time PCR and Western blot assay were adopted to detect the mRNA and protein expression of PPARα， CPT-1， SREBP-1c， FAS， SIRT1 and PGC-1α in HepG2 cells. RESULTS： Compared with control group， the nucleus was atrophied significantly and the volume became smaller， and the number of lipid droplets was significantly increased; the level of lipid， TG content， mRNA and protein expression of SREBP-1c and FAS were significantly increased （P<0.05 or P<0.01）， mRNA and protein expression of PPARα， CPT-1， SIRT1 and PGC-1α were decreased significantly （P<0.01）. Compared with model group， no obvious nucleus atrophy and normal volume were observed in sangerone C groups， and the number of lipid droplets was significantly reduced; the levels of lipid， TG content， mRNA and protein expression of PPARα pathway related genes （except for SREBP-1c protein in saggenone C low concentration group） were significantly reversed （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： Sangenone C can significantly improve the lipid accumulation of HepG2 cells， and its mechanism may associated with regulating PPARα signaling pathway， improving cell lipid oxidation ability and inhibiting lipid synthesis.

KEYWORDS? ?Sanggenone C;HepG2 cells;Lipid accumu- lation; PPARα signaling pathway

非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）是一種以外周脂肪分解增加、游離脂肪酸攝取增多、線粒體β-氧化減少和脂質(zhì)在肝臟蓄積為主要特征的肝臟病變[1]。多項(xiàng)研究表明，NAFLD與胰島素抵抗、肥胖、高脂血癥、2型糖尿病和血脂異常等代謝性疾病等相關(guān)[2-3]，是諸多疾病的主要誘因。在我國，成年人的NAFLD患病率高達(dá)15%～30%，已取代乙型病毒性肝炎成為第一大慢性肝病[4]。目前，治療NAFLD的藥物主要包括抗氧化劑、他汀類藥物、調(diào)脂類藥物等[5]，但他汀類藥物會導(dǎo)致肌肉毒性、肝毒性和糖尿病等不良反應(yīng)[6]?，F(xiàn)代研究表明，中藥治療NAFLD的療效較好、毒副作用小，且中藥中所含的黃酮類、苷類和生物堿類等成分可通過抗氧化、抗炎、抗纖維化、改善肝臟脂肪變性等多種途徑來預(yù)防和治療NAFLD[7]。

桑白皮是?？浦参锷arus alba L.的干燥根皮，具有抗炎、抗癌、抗腫瘤、抗病毒、降血壓、降血糖、降血脂、鎮(zhèn)咳平喘和利尿等作用[8-9]，是治療前列腺癌、高血壓、高血脂和糖尿病等疾病的常用中藥[10-11]。其中，桑根酮C（Sanggenone C）是桑白皮中的黃酮類有效成分之一，其化學(xué)結(jié)構(gòu)明確（見圖1），是桑白皮藥材的質(zhì)量控制指標(biāo)[12]。

過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）信號通路在NAFLD的發(fā)病過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，能有效控制脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)與氧化、脂質(zhì)合成和分解等代謝過程，維持機(jī)體脂質(zhì)代謝平衡[13]。PPARα表達(dá)上調(diào)會促進(jìn)肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1（CPT-1）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助激活物1α（PGC-1α）等的表達(dá);其中，CPT-1位于線粒體外膜上，是長鏈脂肪酸氧化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶和限速酶，其水平降低會直接加劇細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積;PGC-1α能與PPARα協(xié)同作用，促進(jìn)線粒體脂肪酸氧化、增加機(jī)體能量消耗，最終達(dá)到降脂的效果[14]。此外，在脂質(zhì)合成過程中，PPARα還能促進(jìn)成脂甾醇元件結(jié)合蛋白固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（SREBP-1c）的轉(zhuǎn)錄過程，從而抑制脂肪酸合成基因脂肪酸合成酶（FAS）的表達(dá)，進(jìn)而抑制肝臟中三酰甘油（TG）和脂肪酸的合成[15]。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）在 NAFLD的脂質(zhì)代謝過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，其可激活PGC-1α的去乙酰化，從而間接誘導(dǎo)脂肪酸的β-氧化，進(jìn)而降低肝臟中TG水平[16]。目前，桑根酮C是否可通過PPARα信號通路發(fā)揮治療NAFLD的作用，尚不明確。

基于此，本課題組選擇常用于研究NAFLD的人肝癌HepG2細(xì)胞[17]，并以游離脂肪酸誘導(dǎo)其發(fā)生脂質(zhì)蓄積，進(jìn)而探討桑根酮C調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用及可能機(jī)制，以期為桑根酮C治療NAFLD提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有MEGAFMGE2.0R型低溫高速離心機(jī)（德國Hermle公司），TissueLyser LT型中低通量組織研磨器（德國Qiagen公司），VCX750型超聲波細(xì)胞破碎儀（美國SONICS公司），164-5056型蛋白電泳儀及轉(zhuǎn)膜儀、SmartSpecTM Plus型核酸蛋白測定儀、CFX96TM型實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增儀（美國 Bio-Rad公司），BX53型熒光倒置顯微鏡（日本Olympus公司），RT-2100C型酶標(biāo)儀（美國Thermo Fisher Scientific公司），Tanon 2500R型全自動化學(xué)發(fā)光成像儀（上海天能生命科學(xué)有限公司）。

1.2 主要藥品與試劑

本研究所用主要藥品與試劑有桑根酮C（成都克洛瑪生物科技有限公司，批號CHB190106，純度98%），非諾貝特（美國APExBIO公司，批號B1943，純度98%），油酸、棕櫚酸（上海源葉生物科技有限公司，批號分別為S30037、S30008），牛血清白蛋白（BSA，廣州威佳科技有限公司，批號0219989625），油紅O染色試劑盒、MTT試劑（北京索萊寶科技有限公司，批號分別為G1262、M8180），DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清（美國Gibco公司，批號分別為1972985、1803122），TG試劑盒（南京建成生物科技有限公司，批號A110-1-1），TRIzon總RNA提取試劑、BCA蛋白定量試劑盒、RIPA裂解液（北京康為世紀(jì)生物科技有限公司，批號分別為CW0580、10243、CW2333S），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR? Green Premix實(shí)時(shí)熒光定量擴(kuò)增試劑盒（艾科瑞生物有限公司，批號分別為AG11701、AG11711），兔源PPARα單克隆抗體、兔源CPT-1單克隆抗體、兔源SREBP-1c單克隆抗體、兔源FAS單克隆抗體、兔源SIRT1單克隆抗體、兔源PGC-1α單克隆抗體、兔源甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）單克隆抗體、辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的山羊抗兔免疫球蛋白G（IgG）二抗（美國Affinity Biosciences公司，批號分別為AF5301、DF12004、AF6283、AF5342、DF6033、AF5395、AF7021、S0001），ECL化學(xué)發(fā)光試劑（美國Millipore公司，批號1808501）;PCR引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（序列和產(chǎn)物長度信息見表1）;其余試劑為實(shí)驗(yàn)室常用規(guī)格，水為純凈水。

1.3 細(xì)胞株

本研究所用人肝癌HepG2細(xì)胞株，受贈于廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院藥劑課題組。

2 方法

2.1 細(xì)胞培養(yǎng)

將HepG2細(xì)胞復(fù)蘇后，以含10%FBS和1%青鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基（以下簡稱“完全培養(yǎng)基”）于37 ℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞融合度達(dá)80%～90%時(shí)，以胰酶消化傳代，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.2 細(xì)胞存活率的檢測

取對數(shù)生長期的細(xì)胞，按1.5×104個(gè)/孔接種于96孔板中，然后分為桑根酮C不同濃度組（2、4、8、16、32? ? ? ? μmol/L，濃度根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置），加入含相應(yīng)藥物的完全培養(yǎng)基。另設(shè)不加藥物只加細(xì)胞的對照組、不加細(xì)胞和藥物的調(diào)零孔，每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔;培養(yǎng)24 h后，每孔加入MTT 試劑20 μL，孵育4 h，棄去上清液;每孔加入二甲基亞砜（DMSO）150 μL，振搖15 min，采用酶標(biāo)儀于490 nm波長下檢測各孔的吸光度（A），計(jì)算細(xì)胞存活率[細(xì)胞存活率=（A實(shí)驗(yàn)組-A調(diào)零孔）/（A對照組-A調(diào)零孔）×100%]。

2.3 細(xì)胞分組、造模與給藥

取對數(shù)生長期細(xì)胞，按2 ×105個(gè)/孔接種于6孔板中，然后分為對照組、模型組、非諾貝特組（10 μmol/L，濃度參考文獻(xiàn)[18]設(shè)置）和桑根酮C低、中、高濃度組（2、4、8? μmol/L，濃度根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置）。參照文獻(xiàn)[19]方法，對照組加入含1%BSA的完全培養(yǎng)基，模型組加入含1 mmol/L游離脂肪酸（將適量油酸和棕櫚酸以含1%BSA的完全培養(yǎng)基溶解配制而成，以誘導(dǎo)脂質(zhì)蓄積模型）的完全培養(yǎng)基，給藥組加入含相應(yīng)藥物和1 mmol/L游離脂肪酸的完全培養(yǎng)基，然后培養(yǎng)24 h。

2.4 細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積情況觀察和脂質(zhì)水平測定

取對數(shù)生長期的細(xì)胞，按2×105個(gè)/孔接種于6孔板中，按“2.3”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，以PBS洗滌2～3次，加入固定液固定20～30 min;棄去固定液，水洗后加入60%異丙醇浸染5 min;棄去異丙醇，加入油紅O染色液（臨用時(shí)配制）浸染10～20 min;棄去染色液，水洗直至無多余染液，再加入蘇木素染色液復(fù)染1～2 min;棄去蘇木素染色液，水洗，取部分于顯微鏡下觀察細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積情況，并拍照記錄。觀察結(jié)束后，每孔加入異丙醇200 μL，振搖15 min以充分洗脫;將洗脫液依次加入96孔板中，采用酶標(biāo)儀于490 nm波長下檢測A值（A值越大，則表示細(xì)胞中脂質(zhì)水平越高）。

2.5 細(xì)胞中TG含量的測定

取對數(shù)生長期細(xì)胞，按2×105個(gè)/孔接種于6孔板中，按“2.3”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，采用超聲波細(xì)胞破碎儀破碎細(xì)胞，然后收集細(xì)胞均漿液，采用BCA法測定細(xì)胞中蛋白濃度，并按照TG試劑盒說明書相關(guān)方法檢測細(xì)胞中TG含量。

2.6 細(xì)胞中PPARα通路相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平的檢測

采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法進(jìn)行檢測。取對數(shù)生長期細(xì)胞，按2×105個(gè)/孔接種于6孔板中，按“2.3”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，采用TRIzol法提取各組細(xì)胞的總RNA，然后根據(jù)試劑盒說明書相關(guān)方法，將其逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。以cDNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系為：cDNA模板2 μL，2×SYBR? Green Pro Taq HS Premix 10 μL，上、下游引物各0.5 μL，RNase free water 7 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃，30 s;95 ℃，5 s，60 ℃，30 s，共40個(gè)循環(huán)。以GADPH為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算PPARα、CPT-1、SREBP-1c、FAS、SIRT1、PGC-1α的mRNA表達(dá)水平。

2.7 細(xì)胞中PPARα通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的檢測

采用Western blot法進(jìn)行檢測。取對數(shù)生長期細(xì)胞，按2×105個(gè)/孔接種于6孔板中，按“2.3”項(xiàng)下方法分組、造模與給藥，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，棄去培養(yǎng)液，以PBS洗滌2～3次，加入適量RIPA裂解液提取總蛋白，并置于冰上充分裂解30 min后于4 ℃條件下以12 000 r/min離心15 min;取上清液采用BCA法測定蛋白濃度。蛋白經(jīng)煮沸變性后，進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳;轉(zhuǎn)膜，以5%脫脂奶粉封閉2 h;加入PPARα一抗（稀釋度為1 ∶ 1 000）、CPT-1一抗（稀釋度為1 ∶ 1 000）、SREBP-1c一抗（稀釋度為1 ∶ 800）、FAS一抗（稀釋度為1 ∶ 800）、SIRT1一抗（稀釋度為1 ∶ 800）、PGC-1α一抗（稀釋度為1 ∶ 800）、GAPDH一抗（稀釋度為1 ∶ 1 000），于4 ℃孵育過夜;以TBST緩沖液洗膜10 min×3次，加入二抗（稀釋度為1 ∶ 3 000），室溫孵育2 h;以TBST緩沖液洗膜10 min×3次，加入ECL化學(xué)發(fā)光試劑，采用全自動化學(xué)發(fā)光成像分析儀成像。采用Image J 6.0軟件進(jìn)行分析，以目的蛋白灰度值與內(nèi)參GAPDH灰度值的比值表示目的蛋白的表達(dá)水平。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以x±s表示。多組間比較采用單因素方差分析;組間兩兩比較時(shí)，若方差齊則采用最小顯著性差異法（LSD），若方差不齊則采用Dunnetts T3多重比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

3 結(jié)果

3.1 桑根酮C對HepG2細(xì)胞存活率的影響

與對照組比較，桑根酮C 16、32 μmol/L組細(xì)胞存活率顯著降低（P<0.01），詳見表2。因此，本研究選取對細(xì)胞活性無明顯影響的2、4、8 μmol/L桑根酮C進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注：與對照組比較，**P<0.01

Note： vs. control group，**P<0.01

3.2 桑根酮C對HepG2細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積和TG含量的影響

與對照組比較，模型組細(xì)胞的細(xì)胞核（鏡下顯藍(lán)色）明顯萎縮、體積變小，脂滴數(shù)（鏡下顯紅色）明顯增加，細(xì)胞中脂質(zhì)水平和TG含量均顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，桑根酮C各濃度組和非諾貝特組細(xì)胞的細(xì)胞核萎縮不明顯、體積大小正常，脂滴數(shù)明顯減少，細(xì)胞中脂質(zhì)水平和TG含量均顯著降低（P<0.05），詳見表3、圖2。

3.3 桑根酮C對HepG2細(xì)胞中PPARα通路相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響

與對照組比較，模型組細(xì)胞中PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α 的mRNA表達(dá)水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），SREBP-1c、FAS 的mRNA表達(dá)水平均顯著升高（P<0.01）;與模型組比較，桑根酮C各濃度組和非諾貝特組細(xì)胞中PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α 的mRNA表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），SREBP-1c、FAS的 mRNA表達(dá)水平均顯著降低（P<0.01），詳見表4。

3.4 桑根酮C對HepG2細(xì)胞中PPARα通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

與對照組比較，模型組細(xì)胞中PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α的蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P<0.01），SREBP-1c、FAS的蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01）;與模型組比較，桑根酮C各濃度組和非諾貝特組細(xì)胞中PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α的蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），SREBP-1c（桑根酮C低濃度組除外）、FAS的蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01），詳見圖3、表5。

4 討論

NAFLD被認(rèn)為是代謝綜合征在肝臟的一種表現(xiàn)形式，其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，主要包括胰島素抵抗、脂代謝紊亂、炎癥反應(yīng)失調(diào)等[20]。目前較為公認(rèn)的發(fā)病機(jī)制是“多次打擊學(xué)說”，即以胰島素抵抗為主的肝臟脂肪變性為“第一次打擊”，以肝細(xì)胞內(nèi)過氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、腸道衍生內(nèi)毒素、炎癥級聯(lián)反應(yīng)等為“第二次打擊”，以肝臟免疫紊亂導(dǎo)致肝纖維化、肝細(xì)胞缺血壞死和肝硬化為“第三次打擊”[21]。由此可見，肝臟脂質(zhì)代謝紊亂引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積（尤其是TG過多聚積）是導(dǎo)致NAFLD的主要原因[22-23]。現(xiàn)有的建立NAFLD模型的細(xì)胞主要包括原代肝細(xì)胞、永生細(xì)胞系、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等，其中永生細(xì)胞系具有生長穩(wěn)定、無限壽命、表型穩(wěn)定、培養(yǎng)條件比原代肝細(xì)胞簡單、易于在不同實(shí)驗(yàn)室間標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)[17]，因此本研究選擇永生細(xì)胞系的人肝癌HepG2細(xì)胞進(jìn)行研究。

本研究以游離脂肪酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)蓄積，以探討桑根酮C對NAFLD脂質(zhì)代謝的改善作用及相關(guān)機(jī)制。結(jié)果顯示，HepG2細(xì)胞經(jīng)1 mmol/L 游離脂肪酸誘導(dǎo)24 h后，細(xì)胞中脂滴數(shù)明顯增加，脂質(zhì)水平、TG含量均顯著升高，表明脂質(zhì)蓄積模型復(fù)制成功;經(jīng)桑根酮C干預(yù)后，細(xì)胞中脂滴數(shù)明顯減少，脂質(zhì)水平、TG含量均顯著降低，表明桑根酮C可減少HepG2細(xì)胞的脂質(zhì)蓄積。

肝臟中脂質(zhì)代謝離不開多種關(guān)鍵酶與蛋白的相互作用。研究表明，PPARα通路在控制脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)與氧化、脂質(zhì)合成和分解等代謝過程中具有重要作用[23]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)游離脂肪酸誘導(dǎo)后，HepG2細(xì)胞中PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著降低，SREBP-1c、FAS的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著升高;經(jīng)桑根酮C干預(yù)后，細(xì)胞中上述指標(biāo)均顯著逆轉(zhuǎn)（桑根酮C低濃度組的SREBP-1c蛋白除外），表明桑根酮C能激活PPARα途徑、提高肝細(xì)胞的脂質(zhì)氧化能力、減少細(xì)胞中的脂質(zhì)合成，從而減輕脂質(zhì)蓄積。

綜上所述，桑根酮C可改善HepG2細(xì)胞的脂質(zhì)蓄積;其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)PPARα信號通路、提高細(xì)胞脂質(zhì)氧化能力、抑制脂質(zhì)合成有關(guān)。

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（收稿日期：2021-04-16 修回日期：2021-06-05）

（編輯：唐曉蓮）