秦高嬋 陳紅林 儲天琪 錢豪杰 樓 寶

不同生長時期紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺內(nèi)氨基酸和脂肪酸變化分析*

秦高嬋1陳紅林2①儲天琪1錢豪杰3樓 寶2①

(1. 浙江海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院 浙江 舟山 316022；2. 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水生生物研究所 浙江 杭州 310021； 3. 海寧市鴻海養(yǎng)殖有限公司 浙江 嘉興 314400)

為了研究不同生長時期紅螯螯蝦()肌肉和肝胰腺內(nèi)脂肪酸和氨基酸的動態(tài)變化，選取90 d (第二性征未發(fā)育)、140 d (第二性征發(fā)育成熟)和180 d (性腺發(fā)育成熟)的紅螯螯蝦，分別測定其肌肉和肝胰腺內(nèi)氨基酸和脂肪酸的含量。結(jié)果顯示，90 d紅螯螯蝦肌肉中的必需氨基酸總量顯著高于其他2個時期(<0.05)；而紅螯螯蝦肝胰腺內(nèi)必需氨基酸總量和非必需氨基酸總量均隨著日齡增加而逐漸下降。比較不同生長時期肌肉中脂肪酸含量發(fā)現(xiàn)，隨著日齡增長，飽和脂肪酸(SFA)含量呈下降趨勢；而單不飽和脂肪酸(MUFA)含量呈先上升后下降的變化趨勢，140 d含量最高[(25.69±0.42)%]；多不飽和脂肪酸(PUFA)含量呈上升的變化趨勢。肝胰腺中SFA含量在 3個生長時期內(nèi)無顯著性差異(>0.05)，MUFA含量呈先上升后下降的變化趨勢，140 d含量最高[(37.44±0.59)%]，而PUFA含量變化與MUFA正好相反。營養(yǎng)價值評估結(jié)果顯示，180 d (可上市銷售)的紅螯螯蝦肌肉內(nèi)必需氨基酸指數(shù)(49.96%)高于聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)評分模式(31.50%)和全雞蛋蛋白質(zhì)模式(43.10%)，是較為理想的優(yōu)質(zhì)食物蛋白源。由上可知，在不同生長時期，肌肉和肝胰腺中的氨基酸、脂肪酸的主要消耗不同，研究結(jié)果對了解不同生長時期紅螯螯蝦營養(yǎng)需求、開發(fā)紅螯螯蝦配合飼料提供了參考依據(jù)。

紅螯螯蝦；生長時期；肌肉；肝胰腺；氨基酸；脂肪酸

紅螯螯蝦()又名“澳洲淡水龍蝦”，屬軟甲綱(Malacostraca)、十足目(Decapoda)、擬螯蝦科(Parastacidae)、滑螯蝦屬()，原產(chǎn)于澳大利亞，外形與克氏原螯蝦()相似(石義元, 2004)，是世界名貴淡水經(jīng)濟(jì)蝦種之一(吳志新等, 2000)。紅螯螯蝦營養(yǎng)豐富、出肉率高、耐長途運輸、市場需求廣泛，是具有較高市場潛力的養(yǎng)殖品種之一(李進(jìn), 2009)。隨著紅螯螯蝦人工育苗和養(yǎng)殖技術(shù)的突破，營養(yǎng)需求不明確和專用配合飼料缺乏成為紅螯螯蝦養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的限制性因素(郭占林, 2010)。紅螯螯蝦的生長發(fā)育除了受到光照、鹽度和水溫等環(huán)境因素的影響(吳志新, 1997; 李彤等, 1998; 張彥嬌, 2010)，還與體內(nèi)脂類和蛋白質(zhì)組成密切相關(guān)(王友慧等, 2004)。隨著蝦類的生長發(fā)育，其組織中氨基酸和脂肪酸的含量會有所不同(姚翠鸞等, 2001)。日本對蝦()從卵發(fā)育到幼蝦的過程中，體內(nèi)游離氨基酸含量逐漸上升(Marangos, 1990)。斑節(jié)對蝦()隨著蝦體長大，其肌肉內(nèi)甘氨酸、精氨酸的含量呈下降趨勢，而脯氨酸含量逐漸上升(梁亞全等, 1995)?？耸显r幼蝦肌肉內(nèi)二十二碳五稀酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的含量顯著高于中蝦和成蝦(封功能等, 2011)。肌肉和肝胰腺作為蝦類的主要食用部位，氨基酸和脂肪酸的不同可能導(dǎo)致其在營養(yǎng)和口感上的差異(Chen, 2010)。同時，肝胰腺作為蝦蟹類儲存脂肪和提供能量的主要器官(靳立兵等, 2013)，研究其不同生長時期氨基酸與脂肪酸組成，對了解紅螯螯蝦營養(yǎng)消耗具有重要意義。

迄今為止，有關(guān)蝦蟹類體內(nèi)氨基酸和脂肪酸的研究日益增多，如中華絨螯蟹()生長發(fā)育過程中氨基酸的需求分析(江洪波, 2003)、黑斑口蝦蛄()不同發(fā)育時期脂類和脂肪酸組成分析(王春琳等, 2007)、日本沼蝦()和藍(lán)蟹()胚胎發(fā)育過程中脂肪酸組成變化等(李紅等, 2003; 李樹國等, 2011)，但有關(guān)紅螯螯蝦不同發(fā)育階段脂肪酸和氨基酸組成分析的研究尚未見報道。因此，本研究對3個生長時期的紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺內(nèi)脂肪酸和氨基酸組成進(jìn)行對比分析，探究不同生長階段紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺內(nèi)脂肪酸和氨基酸的變化規(guī)律，旨在更好地了解紅螯螯蝦生長的促進(jìn)和限制因素，為其專用配合飼料的研發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

本研究所用紅螯螯蝦取自浙江省海寧市鴻海養(yǎng)殖有限公司孵化的同一批幼蝦，分別養(yǎng)殖于3個土塘中，每個池塘均為2000 m2，水深為1 m，養(yǎng)殖密度均約為5000尾/667 m2，3個池塘養(yǎng)殖管理方式、環(huán)境條件保持一致，養(yǎng)殖過程中均投喂江蘇省天邦全熟化蝦飼料。

1.2 實驗設(shè)計

隨機(jī)挑選90 d (第二性征未發(fā)育) (18.34± 0.17) g、140 d (第二性征發(fā)育成熟)[(35.76±1.56) g]、180 d (性腺完全成熟)[(54.28±2.55) g] 3個時期的紅螯螯蝦各30只，其中，每個時期、每個池塘各取 10只，所取紅螯螯蝦體表無傷、無病害。每尾個體冰凍后取肌肉和肝胰腺組織，置于2 mL離心管液氮速凍后保存于–80℃冰箱，用于后續(xù)脂肪酸和氨基酸的測定。

1.3 指標(biāo)測定及方法

1.3.1 脂肪酸及氨基酸的測定 使用冷凍干燥機(jī)(浙江省寧波市雙嘉儀器有限公司，SJIA-10N/12N/18N) –60℃干燥48 h，將干燥后的樣品用研磨機(jī)(北京瑞百利商貿(mào)有限公司，SG-350C)打磨成均勻的粉質(zhì)，保存?zhèn)溆谩?/p>

根據(jù)GB 5009.168-2016《食品中脂肪酸的測定》標(biāo)準(zhǔn)，利用氣相色譜分析儀(Agilent 6890, 美國)，采用氣相色譜分析法測定肌肉和肝胰腺的脂肪酸含量。根據(jù)GB 5009.124-2016《食品中氨基酸的測定》的標(biāo)準(zhǔn)，利用Biochrom 30氨基酸自動分析儀(英國)，采用酶水解法進(jìn)行氨基酸測定。在水解過程中，色氨酸和胱氨酸被破壞，因此，未對二者進(jìn)行測定分析。

1.3.2 氨基酸營養(yǎng)評定 將紅螯螯蝦肌肉中氨基酸含量單位換算為g/mg，基于FAO/WHO建議的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式和雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式進(jìn)行測評，測得氨基酸評分(AAS)、化學(xué)評分(CS)和必需氨基酸指數(shù)(EAAI)。計算公式如下(張昌吉等, 2006)：

AAS=試樣樣品中氨基酸含量/(FAO/WHO評分標(biāo)準(zhǔn)模式中同種氨基酸含量)；

CS=試樣樣品中氨基酸含量/雞蛋蛋白質(zhì)中同種含量；

式中，為比較的必需氨基酸數(shù)量，、…、為紅螯螯蝦肌肉中必需氨基酸含量(mg/g prot)；AE、BE、…、JE為全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量(mg/g prot)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

所得脂肪酸數(shù)據(jù)為相對含量，氨基酸數(shù)據(jù)為絕對含量，結(jié)果以Mean±SD表示，采用SPSS 19.0進(jìn)行單因素方差(one-way ANOVA)分析，顯著性水平<0.05。

2 結(jié)果

2.1 紅螯螯蝦不同生長時期肌肉和肝胰腺內(nèi)氨基酸的變化

由表1可知，除色氨酸和胱氨酸在樣品水解過程中被破壞，紅螯螯蝦肌肉中共檢測到16種氨基酸，包含人體所需的7種必需氨基酸、2種半必需氨基酸及7種非必需氨基酸。其中，谷氨酸占總氨基酸含量最高，且在3個時期內(nèi)差異顯著(<0.05)，在90 d時含量最高，為(14.14±0.14)%。而脯氨酸含量在180 d時為(3.00±0.10)%，顯著高于90 d和140 d。賴氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸和精氨酸含量在90 d時顯著高于其他2個時期(<0.05)，與必需氨基酸總量變化趨勢一致，而非必需氨基酸含量在3個生長時期內(nèi)沒有顯著差異(>0.05)。鮮味氨基酸含量在3個時期內(nèi)差異顯著(<0.05)，呈先上升后下降的變化趨勢，在140 d時含量最高，為(38.01±0.32)%。

由表2可知，紅螯螯蝦肝胰腺中檢測到16種氨基酸，總氨基酸含量較低(17.07%～24.06%)，與肌肉氨基酸含量相比，僅占1/4，表明肝胰腺中蛋白質(zhì)含量較少。其中，必需氨基酸、非必需氨基酸和鮮味氨基酸含量在3個生長時期具有顯著性差異(<0.05)，且均呈下降的變化趨勢。蛋氨酸、甘氨酸和丙氨酸在3個不同時期無顯著性差異(>0.05)，除此之外，其他氨基酸含量均與總氨基酸變化趨勢一致。

表1 不同生長時期的紅螯螯蝦肌肉氨基酸的變化

表2 不同生長時期的紅螯螯蝦肝胰腺氨基酸的變化

2.2 紅螯螯蝦不同生長時期肌肉和肝胰腺內(nèi)脂肪酸的變化

由表3可知，不同生長時期紅螯螯蝦肌肉中脂肪酸組成一致，均檢測到15種脂肪酸組分，起始碳鏈長度在18～22碳之間，以中長鏈為主。其中，包括7種飽和脂肪酸(SFA)，占總脂肪酸含量的36.78%～39.69%，C16:0含量最高(16.22%～16.78%)；3種單不飽和脂肪酸(MUFA)，占總脂肪酸含量的23.78%～25.69%，其中C18:1n9c含量最高(21.32～22.86%)；5種多不飽和脂肪酸(PUFA)，占總脂肪酸含量的35.29%～39.42%，包含亞油酸(C18:2n6c)、亞麻酸(C18:3n3)、花生五烯酸(C20:5n3)和二十二碳六烯酸(C22:6n3) 4種必需脂肪酸，其中，C18:2n6c含量最高(16.15%～22.18%)。

表3 不同生長時期的紅螯螯蝦肌肉脂肪酸的變化(%,總脂肪酸)

在90～180 d的生長過程中，SFA含量呈下降的變化趨勢，90 d時含量最高[(39.69±0.86)%]，其中，SFA中只有C15:0、C17:0和C20:0在3個時期內(nèi)有顯著性差異(<0.05)，且變化趨勢與SFA保持一致。MUFA含量在3個生長時期有顯著性差異(<0.05)，呈先上升后下降的變化趨勢，在140 d時含量最高[(25.69±0.42)%]。PUFA含量在3個生長時期同樣具有顯著性差異(<0.05)，呈上升的變化趨勢，在180 d時含量最高[(39.42±1.16)%[，與C18:2n6c變化趨勢一致，而C20:5n3則呈先上升后下降的變化趨勢，在140 d時含量最高[(14.27±0.73)%]。

由表4可知，不同生長時期紅螯螯蝦肝胰腺內(nèi)脂肪酸組成一致，共檢測到27種脂肪酸，碳鏈長度在12～24碳之間，包括了10種SFA，占總脂肪酸含量的28.03～29.39%，其中C16:0含量最高(19.20%～20.32%)。7種MUFA，占總脂肪酸含量的29.48%～37.44%，其中C18:1n9c含量最高(28.96%～33.54%)。10種PUFA，占總脂肪酸含量的35.64%～42.44%，其中C18:3n3含量最高(3.80%～5.21%)。

SFA含量在3個不同時期無顯著性差異(>0.05)，單一飽和脂肪酸含量與SFA含量變化趨勢保持一致，表明在不同生長時期，SFA含量趨于穩(wěn)定。MUFA含量呈先上升后下降的變化趨勢，在140 d時含量最高[(37.44±0.59)%]，主要體現(xiàn)在C18:1n9c含量的變化。而PUFA與MUFA變化趨勢完全相反，呈先下降后上升的變化趨勢，在90 d時含量最高(42.44±0.77)%，其中以C18:3n3和EPA變化為主。

表4 不同生長時期的紅螯螯蝦肝胰腺脂肪酸的變化

2.3 營養(yǎng)價值評定結(jié)果

由表5可見，通過分析180 d的紅螯螯蝦肌肉中的氨基酸組成，可以發(fā)現(xiàn)第一限制性氨基酸為纈氨酸，第二限制性氨基酸為異亮氨酸，AAS介于0.76%～1.31%之間，CS介于0.58%～1.03%之間，必需氨基酸占總氨基酸的50%左右，顯著高于FAO/WHO評分標(biāo)準(zhǔn)(31.50%)和全雞蛋蛋白模式評分標(biāo)準(zhǔn)(43.10%) (Seligson, 1984)。

表5 180 d紅螯螯蝦肌肉中必需氨基酸的組成與評價

3 討論

3.1 不同生長時期紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺中氨基酸組成變化分析

蛋白質(zhì)是構(gòu)成生命體的物質(zhì)基礎(chǔ)，是機(jī)體細(xì)胞的重要組成部分，能夠為生命活動提供能量(陳晴, 2014)。氨基酸作為蛋白質(zhì)的基本單位，在調(diào)節(jié)生理機(jī)能和催化新陳代謝過程中發(fā)揮重要作用(劉峰等, 2018)。Coloso等(1980)和Shewbart等(1972)研究發(fā)現(xiàn)，在缺乏亮氨酸、賴氨酸和纈氨酸等必需氨基酸時，斑節(jié)對蝦蛻殼受阻、生長緩慢。因此，在生長發(fā)育過程中，需要添加外源性氨基酸來滿足動物體自身對必需氨基酸的需求(黃凱等, 2003)。在本研究中，不同生長時期紅螯螯蝦肌肉中必需氨基酸含量具有顯著性差異，呈下降趨勢。此現(xiàn)象可能與Ghanawi等(2012)的研究結(jié)果一致，即在甲殼類動物的生長發(fā)育過程中，蛋白質(zhì)主要用于性腺組織結(jié)構(gòu)發(fā)育，且在蛻殼和性腺發(fā)育前期，機(jī)體會儲存一定的營養(yǎng)物質(zhì)，以保證生理活動的正常進(jìn)行。由此可見，在140～180 d性腺發(fā)育成熟的過程中，紅螯螯蝦肌肉中亮氨酸等必需氨基酸消耗量逐漸增多。谷氨酸能夠在谷氨酰胺合成酶的作用下與氨基酸代謝過程中產(chǎn)生的氨轉(zhuǎn)化為谷氨酰胺(劉勝男等, 2015; 李少飛, 2014)，谷氨酰胺反過來又能參與蛋白質(zhì)代謝調(diào)控，提高動物的攝食率和生長速度(van Acker, 1999; 盧志杰等, 2019)。在本研究中，谷氨酸含量在90 d時顯著高于其他2個時期，說明在性腺發(fā)育時期，氨基酸代謝增強(qiáng)，谷氨酸消耗隨之增加，以此滿足機(jī)體的正常代謝和生命活動。因此，140～180 d時，應(yīng)在紅螯螯蝦飼料中補充蛋白質(zhì)，為機(jī)體發(fā)育提供必需的氨基酸。

在生長發(fā)育過程中，甲殼類動物肝胰腺中的蛋白質(zhì)和氨基酸除了能維持組織正常的生理活動，還能促進(jìn)機(jī)體性腺發(fā)育(李旭驍?shù)? 2015a)。因此，本研究中，3個不同時期肝胰腺中氨基酸含量逐漸降低，可能參與了性腺的發(fā)育，且肝胰腺中氨基酸變化較為保守，單一氨基酸含量占總氨基酸比例的變化不大，變化趨勢與總氨基酸含量保持一致，猜測氨基酸等比例參與了這一生理過程。李旭驍?shù)?2015b)在中華絨螯蟹的研究中發(fā)現(xiàn)，外源性添加蛋白質(zhì)和氨基酸還能夠促進(jìn)親體交配，提高抱卵率和幼蟹成活率。因此，在紅螯螯蝦不同時期的生長過程中，可以適當(dāng)添加蛋白質(zhì)，以保證各項生理功能的正常進(jìn)行。

3.2 不同生長時期紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺中脂肪酸組成變化分析

脂肪酸對動物體具有重要的生理功能，其中，PUFA能夠調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、促進(jìn)生長發(fā)育、提高幼體的成活率(蔡雙蓮等, 2003; 貢藝等, 2018)。此外，肌肉中的脂肪酸能夠提高肌肉的口感和風(fēng)味(蔣克勇, 2012)。本研究表明，紅螯螯蝦肌肉中含有C18:3n3、C18:2n6c、C20:5n3和C22:6n3等必需脂肪酸，能夠滿足人體對PUFA的需求，促進(jìn)體內(nèi)飽和脂肪酸的代謝、降低心血管疾病的發(fā)病率并減少肥胖病的產(chǎn)生(周晶晶等, 2019)。PUFA還是甲殼類動物蛻殼期間新膜構(gòu)建的主要物質(zhì)，在本研究中，90 d時肌肉內(nèi)PUFA的含量顯著低于其他2個時期，可能是由于甲殼類動物的生長和發(fā)育存在拮抗關(guān)系，在性腺發(fā)育和胚胎發(fā)育時期，蛻殼頻率會有所下降。因此，140和180 d時，對PUFA的消耗減少(Assaf, 1997)。在紅螯螯蝦不斷生長的過程中，機(jī)體物質(zhì)消耗不斷增多，由于肌肉中纖維組織較多，而脂肪組織較少，SFA在90～180 d里含量逐漸降低，猜測其僅作為肌肉的正常代謝被消耗，與劉穗華等(2010)在不同亞麻酸/亞油酸對凡納濱對蝦()幼蝦生長性能和脂肪酸組成的研究中結(jié)果一致。

脂質(zhì)在甲殼類動物性成熟過程中發(fā)揮著重要作用(Lautier, 1988)，而肝胰腺作為紅螯螯蝦儲存和加工脂質(zhì)的主要器官，還有向其他組織提供營養(yǎng)物質(zhì)的功能，由于性腺內(nèi)合成脂質(zhì)的速度有限，大部分脂類來自于肝胰腺(Robert, 1989)。因此，與肌肉相比，肝胰腺內(nèi)脂肪酸種類較多。C18:1是肝胰腺內(nèi)含量最高的脂肪酸，郭占林(2010)在紅螯螯蝦幼蝦脂質(zhì)營養(yǎng)的研究表明，C18:1能夠促進(jìn)脂肪酸鏈延長酶從頭合成長鏈不飽和脂肪酸，進(jìn)而提高代謝和生長速度。鑒于生長蛻殼和性腺發(fā)育存在拮抗關(guān)系，本研究中，在140 d時，C18:1含量最高，由此推測C18:1在性腺發(fā)育時期可能不作為主要的能源物質(zhì)被利用。應(yīng)雪萍等(2004)在中華絨螯蟹的研究中發(fā)現(xiàn)，C18:3n3和C18:2n6c能夠影響其生長和蛻殼，且與出苗率和成活率有關(guān)，C18:2n6c還參與了細(xì)胞膜的構(gòu)建。因此，紅螯螯蝦肝胰腺內(nèi)高含量的C18:3n3和C18:2n6c能夠較為穩(wěn)定地為生長發(fā)育提供物質(zhì)基礎(chǔ)。由此可知，在140和180 d時，適當(dāng)增加EPA、C18:3n3和C18:2n6c的含量，能夠更好地促進(jìn)紅螯螯蝦性腺的發(fā)育。

3.3 紅螯螯蝦肌肉營養(yǎng)價值評定

肌肉作為紅螯螯蝦主要的食用部位，其鮮味和風(fēng)味主要取決于氨基酸和脂肪酸的種類和含量(吳志新等, 1995)。紅螯螯蝦一般在體重達(dá)90 g，養(yǎng)殖5個月左右時上市銷售(張占魁等, 2014)，因此，本研究選取180 d時的紅螯螯蝦，即具有商業(yè)價值的成蝦，對其肌肉中氨基酸進(jìn)行氨基酸評價。結(jié)果顯示，紅螯螯蝦肌肉中必需氨基酸指數(shù)為70.90%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于克氏原螯蝦(56.36%)和南美白對蝦() (47.79%)(易瑞愷等, 2013)。肌肉中鮮味氨基酸含量高達(dá)45%以上，能夠顯著提高肌肉的鮮味。在肉類加工制作過程中，由于不飽和脂肪酸易被氧化，其含量能影響肉質(zhì)的風(fēng)味(韋克林等, 2012)。紅螯螯蝦肌肉中不飽和脂肪酸含量高達(dá)60%以上，且富含人體所需的亞油酸(C18:2n6c)，能夠降低人體心血管病的發(fā)生。由此可見，紅螯螯蝦肌肉是一種營養(yǎng)價值較高且味道鮮美的食物蛋白源。

4 小結(jié)

在不同生長時期，紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺中脂肪酸、氨基酸含量發(fā)生了顯著變化，表明不同時期肌肉和肝胰腺對氨基酸和脂肪酸的利用程度不同。研究結(jié)果為了解紅螯螯蝦不同時期營養(yǎng)物質(zhì)的消耗和需求提供了基礎(chǔ)資料，對更好地進(jìn)行紅螯螯蝦健康養(yǎng)殖具有指導(dǎo)作用。

ASSAF B, TAL L, GIDEON H. Annual cycle of spawning and molting in the red-claw crayfish,, under laboratory conditions. Aquaculture, 1997, 157(3/4): 239–249

CAI S L, LI M. Advances in polyunsaturated fatty acids. Life Science Research, 2003, 7(4): 289–292 [蔡雙蓮, 李敏. 多不飽和脂肪酸的研究進(jìn)展. 生命科學(xué)研究, 2003, 7(4): 289–292]

CHEN G, XIONG Y L, NEWMAN M C,. Effect of vacuum packaging on the quality of red claw crayfish,, tail muscle during frozen storage. Journal of the World Aquaculture Society, 2010, 41(3): 358–368

CHEN Q. Application of phosphomolybdate in protein separation and purification. Master′s Thesis of Northeastern University, 2014 [陳晴. 磷鉬氧酸鹽在蛋白質(zhì)分離純化中的應(yīng)用研究. 東北大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文, 2014]

COLOSO R M, CRUZ L J. Preliminary studies in some aspects of amino acid biosynthesis in juveniles of: I. Incorporation of14C from (U-14C) acetate into amino acids to precipitable proteins. Bulletin of the Philippine Biochemistry Society, 1980, 3(1/2): 12–22

FENG G N, WANG A M, SHAO R,. Analysis and evaluation of nutritional components ofat different growth stages. Jiangsu Agricultural Sciences, 2011, 39(4): 395–397 [封功能, 王愛民, 邵榮, 等. 克氏原螯蝦不同生長階段營養(yǎng)成分分析與評價. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué), 2011, 39(4): 395–397]

GHANAWI J, PATRICK S I. Molting, reproductive biology, and hatchery management of redclaw crayfish(von Martens 1868). Aquaculture, 2012, 358–359: 183–195

GONG Y, LI Y K, CHEN L,. A comparative analysis of fatty acid profiles in muscle offrom different harvest locations in the eastern Pacific Ocean. Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(6): 149–156 [貢藝, 李云凱, 陳玲, 等. 東太平洋不同海區(qū)莖柔魚肌肉脂肪酸組成分析與比較. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2018, 39(6): 149–156]

GUO Z L. The study on lipid nutrition of juvenile and post-larval redclaw crayfish,. Master′s Thesis of East China Normal University, 2010 [郭占林. 紅螯光殼螯蝦()仔蝦及幼蝦脂質(zhì)營養(yǎng)的研究. 華東師范大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文, 2010]

HUANG K, WANG W, LI C H. Requirement of essential amino acids inJournal of Fisheries of China, 2003, 27(5): 456–461 [黃凱, 王武, 李春華. 南美白對蝦必需氨基酸的需要量. 水產(chǎn)學(xué)報, 2003, 27(5): 456–461]

JIANG H B. Protein nutrition of Chinese mitten-handed crab,. Doctoral Dissertation of East China Normal University, 2003 [江洪波. 中華絨螯蟹蛋白質(zhì)營養(yǎng)生理研究. 華東師范大學(xué)博士研究生學(xué)位論文, 2003]

JIANG K Y. Studies on improvement of meat quality and related candidate genes in aquatic animals. Doctoral Dissertation of Chinese Academy Sciences (Institute of Oceanology), 2012 [蔣克勇. 水產(chǎn)動物肉質(zhì)風(fēng)味改良技術(shù)及相關(guān)候選基因研究. 中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所)博士研究生學(xué)位論文, 2012]

JIN L B, MU C K, SONG W W,. Analysis of the nutritional composition and the fatty acid composition in hepatopancreas during the soft shell hardening period of. Journal of Biology, 2013, 30(2): 23–27 [靳立兵, 母昌考, 宋微微, 等. 三疣梭子蟹軟殼硬化階段肝胰腺的營養(yǎng)成分及脂肪酸組成分析. 生物學(xué)雜志, 2013, 30(2): 23–27]

LAUTIER J, LAGARRIGUE J G. Lipid metabolism of the crabduring vitellogenesis. Biochemical Systematics and Ecology, 1988, 16(2): 203–212

LI H, ZHAO Y L, WANG Q,. Variations in biochemical composition during embryonic development ofJournal of Fisheries of China, 2003, 27(6): 545–549 [李紅, 趙云龍, 王群, 等. 日本沼蝦胚胎發(fā)育不同階段主要生化成分的變化. 水產(chǎn)學(xué)報, 2003, 27(6): 545–549]

LI J. Studies on the effects of physical and chemical factors in water environment on the reproductive performance and larval development inMaster′s Thesis of Ocean University of China, 2009 [李進(jìn). 水環(huán)境理化因子對紅螯螯蝦繁殖性能和幼體發(fā)育的影響研究. 中國海洋大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文, 2009]

LI S F. cDNA cloning and expression analysis of the enzyme genes related to ammonia metabolism inand study on effect of these enzymes in the detoxification of ammonia following ambient ammonia stresses. Master′s Thesis of Dalian Ocean University, 2014 [李少飛. 中國對蝦氨氮代謝酶基因的cDNA克隆及其在氨氮解毒代謝過程中的作用. 大連海洋大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文, 2014]

LI S G, CHENG Y X, ZHOU B,. Changes of main fatty acids and lipid classes in second ovarian development of spawning blue crab,. Journal of Fishery Sciences of China, 2011, 18(3): 194–201 [李樹國, 成永旭, 周波, 等. 藍(lán)蟹抱卵期間卵巢第二次發(fā)育過程中主要脂肪酸和脂類的變化. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2011, 18(3): 194–201]

LI T, JIAO W M, LI Y,. Effects of light and temperature on artificial cultivation of red crawfish (). Aquaculture of Tianjin, 1998(1): 32–35 [李彤, 焦萬明, 李穎, 等. 光照與溫度對紅螯螯蝦人工育苗的影響. 天津水產(chǎn), 1998(1): 32–35]

LI X X, GONG Y S. Protein nutrition ofFood Safety Guide,2015a(29): 80 [李旭驍, 龔月生. 中華絨螯蟹蛋白質(zhì)營養(yǎng). 食品安全導(dǎo)刊, 2015a(29): 80]

LI X X, GONG Y S. Analysis of nutrition demand ofAnimals Breeding and Feed,2015b(11): 42–44 [李旭驍, 龔月生. 中華絨鰲蟹養(yǎng)殖營養(yǎng)需求分析. 養(yǎng)殖與飼料, 2015b(11): 42–44]

LIANG Y Q, SUN M, HAN A S,. Amino acid analysis of the protein ofMarine Sciences, 1995(3): 27–30 [梁亞全, 孫謐, 韓阿壽, 等. 斑節(jié)對蝦()蛋白質(zhì)的氨基酸分析. 海洋科學(xué), 1995(3): 27–30]

LIU F, Lü X K, LIU Y Y,. Effect of starvation on amino acids and fatty acids of juvenileProgress in Fishery Sciences,2018, 39(5): 58–65 [劉峰, 呂小康, 劉陽陽, 等. 饑餓對大黃魚幼魚肌肉中氨基酸和脂肪酸組成的影響. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2018, 39(5): 58–65]

LIU S H, CAO J M, HUANG Y H,Effects of different linolenic acid/linoleic acid ratios on growth performance and fatty acid composition of juvenile. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2010, 22(5): 1413–1421 [劉穗華, 曹俊明, 黃燕華, 等. 飼料中不同亞麻酸/亞油酸比對凡納濱對蝦幼蝦生長性能和脂肪酸組成的影響. 動物營養(yǎng)學(xué)報, 2010, 22(5): 1413–1421]

LIU S N, PAN L Q, LIU M Q. Effects of ammonia exposure on key detoxification metabolism associated genes expression in swimming crabTransactions of Oceanology and Limnology,2015(2): 99–106 [劉勝男, 潘魯青, 劉茂琪. 氨氮脅迫對三疣梭子蟹解毒代謝關(guān)鍵基因表達(dá)的影響. 海洋湖沼通報, 2015(2): 99–106]

LU Z J, YE C K, SARATH B V,Cloning and expression of glutamine synthetase from giant freshwater prawn (). Journal of Fisheries of China, 2019, 43(3): 3–16 [盧志杰, 葉成凱, SARATH B V, 等. 羅氏沼蝦谷氨酰胺合成酶基因的克隆與表達(dá). 水產(chǎn)學(xué)報, 2019, 43(3): 3–16]

MARANGOS C, ARAUJO B A C, CECCALDI H J. Variation in the level of free amino acids during larva development of(Crustacea, Decapoda, Penaeidae). Archives Internationales de Physiologie et de Biochimie, 1990, 98(1): 41–51

ROBERT C R, ROBERT R S. Effects of purified dietary fatty acids on the fatty acid composition of freshwater shrimp,. Aquaculture, 1989, 77(2/3): 157–174

SELIGSON F H, MACKEY L N. Variable predictions of protein quality by chemical score due to amino acid analysis and reference pattern. Journal of Nutrition, 1984, 114(4): 682–691

SHEWBART K L, MIES W L, LUDWIG P D. Identification and quantitative analysis of the amino acids present in protein of the brown shrimp. Marine Biology, 1972, 16(1): 64–67

SHI Y Y. The brief description of red crawfish (). Fishery Guide to be Rich, 2004(23): 38–40 [石義元. 紅螯螯蝦簡述. 漁業(yè)致富指南, 2004(23): 38–40]

VAN ACKER B A, VON MEYENFELDT M F, SOETERS P B. Glutamine as a key ingredient in protein metabolism. Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskunde, 1999, 143(38): 1904–1908

WANG C L, YIN F, SONG W W. Analysis of lipid and fatty acid composition during embryonic and larval development of. Journal of Zhejiang University (Science Edition), 2007, 34(2): 223–227 [王春琳, 尹飛, 宋微微. 黑斑口蝦蛄胚胎和幼體不同發(fā)育時期脂類及脂肪酸組成分析. 浙江大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版), 2007, 34(2): 223–227]

WANG Y H, YE J Y. Current status and prospects of nutritional research on red crawfish. Feed Research, 2004(7): 38–41 [王友慧, 葉金云. 紅螯螯蝦營養(yǎng)研究現(xiàn)狀及展望. 飼料研究, 2004(7): 38–41]

WEI K L, HU T L, LI K. Research progress on the relationship between intramuscular fat, fatty acid and pork meat quality. Chinese Abstracts of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2012(11): 50–51 [韋克林, 胡天龍, 李坤. 肌內(nèi)脂肪、脂肪酸與豬肉肉質(zhì)三者關(guān)系研究進(jìn)展. 中國畜牧獸醫(yī)文摘, 2012(11): 50–51]

WU Z X, CHEN X X, LIU X L,. Effects of different photoperiods on the reproduction and growth of red crawfish (). Freshwater Fisheries, 2000, 30(3): 4–5 [吳志新, 陳孝煊, 劉小玲, 等. 不同光周期對紅螯螯蝦繁殖及生長的影響. 淡水漁業(yè), 2000, 30(3): 4–5]

WU Z X, ZHAO G Z. Analysis of nutrient compositions fors. Journal of Hubei Agricultural Sciences, 1995(4): 59–62 [吳志新, 趙桂珍. 澳大利亞紅螯螯蝦營養(yǎng)成分分析. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué), 1995(4): 59–62]

WU Z X. Study on tolerance of red crawfish () to salinity. Journal of Hydroecology, 1997(4): 20–21 [吳志新. 紅螯螯蝦對鹽度耐受性的研究. 水生態(tài)學(xué)雜志, 1997(4): 20–21]

YAO C L, WANG W N, WANG A L. Advances in research on nutritional requirements of shrimp amino acids. Feed Research, 2001, 1(1): 15–16 [姚翠鸞, 王維娜, 王安利. 蝦類氨基酸營養(yǎng)需求的研究進(jìn)展. 飼料研究, 2001, 1(1): 15–16]

YI R K, HU H G, WANG S H,. Analysis and estimate on nutritional components in muscle ofin Poyang Lake. Journal of Nanchang University (Science Edition), 2013, 37(3): 255–258, 276 [易瑞愷, 胡火庚, 王尚洪, 等. 鄱陽湖克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)成分分析與評價. 南昌大學(xué)學(xué)報(理科版), 2013, 37(3): 255–258, 276]

YING X P, ZHANG Y P, YANG W X. Comparative study on fatty acid composition of hepatopancreas ofmature crab, egg crab, abortion crab. Oceanologia et Limnologia Sinica, 2004, 35(2): 141–148 [應(yīng)雪萍, 張永普, 楊萬喜. 中華絨螯蟹()成熟蟹、抱卵蟹、流產(chǎn)蟹肝胰腺脂肪酸組成的比較研究. 海洋與湖沼, 2004, 35(2): 141–148]

ZHANG C J, LIU Z, WANG S Y. Muscle percentage in rainbow trout and analysis on the nutritional composition of the muscle. Reservoir Fisheries, 2006, 26(4): 83–85 [張昌吉, 劉哲, 王世銀. 虹鱒含肉率及肌肉營養(yǎng)成分分析. 水利漁業(yè), 2006, 26(4): 83–85]

ZHANG Y J. Effect of salinity, temperature on the non-specific immunity of turbot (L) and study on some immune related genes in crayfish (). Doctoral Dissertation of Ocean University of China, 2010 [張彥嬌. 鹽度和溫度對大菱鲆非特異性免疫力的影響及淡水螯蝦相關(guān)免疫因子的研究. 中國海洋大學(xué)博士研究生學(xué)位論文, 2010]

ZHANG Z K, GONG L J. Cultivation technology of red crawfish in alpine region. Scientific Fish Farming, 2014(5): 32 [張占魁, 鞏倫江. 高寒地區(qū)紅螯螯蝦當(dāng)年養(yǎng)成技術(shù). 科學(xué)養(yǎng)魚, 2014(5): 32]

ZHOU J J, LI J S, WANG Q J. Advances in regulation of omega-3 polyunsaturated fatty acids on fat metabolism. Academic Journal of Second Military Medical University, 2019, 40(1): 76–81 [周晶晶, 李家速, 王奇金. Omega-3多不飽和脂肪酸對脂肪代謝調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報, 2019, 40(1): 76–81]

Amino Acid and Fatty Acid Analyses in the Muscles and Hepatopancreas of Red Crayfish at Different Growth Stages

QIN Gaochan1, CHEN Honglin2①, CHU Tianqi1, QIAN Haojie3, LOU Bao2①

(1. School of Fishery, Zhejiang Ocean University, Zhoushan, Zhejiang 316022, China; 2. Institute of hydrobiology, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou, Zhejiang 310021, China; 3. Haining Honghai Breeding Co., Ltd., Jiaxing, Zhejiang 314400, China)

This study investigated changes in fatty acid and amino acid contents in the muscle and hepatopancreas of red crayfish () at different growth stages, i.e., before the second sex development (90 days), at maturation of second sex (140 days), and at gonadal maturity (180 days). Sixteen types of amino acids in the muscle were found, and the content of essential amino acids (EAAs) at 90 days was significantly higher than the other two periods (<0.05). However, the content of EAAs and non-essential amino acids in the hepatopancreas of crayfish decreased gradually. Among fatty acids, the saturated fatty acids (SFA) in the muscle showed a decreasing trend; the monounsaturated fatty acid (MUFA) content first increased and then decreased, reaching peak content of (25.69±0.42%)% at 140 days, whereas the polyunsaturated fatty acid (PUFA) content increased from 90 to 180 days. Furthermore, the SFA content in the hepatopancreas showed no significant difference among the three growth periods (>0.05); the MUFA content first increased and then decreased, peaking (37.44±0.59)% at 140 days, while the PUFA content showed the opposite trend. Moreover, the evaluation of nutritional value revealed that the EAA index (49.96%) of the muscle of 180-day-old (marketable) red crayfish was higher than the FAO/WHO score model (31.50%) and the whole egg protein model (43.10%), which is considered an ideal source of high-quality protein. In conclusion, the consumption of amino acids and fatty acids in the muscle and hepatopancreas is different. These results provide a theoretical reference for understanding the nutritional requirements of red crawfish at different stages of growth and development.

Red crawfish; Different growth stages; Muscle; Hepatopancreas; Amino acid; Fatty acid

LOU Bao, E-mail: loubao6577@163.com; CHEN Honglin, E-mail: shmilyweight@126.com

S963

A

2095-9869(2021)06-0084-09

10.19663/j.issn2095-9869.20200602001

http://www.yykxjz.cn/

秦高嬋, 陳紅林, 儲天琪, 錢豪杰, 樓寶. 不同生長時期紅螯螯蝦肌肉和肝胰腺內(nèi)氨基酸和脂肪酸變化分析. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2021, 42(6): 84–92

QIN G C, CHEN H L, CHU T Q, QIAN H J, LOU B. Amino acid and fatty acid analyses in muscles and hepatopancreas of red crayfish at different growth stages. Progress in Fishery Sciences, 2021, 42(6): 84–92

樓 寶，研究員，E-mail: loubao6577@163.com；陳紅林，E-mail: shmilyweight@126.com

2020-06-02,

2020-06-29

*浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)學(xué)科建設(shè)項目(SSS2020005)資助[This work was supported by the Aquaculture Construction Project of Zhejiang Academy of Agricultural Sciences (SSS2020005)]. 秦高嬋，E-mail: 27459432861@qq.com

(編輯 陳 輝)